"SNU-182細胞：人肝癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２傳代
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
細胞生長特性：貼壁生長
養(yǎng)了幾年細胞，說一點自己培養(yǎng)細胞方面的看法：１)培養(yǎng)細胞前，可以看看細胞特點說明書，包括細胞正常生長的狀態(tài)圖、傳代、培養(yǎng)基的類型等；２)不同細胞生長周期不同，有的生長很快，比如說MDA-MB-２３１，傳代的時候取離心懸液的十分之一就已經(jīng)足夠了，有的又是特別慢，等的人心焦，BT４７４就是，傳代是一分二，復蘇起始的時候兩周多才能長滿，所以就要在培養(yǎng)細胞的過程中多多摸索了；３)對于嬌弱的細胞，就得細心呵護了，胰酶消化不能過久，吹得時候要輕柔，離心時候也要注意轉(zhuǎn)速和時間，每天都要去看一下細胞，肉眼觀察培養(yǎng)基狀況、顯微鏡下觀察細胞生長狀況；４)凍存細胞復蘇后第二天更換一次培養(yǎng)基；５)培養(yǎng)箱隔一段時間徹底用酒精棉擦洗一次；６)養(yǎng)細胞的教訓：不能偷懶!細胞虐我千百遍，我待細胞如初戀。１)不管買的細胞、惠贈的細胞，剛拿到手趕緊做兩件事：檢測是否有支原體污染; 迅速擴增凍存；２)發(fā)現(xiàn)有污染迅速處理掉，特別是當你養(yǎng)了很多種細胞時; 細菌污染，真菌污染很容易發(fā)現(xiàn)，支原體污染的話，細胞會長的慢，買個支原體檢測的kit定期檢測一下；３)傳代細胞日常的值日清潔是必須的，此外還要定期熏蒸；４)細胞的傳代一定要規(guī)律，保持相同的confluency和傳代時間間隔，不要隨心所欲或者拖延；５)注意個人衛(wèi)生。
在細胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細胞生長角度來說，針對細胞培養(yǎng)過程中生長不好、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對應的解決方法。一、培養(yǎng)細胞生長不好》可能原因：細胞本身的狀態(tài)》1)細胞傳代次數(shù)多，細胞老化；2)細胞的接種量：接種量過低，細胞生長緩慢；3)細胞傳代時間過晚：細胞中毒，影響傳代后的細胞生長；4)胰酶消化時間過長或過短：時間過長，細胞死亡；時間過短，細胞未完全分離而成團，細胞死亡；5)細胞的凍存與復蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進行驗證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個方面的可能原因，做出針對性的解決方案》1)注意細胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，經(jīng)過驗證；4)注意實驗室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動太大；3)細胞凍存或復蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細胞種；4)檢測培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。
我?？吹揭粋€比較復雜的四步消化法，這個挺有意思，我也是次聽說，應該是網(wǎng)友自己發(fā)展出來的方法，很有參考價值。但我估計這個方法可能對付少數(shù)非常怪異的細胞才需要這么復雜的程序。我目前養(yǎng)過的近３００株細胞里面，還沒遇到這么怪異的。比如Caco２其實是很好消化的細胞，不需要胰酶孵育即可，只是有點成片分布。不要以為成片分布是自己沒養(yǎng)好，這個視細胞而定。如果和標準形態(tài)不一致，那可能是自己沒消化好導致的，但如果消化方法正確，仍然成片分布，甚至完全吹打成單細胞懸液，貼壁后仍然成片分布，這是細胞的特性，是因為貼壁過程中重新聚集了。這個時候你拼了命要去讓它均勻分布，你的細胞之后會對你越來越不好；比較難消化的細胞(潤洗方法５min還不能消化)，就以colon cancer為例，比如HCT１５, LS４１１和KM１２，這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００ mm dish，一次最多加入５００ul，就足夠了，一般我加３００ul。即使這樣難消化的細胞，一般不超過５min，即可見細胞成片移動，就應該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候，比如tsDC細胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙狀移動。
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MCF-7/AdrR細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI no 8226細胞、NCIH28細胞、HBE135-E6E7細胞
JVM-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE180細胞、HEL92.1.7細胞、Tca8113細胞
SNU182細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U266細胞、CC-LP-1細胞、hTERT-RPE1細胞
MES-SA/Dx-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RS1細胞、HEK 293T/17細胞、HSCT6細胞
NCIH322細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-1116細胞、H-865細胞、Henrietta Lacks cells細胞
HuTu 80細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT483細胞、MPC-83細胞、Nakata-1細胞
NCI H345細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TOV112D細胞、Earles's cells細胞、PATU-S細胞
Bowes melanoma cells細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1187細胞、Panc327細胞、QGY-7701細胞
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Rat podocyte細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM 239-A細胞、HCC2185細胞、CHL-1細胞
HCC1599細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ARO 81-1細胞、ChaGo-K-1細胞、HCC95細胞
Loucy細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hep G2/C3A細胞、Mc Ardle 7777細胞、Hs294T細胞
ASPC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT-144細胞、TE671/RD細胞、MFM223細胞
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HS-68細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1438細胞、CCD-112 CoN細胞、ChaGo-K-1細胞
TCC-SUP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTERA-2/D1細胞、COLO824細胞、SK-RC-20細胞
32Dc3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-M(TK-)細胞、BMSCs（mBMSCs）細胞、BE(2)M-17細胞
SUM190細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 780細胞、JURKAT E-61細胞、SCC15細胞
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Kit225細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-BE(2)-M17細胞、CAL-27細胞、NCIH2107細胞
FRH-0201細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LNCaP-Clone-FGC細胞、H-125細胞、SCLC-21H細胞
Ramos-2G6-4C10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT 549細胞、PANC0327細胞、COS7細胞
MCF7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHG5細胞、GES-1細胞、L132細胞
NCI-H774細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UMUC14細胞、BE2_C細胞、CCC-HEL-1細胞
RBSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LNCaP-C4-2細胞、MDA MB231細胞、HFT 8810細胞
EFM-192C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-33A細胞、MDAPC2B細胞、293-H細胞
KPL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS-940-T細胞、C2BBe1細胞、MV 3細胞
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GM637A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HO-8910 PM細胞、686LN-M4e細胞、Hs 746.T細胞
RGB細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RL細胞、LTEP a2細胞、SK-MES細胞
DHL-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Normal Rat Kidney細胞、PL11細胞、Fu97細胞
Jurkat (clone E6-1)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW756細胞、CEM-CCRF (CAMR)細胞、MOLT-16細胞
H-2085細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC-PAP細胞、GTL16細胞、NCTC 3960細胞
OCM-1A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A.704細胞、Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B細胞、OCILY3細胞
AGS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Glioma 261細胞、B 95.8細胞、H-596細胞
Hepa-RG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF 763細胞、DHL4細胞、NCIH1373細胞
NS1-Ag 4/1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Meat Animal Research Center-145細胞、AMO-1細胞、ESC細胞
M21細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1385細胞、RKO細胞、SKCO 1細胞
NCIH322細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-1116細胞、H-865細胞、Henrietta Lacks cells細胞
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NCI-H838細胞系相關(guān)產(chǎn)品：hTERT-RPE-1細胞、SNU216細胞、130 T細胞
P3-X63Ag8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC 2185細胞、B16/F0細胞、NUGC4細胞
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