"RWPE-1細胞：人正常前列腺上皮細胞系
細胞背景資料：腫瘤抑制基因： p５３ + [PubMed: ９２１４６０５] pRB + [PubMed: ９２１４６０５] 一位正常男性前列腺組織切片的周圍區(qū)域的上皮細胞用單拷貝的人乳頭瘤病毒的１８(HPV-１８)進行轉化，建立了RWPE-１ (ATCC CRL-１１６０９) 細胞株 [PubMed: ９２１４６０５]. 在三維Matrigel培養(yǎng)時，在雄激素作用下，RWPE-１細胞形成腺胞并向培養(yǎng)基中分泌PSA。[PubMed: １１１７０１４２]. 當與Matrigel或基質(zhì)細胞混合注射雄性裸鼠時，RWPE-１細胞也能形成腺胞[PubMed: １１３０４７２４] 并產(chǎn)生PSA。 來源于RWPE-１的細胞再用Kirstin鼠類腫瘤病毒轉染Ki-ras基因，建立了能成瘤的RWPE-２細胞株(ATCC CRL-１１６１０) [PubMed: ９２１４６０５] 和 RWPE２-W９９ (ATCC CRL-２８５３) 細胞株。 另外，用N--N-(MNU)處理RWPE-１，建立了一系列模擬前列腺癌進程中不同時期的成瘤細胞株。 它們是 WPE１-NA２２ (ATCC CRL-２８４９), WPE１-NB１４ (ATCC CRL-２８５０, WPE１-NB１１ (ATCC CRL-２８５１) 和 WPE１-NB２６ (ATCC CRL-２８５２) 細胞株。 據(jù)提供者報道，RWPE-１ 細胞株(ATCC CRL-１１６０９)經(jīng)過檢測，乙肝、丙肝、人免疫缺陷病毒都呈陰性。
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：３傳代,２-３天傳一代。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
細胞生長特性：貼壁生長
解凍細胞常見實驗問題分析及推薦解決方法：在解凍凍存細胞時，發(fā)現(xiàn)會出現(xiàn)存活率低、大量細胞碎片及生長緩慢等問題，究竟是什么原因導致，我們該怎么進行解決？以下是國內(nèi)外細胞培養(yǎng)專家針對解凍細胞實驗問題，總結的一些解決方案！出現(xiàn)低存活率的可能原因及推薦解決方案如下：１)解凍過程中細胞裂解，推薦的解決方案：可預期到一定量的細胞死亡，因此細胞的濃度應足夠高，考慮到這一損失。起始濃度為１*１０(６)至１*１０(７)細胞/毫升；２)解凍過程中的問題，推薦的解決方案：在-７０℃至-８０℃下保存冷凍的培養(yǎng)物，保存時間為１-５天，但這不是保存的方法。在３７℃充分解凍后應立即開始培養(yǎng)；３)對冷凍液過敏，推薦的解決方案：A.完全或部分更換培養(yǎng)基，減少培養(yǎng)基中冷凍液的量。在２４小時后更換培養(yǎng)液體可全部去除冷凍液。B.留出更多時間供培養(yǎng)物恢復。有時細胞需要幾周時間才能形成單層或密集的懸浮物，取決于冷凍時細胞的年齡或傳代次數(shù)或在生長階段中的位置。冷凍的條件在對數(shù)期；４)被冷凍的原種細胞的年齡或冷凍時培養(yǎng)物的年齡，推薦的解決方案：解凍最近冷凍的細胞。細胞處于冷凍狀態(tài)的時間越長，存活率越低。檢查冷凍細胞的時間和方法。在冷凍時細胞應處于對數(shù)期。
在細胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細胞生長角度來說，針對細胞培養(yǎng)過程中生長不好、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對應的解決方法。一、培養(yǎng)細胞生長不好》可能原因：細胞本身的狀態(tài)》1)細胞傳代次數(shù)多，細胞老化；2)細胞的接種量：接種量過低，細胞生長緩慢；3)細胞傳代時間過晚：細胞中毒，影響傳代后的細胞生長；4)胰酶消化時間過長或過短：時間過長，細胞死亡；時間過短，細胞未完全分離而成團，細胞死亡；5)細胞的凍存與復蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進行驗證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個方面的可能原因，做出針對性的解決方案》1)注意細胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，經(jīng)過驗證；4)注意實驗室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動太大；3)細胞凍存或復蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細胞種；4)檢測培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。
我常看到一個比較復雜的四步消化法，這個挺有意思，我也是次聽說，應該是網(wǎng)友自己發(fā)展出來的方法，很有參考價值。但我估計這個方法可能對付少數(shù)非常怪異的細胞才需要這么復雜的程序。我目前養(yǎng)過的近３００株細胞里面，還沒遇到這么怪異的。比如Caco２其實是很好消化的細胞，不需要胰酶孵育即可，只是有點成片分布。不要以為成片分布是自己沒養(yǎng)好，這個視細胞而定。如果和標準形態(tài)不一致，那可能是自己沒消化好導致的，但如果消化方法正確，仍然成片分布，甚至完全吹打成單細胞懸液，貼壁后仍然成片分布，這是細胞的特性，是因為貼壁過程中重新聚集了。這個時候你拼了命要去讓它均勻分布，你的細胞之后會對你越來越不好；比較難消化的細胞(潤洗方法５min還不能消化)，就以colon cancer為例，比如HCT１５, LS４１１和KM１２，這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００ mm dish，一次最多加入５００ul，就足夠了，一般我加３００ul。即使這樣難消化的細胞，一般不超過５min，即可見細胞成片移動，就應該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候，比如tsDC細胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙狀移動。
Human Embryonic Kidney 293細胞系相關產(chǎn)品：My-La 2059細胞、NKL細胞、NKL細胞
K422細胞系相關產(chǎn)品：N2a細胞、DHL-8細胞、Chang Cells細胞
Ly8細胞系相關產(chǎn)品：Vx-2細胞、LU451細胞、CWR22-Rv1細胞
NCI-SNU-878細胞系相關產(chǎn)品：VERO C 1008細胞、CCRF-CEM C7細胞、COR L279細胞
Panc813細胞系相關產(chǎn)品：Vero-E6細胞、HPB-ALL細胞、SuDHL 2細胞
EA.hy 926細胞系相關產(chǎn)品：RAMSCs細胞、SKMel-5細胞、HEI-193細胞
32Dc3細胞系相關產(chǎn)品：L-M(TK-)細胞、BMSCs（mBMSCs）細胞、BE(2)M-17細胞
HeLa/S3細胞系相關產(chǎn)品：Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1細胞、NCTC1469細胞、GP-293細胞
NCIH2073細胞系相關產(chǎn)品：BCECs細胞、L23/P細胞、ECC1細胞
C26細胞系相關產(chǎn)品：LS123細胞、TNC-1B12B4細胞、H9c2細胞
SKGIIIA細胞系相關產(chǎn)品：Strain L-929細胞、MDAMB415細胞、H1672細胞
GM16136細胞系相關產(chǎn)品：RGM1細胞、MUS-M1細胞、C3H10T1-2細胞
P3X63Ag8.653細胞系相關產(chǎn)品：SW 48細胞、CMT-167細胞、Beta-TC-6細胞
C38細胞系相關產(chǎn)品：SUDHL1細胞、NCI-H441-4細胞、RBL 2H3細胞
Panc2.03細胞系相關產(chǎn)品：AMJ2-C8細胞、U266BL細胞、C 6細胞
SMMC-7721細胞系相關產(chǎn)品：CCD841CoN細胞、NCIH1651細胞、L Wnt-3A細胞
SMMC-7721細胞系相關產(chǎn)品：CCD841CoN細胞、NCIH1651細胞、L Wnt-3A細胞
H28細胞系相關產(chǎn)品：H1618細胞、HOK細胞、V79-GalK1細胞
L-5178-Y-R細胞系相關產(chǎn)品：WPE-int細胞、SW260細胞、OUMS23細胞
D283-MED細胞系相關產(chǎn)品：MBVP細胞、CAL 78細胞、WM115-mel細胞
NCI-H1694細胞系相關產(chǎn)品：H1048細胞、OKAC1細胞、NCI-H441細胞
MDAMB330細胞系相關產(chǎn)品：Sarcoma OSteogenic-2細胞、OsA-CL細胞、MADISON LUNG TA-109細胞
Hs274T細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H1437細胞、CAOV3細胞、PC-9/S1細胞
KMST6細胞系相關產(chǎn)品：MH7A細胞、SUM102PT細胞、NB19-RIKEN細胞
ASPC1細胞系相關產(chǎn)品：HT-144細胞、TE671/RD細胞、MFM223細胞
Colon26細胞系相關產(chǎn)品：ABE­8.1/2細胞、TE 85.T細胞、BCECs細胞
SNU668細胞系相關產(chǎn)品：Malme-3M細胞、H-446細胞、DU 4475細胞
CEM T4細胞系相關產(chǎn)品：DHL5細胞、Douglas Foster-1細胞、NPA 87細胞
Pt K1 (NBL-3)細胞系相關產(chǎn)品：Jurkat 77細胞、Hs-281-T細胞、Huh-7.5.1細胞
Huh7.5.1細胞系相關產(chǎn)品：H716細胞、MM96L細胞、LoMeT-ccRcc細胞
SW962細胞系相關產(chǎn)品：A375.S2細胞、HTR-8/SVneo細胞、3T6-Swiss albino細胞
FDCP1細胞系相關產(chǎn)品：RT4P細胞、CCRF/CEM細胞、COR-L23細胞
FTC133細胞系相關產(chǎn)品：HCC1395細胞、HSAS1細胞、HCA 7細胞
CAL-39細胞系相關產(chǎn)品：B16 subline B78細胞、EA.hy 926細胞、MC-3T3-E1細胞
NIE-115細胞系相關產(chǎn)品：MRASMC細胞、Hs852細胞、L5178Y細胞
HNTEC細胞系相關產(chǎn)品：MES-SA細胞、NRK clone 52E細胞、MCM細胞
WIL2 S細胞系相關產(chǎn)品：OSKM-1細胞、SW-1222細胞、HCC-2218細胞
WIL2 S細胞系相關產(chǎn)品：OSKM-1細胞、SW-1222細胞、HCC-2218細胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-4細胞系相關產(chǎn)品：MDA-MB361細胞、SW-837細胞、Cloudman M3細胞
J45.01細胞系相關產(chǎn)品：H-87細胞、Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A細胞、KYSE0030細胞
RTE細胞系相關產(chǎn)品：ECC-1細胞、UACC 893細胞、H-250細胞
HEC151細胞系相關產(chǎn)品：Monomac-1細胞、LN-382細胞、253J細胞
HBL1細胞系相關產(chǎn)品：U2-OS細胞、VSMC細胞、D324細胞
H-211細胞系相關產(chǎn)品：SUM 190細胞、HT1197細胞、CEM C7細胞
Hu-P-T3細胞系相關產(chǎn)品：OCM1細胞、NCI-H28細胞、526mel細胞
HAVSMC細胞系相關產(chǎn)品：HCC95細胞、P3/NS1/1-Ag4-1細胞、Colon-38細胞
NCIH1105細胞系相關產(chǎn)品：ST 486細胞、CT26.WT細胞、H-1299細胞
NB-19細胞系相關產(chǎn)品：HREC細胞、PGLH7細胞、F98細胞
VK-2/E6E7細胞系相關產(chǎn)品：HS-445細胞、HT(H9)細胞、GLC82細胞
H847細胞系相關產(chǎn)品：FRO細胞、Huh 7.5.1細胞、PE/CA-PJ34 (clone C12)細胞
N-Tera-2細胞系相關產(chǎn)品：RBL-2H3細胞、IEC 18細胞、PC-3M IE8細胞
HeLa S 3細胞系相關產(chǎn)品：YD-38細胞、C2BBe 1細胞、L-363細胞
SUM 159PT細胞系相關產(chǎn)品：GM02132細胞、TE-5細胞、P3-X63Ag8.653細胞
CHOK1細胞系相關產(chǎn)品：SKRC20細胞、R 1610細胞、KHYG-1細胞
Hep-G2/C3A細胞系相關產(chǎn)品：alpha TC1-6細胞、BJA-B-1細胞、aTC1-6細胞
MSTO-211細胞系相關產(chǎn)品：HSC2細胞、TFK1細胞、SK.MEL.2細胞
MCA38細胞系相關產(chǎn)品：U-hth74細胞、DMS 273細胞、P3/NSI/1-AG4-1細胞
PANC0504細胞系相關產(chǎn)品：ATN1細胞、HIT細胞、SK-MEL-24細胞
OSK-1細胞系相關產(chǎn)品：REC-1細胞、Pro-5 Lec1.3c細胞、A-549細胞
KYSE450細胞系相關產(chǎn)品：NALM 6細胞、HEK293FT細胞、KMBC細胞
ECC1細胞系相關產(chǎn)品：MC3T3-E1 Subclone 24細胞、GM-3573細胞、DKMG細胞
OVCAR8細胞系相關產(chǎn)品：RCC4細胞、SKRC-39細胞、Panc4.03細胞
A1847細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H345細胞、NCI-H647細胞、P-2003細胞
Panc 5.04細胞系相關產(chǎn)品：WBF344細胞、CA-OV-3細胞、MESSA Dx5細胞
MeSoTheliOma-211H細胞系相關產(chǎn)品：BIU-87細胞、Instituto Biologico-Rim Suino-2細胞、SU-DHL-1細胞
CoC1細胞系相關產(chǎn)品：D324細胞、L540細胞、74Int細胞
DrG細胞系相關產(chǎn)品：H1373細胞、OAW42細胞、JB6 clone 30, subclone 7b細胞
MDCK-II細胞系相關產(chǎn)品：C-Lu-65細胞、MN-60細胞、HCC94細胞
UCH1細胞系相關產(chǎn)品：HBZY1細胞、H-650細胞、P3J HR1-K細胞
BEL/FU細胞系相關產(chǎn)品：KOSC-2 cl3-43細胞、HBL1細胞、RT-BM細胞
HCC1428細胞系相關產(chǎn)品：P-388細胞、MV4II細胞、KE-39細胞
TE3細胞系相關產(chǎn)品：HT 1376細胞、Y3細胞、343MG細胞
Ly8細胞系相關產(chǎn)品：Vx-2細胞、HR1K細胞、3T3-Swiss albino細胞
SK MEL-28細胞系相關產(chǎn)品：H740細胞、HEK-293H細胞、EU-2細胞
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