"C-33 A細(xì)胞：人子宮頸癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：C-３３A細(xì)胞株是N. Auersperg從宮頸癌切片中建立的一系列細(xì)胞株(參見ATCC CRL-１５９４和ATCC CRL-１５９５)中的一株。 細(xì)胞一開始就表現(xiàn)出亞二倍體核型及上皮細(xì)胞形態(tài)。 連續(xù)傳代可以觀察到核型不穩(wěn)定。 存在成視網(wǎng)膜細(xì)胞瘤蛋白(pRB)，但大小不正常。 P５３表達(dá)上調(diào)，且有一個２７３位密碼子的點(diǎn)突變導(dǎo)致Arg -> Cys的替換。 人乳頭瘤病毒DNA及RNA陰性。
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長：貼壁
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２傳代
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
細(xì)胞生長特性：貼壁生長
細(xì)胞接收操作說明：請仔細(xì)閱讀本操作說明及相應(yīng)的細(xì)胞說明書。本公司細(xì)胞發(fā)貨有四種形式：T２５培養(yǎng)瓶(一般是貼壁細(xì)胞使用，懸浮細(xì)胞也可以)、離心管(懸浮細(xì)胞使用多，當(dāng)然，有些公司也會用這種離心管形式發(fā)貼壁細(xì)胞，但是，長期經(jīng)驗(yàn)來說，貼壁細(xì)胞容易發(fā)生形態(tài)變化，估計(jì)是細(xì)胞培養(yǎng)空間狹小，血清不足導(dǎo)致(最主要是怕運(yùn)輸延誤導(dǎo)致這些情況發(fā)生)，個人不建議用離心管形式發(fā)貼壁細(xì)胞)及干冰(凍存細(xì)胞用，主要是冬天天氣冷，溫度低于４℃的地方，都要考慮凍存細(xì)胞)。T２５培養(yǎng)瓶：是用T２５細(xì)胞培養(yǎng)瓶直接發(fā)貨的形式。收到細(xì)胞后，拆開包裝T２５培養(yǎng)瓶的自封袋，不拆封口膜，表面噴７５%酒精消毒后顯微鏡觀察細(xì)胞狀態(tài)(有條件可以拍下此時細(xì)胞照片)。將細(xì)胞放入３７度培養(yǎng)箱平衡兩小時以上，再處理細(xì)胞。首先將T２５中培養(yǎng)基取出裝好備用，如細(xì)胞密度高于８０%，可以直接消化傳代，相反則加入５-６ml培養(yǎng)基放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)即可。離心管：是用１５ml離心管發(fā)貨的形式，只用于懸浮細(xì)胞發(fā)貨。收到細(xì)胞后消毒處理及將細(xì)胞放入３７度培養(yǎng)箱平衡兩小時以上，再處理細(xì)胞。首先將T２５中培養(yǎng)基取出裝好備用(如果實(shí)驗(yàn)室沒有T２５培養(yǎng)瓶，可以暫時T７５培養(yǎng)瓶，加入１０-１５ml培養(yǎng)基，建議１０ml培養(yǎng)基，也可以使用T１７５培養(yǎng)瓶，加入５０-６０ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)瓶越大，需要的培養(yǎng)基越多。當(dāng)然如果剛接收到細(xì)胞密度不夠的話，不用大瓶子，先用小瓶子養(yǎng)起來再換大的，不然會長得很慢，嚴(yán)重的，會導(dǎo)致細(xì)胞死亡等危險)，平衡完成后，離心(１０００rpm，３min)收集細(xì)胞，棄上清，用新的培養(yǎng)基重懸細(xì)胞并接種至培養(yǎng)瓶或皿中，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。干冰：是用本公司凍存液凍存細(xì)胞后，直接用干冰將凍存的細(xì)胞冷凍發(fā)貨的形式。收到細(xì)胞后按照細(xì)胞復(fù)蘇的步驟操作即可。
在細(xì)胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細(xì)胞生長角度來說，針對細(xì)胞培養(yǎng)過程中生長不好、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細(xì)胞生長不好》可能原因：細(xì)胞本身的狀態(tài)》1)細(xì)胞傳代次數(shù)多，細(xì)胞老化；2)細(xì)胞的接種量：接種量過低，細(xì)胞生長緩慢；3)細(xì)胞傳代時間過晚：細(xì)胞中毒，影響傳代后的細(xì)胞生長；4)胰酶消化時間過長或過短：時間過長，細(xì)胞死亡；時間過短，細(xì)胞未完全分離而成團(tuán)，細(xì)胞死亡；5)細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進(jìn)行驗(yàn)證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準(zhǔn)確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應(yīng)是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個方面的可能原因，做出針對性的解決方案》1)注意細(xì)胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，經(jīng)過驗(yàn)證；4)注意實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細(xì)胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動太大；3)細(xì)胞凍存或復(fù)蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細(xì)胞種；4)檢測培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。
有關(guān)實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞培養(yǎng)基知識普及：經(jīng)典的培養(yǎng)基有很多種，Corning、Invitrogen(GIBCO)、Thermo Fisher(HyClone)等公司都可以提供。其中DMEM、RPMI １６４０、MEM、DMEM/F１２都是應(yīng)用最廣泛的培養(yǎng)基。其他如M１９９、IMDM、L１５培養(yǎng)基等也用于某些細(xì)胞的培養(yǎng)；MEM是由Eagle’s基礎(chǔ)培養(yǎng)基(BME)發(fā)展而來的，其中增加了組分的范圍及濃度；BEM(DMEM)培養(yǎng)基是為小鼠成纖維細(xì)胞設(shè)計(jì)的，現(xiàn)在常用于貼壁細(xì)胞的培養(yǎng)。DMEM的基酸濃度是MEM的兩倍，維生素濃度是MEM的４倍，采用雙倍的HCO３-和CO２濃度起到更好的緩沖作用。最初的配方中葡萄糖含量為１０００mg/L，后來為了某些細(xì)胞的生長需要，將葡萄糖含量又調(diào)整為４５００mg/L，這就是大家常說的低糖和高糖了；aMEM含有附加的基酸、維生素以及核苷和脂肪酸，它可廣泛應(yīng)用于各種細(xì)胞類型，包括對營養(yǎng)成分要求苛刻的細(xì)胞；Ham’s F１２是為在低血清濃度下克隆CHO細(xì)胞而設(shè)計(jì)的，現(xiàn)在也廣泛應(yīng)用于克隆形成率的分析及原代培養(yǎng)。F１２還可以與DMEM等體積混合使用，得到一種高濃度與成分多樣化相結(jié)合的產(chǎn)物，這種培養(yǎng)基已應(yīng)用于許多原代培養(yǎng)及更難養(yǎng)的細(xì)胞系的培養(yǎng)；RPMI １６４０培養(yǎng)基是專為淋巴細(xì)胞培養(yǎng)而設(shè)計(jì)的，現(xiàn)在已廣泛應(yīng)用于懸浮細(xì)胞的培養(yǎng)。
Strain KB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：6-T CEM細(xì)胞、RPMI 8226細(xì)胞、H-1792細(xì)胞
MN9D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U251n細(xì)胞、Vero from pool #76細(xì)胞、HAPI細(xì)胞
H1355細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NBL-3細(xì)胞、SN-12C細(xì)胞、NCI-H250細(xì)胞
TPC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-4細(xì)胞、Mono Mac 1細(xì)胞、U-373MG細(xì)胞
HOP 62細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU886細(xì)胞、NCI-SNU-16細(xì)胞、H-1105細(xì)胞
THP-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR420細(xì)胞、P388-D1細(xì)胞、High Five細(xì)胞
BJAB-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF767細(xì)胞、SkMel31細(xì)胞、Hs739T細(xì)胞
Colo-206F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Shadyside Hospital Pittsburgh-77細(xì)胞、V-79細(xì)胞、NCI-H1930細(xì)胞
SNK-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD 966SK細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-453細(xì)胞、H-2085細(xì)胞
MKN28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TOV112細(xì)胞、D324細(xì)胞、SKLU1細(xì)胞
WM266mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hepatoma-22細(xì)胞、HEK-293細(xì)胞、CEMC1細(xì)胞
H-748細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mel624細(xì)胞、MARC 145細(xì)胞、SK-RC 39細(xì)胞
HOS (TE85, Clone F5)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JurkatE6-1細(xì)胞、HGE細(xì)胞、OCI-Ly03細(xì)胞
32D clone 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A875細(xì)胞、MDA231-LM2細(xì)胞、N-9細(xì)胞
UMNSAH-DF1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC10細(xì)胞、BE(2)-M17細(xì)胞、CAL-12T細(xì)胞
PLA801-95C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-HUT-292細(xì)胞、SK Mel 1細(xì)胞、H841細(xì)胞
PLA801-95C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-HUT-292細(xì)胞、SK Mel 1細(xì)胞、H841細(xì)胞
FU-97細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCl-H157細(xì)胞、MAD109細(xì)胞、Hs819T細(xì)胞
H2141細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Reuber H-35細(xì)胞、LP-1細(xì)胞、NCI-Hut 125細(xì)胞
U251MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：3AO細(xì)胞、Cattle chondrocytes細(xì)胞、MCF10A細(xì)胞
NCIH2135細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MES-SA-Dx5細(xì)胞、OE-21細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-468細(xì)胞
SK-N-BE(1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AZ-521細(xì)胞、NOR-10細(xì)胞、RAMOS2G64C10細(xì)胞
RPE-hTERT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：alpha TC1.6細(xì)胞、NTERA2細(xì)胞、D-283MED細(xì)胞
Dakiki細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS411N細(xì)胞、DU 145細(xì)胞、U031細(xì)胞
JC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI H157細(xì)胞、THEECs細(xì)胞、MDCKII-WT細(xì)胞
Hs 281.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-320-DM細(xì)胞、NCM460細(xì)胞、ARH-77細(xì)胞
PLC-8024細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：aTC1-6細(xì)胞、BT-B細(xì)胞、AMC-HN8細(xì)胞
OVTOKO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RL-65細(xì)胞、Tn 5B1-4細(xì)胞、ketr 3細(xì)胞
HSC6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOP 92細(xì)胞、Dami細(xì)胞、SNU620細(xì)胞
H-1963細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CTX TNA2細(xì)胞、OCI-AML-4細(xì)胞、SK-MEL24細(xì)胞
E.L.4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEL9217細(xì)胞、HEL299細(xì)胞、SVHUC細(xì)胞
C22 (Clara)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFM-192C細(xì)胞、HCC1833細(xì)胞、NCI/ADRRES細(xì)胞
HBVP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1793細(xì)胞、Panc-8_13細(xì)胞、Reuber H35細(xì)胞
HUT 125細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LTEP a2細(xì)胞、TPC1細(xì)胞、SW260細(xì)胞
WEHI3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs294T細(xì)胞、RPMI-7951細(xì)胞、SGC7901/DDP細(xì)胞
SKMel-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WC00097細(xì)胞、Hepatoma-22細(xì)胞、HL-1細(xì)胞
A7r5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKCol1細(xì)胞、HuH6細(xì)胞、NCI-H64細(xì)胞
NCI-H64細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HepaRG細(xì)胞、D-324 Med細(xì)胞、McA-RH7777細(xì)胞
GM02219C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF 10A細(xì)胞、Lec1細(xì)胞、RD 2細(xì)胞
J111細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH650細(xì)胞、Hs819T細(xì)胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14細(xì)胞
NCTC 3960細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-157細(xì)胞、HOS/MNNG細(xì)胞、JAR細(xì)胞
SNU-387細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1395細(xì)胞、NCIH1105細(xì)胞、UMNSAH/DF#1細(xì)胞
SUM-190PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-F1細(xì)胞、Calu-1細(xì)胞、CWR22-R1細(xì)胞
HConEpic細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vero 76 clone E-6細(xì)胞、KP-N-RT細(xì)胞、NCIH929細(xì)胞
IPI-2I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KP-N-RT-BM-1細(xì)胞、Hs870T細(xì)胞、TE-14細(xì)胞
WSU-DLCL-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UWB1.289+BRCA1細(xì)胞、MuM-2C細(xì)胞、H.Ep.-2細(xì)胞
DH82細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IM-95細(xì)胞、J774 A1細(xì)胞、NCIH1793細(xì)胞
NCI-H2330細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 403細(xì)胞、NCI-H820細(xì)胞、MFC細(xì)胞
M 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：32D.cl3細(xì)胞、NCIH187細(xì)胞、639 V細(xì)胞
IPLB-SF-21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Z-138細(xì)胞、COLO320 DM細(xì)胞、786O細(xì)胞
COR L279細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAN-1細(xì)胞、BLO 11細(xì)胞、MDA-157細(xì)胞
MOLM16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：16-HBE14o細(xì)胞、CEM-CCRF細(xì)胞、HSF細(xì)胞
T173細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hep-G2/C3A細(xì)胞、GOS3細(xì)胞、SUNE-1細(xì)胞
MDCC-MSB1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GA10細(xì)胞、CHO Lec1細(xì)胞、KE-37細(xì)胞
X63-Ag8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LU451細(xì)胞、H-196細(xì)胞、SHIN3細(xì)胞
DR2R1610細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：253J細(xì)胞、50.B1細(xì)胞、Tregs細(xì)胞
H1819細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEL細(xì)胞、NCI-H446細(xì)胞、NCI-H1395細(xì)胞
Gerner 7666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 821.T細(xì)胞、RT 112細(xì)胞、HEK 293A細(xì)胞
KMB-17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE354T細(xì)胞、IOSE-80細(xì)胞、Med 283細(xì)胞
HPC-Y5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM02131A細(xì)胞、H1694細(xì)胞、IEC 6細(xì)胞
Hs683T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1836細(xì)胞、PBL細(xì)胞、HTori3細(xì)胞
NCI-H196細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIE-115細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-12T細(xì)胞、L615細(xì)胞
MC 116細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM06141細(xì)胞、KFB細(xì)胞、MH-S細(xì)胞
Vertebral Cancer of the Prostate細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CT26.WT細(xì)胞、JTC-39細(xì)胞、MMVECs細(xì)胞
MCF-7B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat E6.1細(xì)胞、TFK-1細(xì)胞、NCIH1703細(xì)胞
HT1080細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PK-13細(xì)胞、PANC.1細(xì)胞、OS-732細(xì)胞
C643細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VCaP細(xì)胞、CL1細(xì)胞、Hepa1-6細(xì)胞
SEM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LTEP-a2細(xì)胞、OC-3-VGH細(xì)胞、WM115細(xì)胞
16-HBE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MN60細(xì)胞、Transformed Human Liver Epithelial-2細(xì)胞、IPLB-Sf21-AE細(xì)胞
GES-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCET細(xì)胞、PC-14細(xì)胞、GI-1細(xì)胞
GDM-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF7-GFP細(xì)胞、Human Embryo Kidney-2細(xì)胞、HIEC細(xì)胞
H2172細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：alphaTC clone 6細(xì)胞、WM266-4細(xì)胞、HCT-8/V細(xì)胞
H-1355細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCC-HIE-2細(xì)胞、OVCA432細(xì)胞、BC-022細(xì)胞
Fortner's melanotic melanoma #3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MM-1S細(xì)胞、NCI.H460細(xì)胞、Hs746-T細(xì)胞
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