"F56 [Human neoplasm]細胞：人腺癌細胞系
細胞背景資料：F５６是一株人的腺癌細胞系，可用于腺癌發(fā)生機制的研究，也可用于抗癌藥物的篩選。
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２傳代
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數國外著名大學建系
細胞生長特性：貼壁生長
體內細胞培養(yǎng)及其操作步驟：【瘤細胞懸液接種】１)無菌選取生長良好(有光澤，淡紅色)瘤組織或對數生長期培養(yǎng)瘤細胞；２)在PBS中將瘤組織剪碎后用勻漿器研磨，經８０～１００目篩網過濾成細胞懸液；３)培養(yǎng)細胞應用PBS洗兩遍；４)計數并調整細胞濃度至１０７～１０８／ml；５)常規(guī)消毒后，于接種部位(通常為背部或腋窩腹股溝皮下)用醫(yī)用注射器皮下潛行一段后注入細胞懸液(０.１ml／部位，＞１０６細胞)。初次接種成功率低，細胞數盡可能多一些；６)次日注意觀察動物一般情況。初次接種一般有一段較長的潛伏期，以后隨著傳代潛伏期逐漸縮短，最后固定為一個相對穩(wěn)定的時間。【腹水瘤的建立與腹水瘤的接種】將實體瘤細胞直接種于小鼠腹腔、腹壁或其他部位，引起腹水，腹水中含有瘤細胞，將這種腹水反復傳代，即可成為腹水瘤。初次傳代時，腹水常呈血性(含大量紅細胞)，反復傳代后腹水逐漸變成乳白色。腹水瘤的接種過程如下。１)將凍存或培養(yǎng)的腹水瘤細胞離心和洗滌，進行細胞計數；２)消毒動物，左下腹穿刺接種１０６腹水瘤細胞；３)接種腹水瘤細胞后約７~１２d，待小鼠腹部明顯膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部，用９號針頭抽取腹水，也可行腹部解剖后，用滴管吸取。每只小鼠可抽３~５ml；４)抽取的腹水經３０００rpm離心１５min，收集上清，分裝凍存?zhèn)溆谩?br /> 細胞培養(yǎng)過程中，總是會出現各種意想不到的問題，一不留神就會全盤皆輸。所謂細胞虐我千百遍，我待細胞如初戀。下面是貼壁細胞的保藏方法，希望對細胞培養(yǎng)初學操作者有所幫助：1)觀察細胞狀態(tài)：貼壁細胞密度達到85-90%，即可以細胞凍存形式進行保藏，拍照，記錄細胞狀態(tài)；2)細胞清洗：培養(yǎng)皿表面消毒后，轉移至生物安全柜中，去除培養(yǎng)皿中培養(yǎng)液，加入12mlPBS，輕輕搖晃培養(yǎng)皿清洗細胞，隨后吸除PBS清洗液；3)細胞消化：將2ml胰酶加入培養(yǎng)皿中，完全覆蓋細胞，置于顯微鏡下觀察（期間禁止搖晃培養(yǎng)皿），當細胞剛開始脫落時，立即轉移至生物安全柜中，除去大部分胰酶，剩余約0.5ml胰酶，轉移至培養(yǎng)箱內繼續(xù)消化，每30秒肉眼觀察細胞狀態(tài)，至細胞成流沙狀完全脫落，轉移至生物安全柜中，加入12ml完全培養(yǎng)基，終止消化；4)細胞離心：將終止消化后的細胞懸液吹打均勻，吸取至15ml離心管中，1000r/min（110g），離心3min；5)細胞凍存：離心后去除細胞上清液，按照凍存細胞量5*10^5/ml，吸取凍存液重懸細胞沉淀，吹打均勻后分裝至相應的凍存管中，進行凍存；6)細胞保藏：凍存管做好標記，放至程序降溫盒中，于4℃冰箱放置30min，轉移至-80℃超低溫冰箱過夜，將過夜后的凍存細胞轉移至液氮中保藏。
細胞傳代培養(yǎng)(消化法)標準操作規(guī)程【原理】細胞在培養(yǎng)瓶長成致密單層后，已基本上飽和，為使細胞能繼續(xù)生長，同時也將細胞數量擴大，就必須進行傳代(再培養(yǎng))。傳代培養(yǎng)也是一種將細胞種保存下去的方法。同時也是利用培養(yǎng)細胞進行各種實驗的必經過程。懸浮型細胞直接分瓶就可以，而貼壁細胞需經消化后才能分瓶。【材料和試劑】１)無菌生理緩沖液(PBS)；２)胰酶-EDTA溶液(０.０５%胰酶-０.５３mM EDTA-４Na): 以１０ml分裝于１５ ml無菌離心管中，保存于–２０℃，使用前放在３７℃水槽回溫；３)新鮮培養(yǎng)基；４)無菌吸管/離心管/培養(yǎng)瓶【傳代前準備操作】１)預熱培養(yǎng)用液：把已經配制好的裝有培養(yǎng)液、PBS液和胰蛋白酶的瓶子放入３７℃水浴鍋內預熱；２)用７５％酒精擦拭經過紫外線照射的超凈工作臺和雙手；３)正確擺放使用的器械：保證足夠的操作空間，不僅便于操作而且可減少污染；４)點燃酒精燈：注意火焰不能太?。唬?準備好將要使用的消毒后的空培養(yǎng)瓶；６)取出預熱好的培養(yǎng)用液，用酒精棉球擦拭好后方能放入超凈臺內；７)從培養(yǎng)箱內取出細胞：注意取出細胞時要旋緊瓶蓋，用酒精棉球擦拭顯微鏡的臺面，再在鏡下觀察細胞；８)打開瓶口：將各瓶口一一打開，同時要在酒精燈上燒口消毒。
NCI-H1836細胞系相關產品：GRSL細胞、WM 266-4細胞、Jurkat 77細胞
SNU-387細胞系相關產品：H-1395細胞、NCIH1105細胞、UMNSAH/DF#1細胞
SuDHL 4細胞系相關產品：Evsa T細胞、H-1876細胞、WTRL1細胞
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Epstein-Barr-1細胞系相關產品：HIT T-15細胞、HCC1359細胞、MDCC-MSB-1細胞
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Rainbow Trout Embryo細胞系相關產品：SupB15W細胞、BOWES細胞、TOG細胞
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