"NCI-H661細(xì)胞：人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：該細(xì)胞１９８２年建系，源自一位患有大細(xì)胞肺癌的男性的胸腔積液。該細(xì)胞角蛋白、波形蛋白陽(yáng)性。
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：３—１：５傳代，每周換液２—３次
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)
體內(nèi)細(xì)胞培養(yǎng)及其操作步驟：【瘤細(xì)胞懸液接種】１)無(wú)菌選取生長(zhǎng)良好(有光澤，淡紅色)瘤組織或?qū)?shù)生長(zhǎng)期培養(yǎng)瘤細(xì)胞；２)在PBS中將瘤組織剪碎后用勻漿器研磨，經(jīng)８０～１００目篩網(wǎng)過(guò)濾成細(xì)胞懸液；３)培養(yǎng)細(xì)胞應(yīng)用PBS洗兩遍；４)計(jì)數(shù)并調(diào)整細(xì)胞濃度至１０７～１０８／ml；５)常規(guī)消毒后，于接種部位(通常為背部或腋窩腹股溝皮下)用醫(yī)用注射器皮下潛行一段后注入細(xì)胞懸液(０.１ml／部位，＞１０６細(xì)胞)。初次接種成功率低，細(xì)胞數(shù)盡可能多一些；６)次日注意觀察動(dòng)物一般情況。初次接種一般有一段較長(zhǎng)的潛伏期，以后隨著傳代潛伏期逐漸縮短，最后固定為一個(gè)相對(duì)穩(wěn)定的時(shí)間?！靖顾龅慕⑴c腹水瘤的接種】將實(shí)體瘤細(xì)胞直接種于小鼠腹腔、腹壁或其他部位，引起腹水，腹水中含有瘤細(xì)胞，將這種腹水反復(fù)傳代，即可成為腹水瘤。初次傳代時(shí)，腹水常呈血性(含大量紅細(xì)胞)，反復(fù)傳代后腹水逐漸變成乳白色。腹水瘤的接種過(guò)程如下。１)將凍存或培養(yǎng)的腹水瘤細(xì)胞離心和洗滌，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)；２)消毒動(dòng)物，左下腹穿刺接種１０６腹水瘤細(xì)胞；３)接種腹水瘤細(xì)胞后約７~１２d，待小鼠腹部明顯膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部，用９號(hào)針頭抽取腹水，也可行腹部解剖后，用滴管吸取。每只小鼠可抽３~５ml；４)抽取的腹水經(jīng)３０００rpm離心１５min，收集上清，分裝凍存?zhèn)溆谩?br /> 在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中會(huì)出現(xiàn)這樣或那樣的問(wèn)題，客戶遇到的問(wèn)題從細(xì)胞生長(zhǎng)角度來(lái)說(shuō)，針對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中生長(zhǎng)不好、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對(duì)應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)不好》可能原因：細(xì)胞本身的狀態(tài)》1)細(xì)胞傳代次數(shù)多，細(xì)胞老化；2)細(xì)胞的接種量：接種量過(guò)低，細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢；3)細(xì)胞傳代時(shí)間過(guò)晚：細(xì)胞中毒，影響傳代后的細(xì)胞生長(zhǎng)；4)胰酶消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短：時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，細(xì)胞死亡；時(shí)間過(guò)短，細(xì)胞未完全分離而成團(tuán)，細(xì)胞死亡；5)細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進(jìn)行驗(yàn)證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準(zhǔn)確無(wú)誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應(yīng)是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個(gè)方面的可能原因，做出針對(duì)性的解決方案》1)注意細(xì)胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，經(jīng)過(guò)驗(yàn)證；4)注意實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細(xì)胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無(wú)CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動(dòng)太大；3)細(xì)胞凍存或復(fù)蘇過(guò)程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測(cè)培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細(xì)胞種；4)檢測(cè)培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。
有關(guān)實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞培養(yǎng)基知識(shí)普及：經(jīng)典的培養(yǎng)基有很多種，Corning、Invitrogen(GIBCO)、Thermo Fisher(HyClone)等公司都可以提供。其中DMEM、RPMI １６４０、MEM、DMEM/F１２都是應(yīng)用最廣泛的培養(yǎng)基。其他如M１９９、IMDM、L１５培養(yǎng)基等也用于某些細(xì)胞的培養(yǎng)；MEM是由Eagle’s基礎(chǔ)培養(yǎng)基(BME)發(fā)展而來(lái)的，其中增加了組分的范圍及濃度；BEM(DMEM)培養(yǎng)基是為小鼠成纖維細(xì)胞設(shè)計(jì)的，現(xiàn)在常用于貼壁細(xì)胞的培養(yǎng)。DMEM的基酸濃度是MEM的兩倍，維生素濃度是MEM的４倍，采用雙倍的HCO３-和CO２濃度起到更好的緩沖作用。最初的配方中葡萄糖含量為１０００mg/L，后來(lái)為了某些細(xì)胞的生長(zhǎng)需要，將葡萄糖含量又調(diào)整為４５００mg/L，這就是大家常說(shuō)的低糖和高糖了；aMEM含有附加的基酸、維生素以及核苷和脂肪酸，它可廣泛應(yīng)用于各種細(xì)胞類(lèi)型，包括對(duì)營(yíng)養(yǎng)成分要求苛刻的細(xì)胞；Ham’s F１２是為在低血清濃度下克隆CHO細(xì)胞而設(shè)計(jì)的，現(xiàn)在也廣泛應(yīng)用于克隆形成率的分析及原代培養(yǎng)。F１２還可以與DMEM等體積混合使用，得到一種高濃度與成分多樣化相結(jié)合的產(chǎn)物，這種培養(yǎng)基已應(yīng)用于許多原代培養(yǎng)及更難養(yǎng)的細(xì)胞系的培養(yǎng)；RPMI １６４０培養(yǎng)基是專(zhuān)為淋巴細(xì)胞培養(yǎng)而設(shè)計(jì)的，現(xiàn)在已廣泛應(yīng)用于懸浮細(xì)胞的培養(yǎng)。
NCI-H889細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3 88 D1細(xì)胞、MCF.10A細(xì)胞、BCAP37細(xì)胞
Me-Wo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEM細(xì)胞、HO1-N-1細(xì)胞、SW837細(xì)胞
BE(2)-M17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-774細(xì)胞、A2780細(xì)胞、beta-TC6細(xì)胞
U87-MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1385細(xì)胞、C3H10T1-2細(xì)胞、C33-A細(xì)胞
LICCF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Emory University-3細(xì)胞、DB細(xì)胞、EJ1細(xì)胞
CAL62細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2405細(xì)胞、NCI-H-82細(xì)胞、AgC11x3A細(xì)胞
BALB/c 3T3 clone A31細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SVHUC細(xì)胞、SUM-159細(xì)胞、H-1573細(xì)胞
UWB1.289+BRCA1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Capan 1細(xì)胞、MDA-MB-435細(xì)胞、SUM149細(xì)胞
Centre Antoine Lacassagne-85-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHP-212細(xì)胞、Caco2BBe細(xì)胞、MDA330細(xì)胞
HC-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hca-F細(xì)胞、BT-483細(xì)胞、KATO 3細(xì)胞
SNU-119細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HL7702細(xì)胞、IBRS2細(xì)胞、PaCa2細(xì)胞
HOS-MNNG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GB1細(xì)胞、HUC細(xì)胞、H187細(xì)胞
HCC-1428細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BNL-CL.2細(xì)胞、HFL1細(xì)胞、130-T細(xì)胞
Hep-3B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs445細(xì)胞、T24細(xì)胞、HOS/MNNG細(xì)胞
SUDHL5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T98-G細(xì)胞、NEC-8細(xì)胞、KP 4細(xì)胞
Roswell Park Memorial Institute 6666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC-019細(xì)胞、UM2細(xì)胞、LU-65M細(xì)胞
Roswell Park Memorial Institute 6666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC-019細(xì)胞、UM2細(xì)胞、LU-65M細(xì)胞
HBE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-446細(xì)胞、RL細(xì)胞、mIMCD3細(xì)胞
H-187細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs27F細(xì)胞、MDA-MB468細(xì)胞、JTC-39細(xì)胞
C33-A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly03細(xì)胞、A-498細(xì)胞、NGP細(xì)胞
huH 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lewis lung carcinoma細(xì)胞、D283 Med細(xì)胞、343MG細(xì)胞
Madin-Darby Canine Kidney細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-251細(xì)胞、CCC-HEL-1細(xì)胞、RERF-LC-MS細(xì)胞
SK-N-DZ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-1847細(xì)胞、EC109細(xì)胞、BEL 7405細(xì)胞
BE(2)M17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mhh-Call 2細(xì)胞、MPP-89細(xì)胞、Normal Rat, August 3, 1983細(xì)胞
P3 NS1 Ag4/1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OLN93細(xì)胞、Panc 2.03細(xì)胞、H-740細(xì)胞
IHH4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCTC929細(xì)胞、NCI-H1836細(xì)胞、VP267細(xì)胞
TGHAVSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC70細(xì)胞、Hs839.T細(xì)胞、Raji細(xì)胞
HONE-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PG-4 S+L-細(xì)胞、GM05372E細(xì)胞、H1522細(xì)胞
B16F1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：870細(xì)胞、IPLB-Sf21細(xì)胞、BALB/3T3 cl. A31細(xì)胞
Chang Cells細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Z138細(xì)胞、G-361細(xì)胞、KYSE450細(xì)胞
NCI-SNU-C2B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：X63-Ag8細(xì)胞、SUM 52細(xì)胞、GL261細(xì)胞
Hs888Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 829細(xì)胞、Y79細(xì)胞、SUM52PE細(xì)胞
Panc 4.03細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI-3細(xì)胞、RTE細(xì)胞、NCI-H2452細(xì)胞
TE-85細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Calf Pulmonary Artery 47細(xì)胞、MDCK Type II細(xì)胞、COLO-320細(xì)胞
MHCC-LM3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-28I2細(xì)胞、JROECL19細(xì)胞、Hs934T細(xì)胞
8505C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BGC823細(xì)胞、NCI-H1930細(xì)胞、Danio rerio Gill細(xì)胞
Hs 888Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ramos 2G6 4C10細(xì)胞、KP2細(xì)胞、KYSE70細(xì)胞
JVM-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE180細(xì)胞、HEL92.1.7細(xì)胞、Tca8113細(xì)胞
253JBV細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT549細(xì)胞、Hs 578.T細(xì)胞、BJ [Human fibroblast]細(xì)胞
Hs 821.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RH-35細(xì)胞、SK Mel 24細(xì)胞、Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1細(xì)胞
SNU407細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-BL6細(xì)胞、SNU251細(xì)胞、OVCAR.4細(xì)胞
CTLL-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：M14細(xì)胞、CemT4細(xì)胞、KLM-1細(xì)胞
BOWES細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T 24細(xì)胞、MDA 435細(xì)胞、3T3-A31細(xì)胞
VM Cub 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：INS1E細(xì)胞、HLEpiC細(xì)胞、22Rv1細(xì)胞
CL1-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuH-1細(xì)胞、HEp-2細(xì)胞、SW 626細(xì)胞
U-343-MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OUMS-27細(xì)胞、CMT 93細(xì)胞、H1568細(xì)胞
MDCK supertube細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MF2059細(xì)胞、NCIH1693細(xì)胞、NBL-4細(xì)胞
SKMEL-31細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NOMO1細(xì)胞、EST81細(xì)胞、b.End3細(xì)胞
UPCI-SCC-90細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI AML4細(xì)胞、SU-DHL-10細(xì)胞、HCCC-9810細(xì)胞
H-2196細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTori 3細(xì)胞、PANC3.27細(xì)胞、C1R細(xì)胞
A-1847細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SL-29細(xì)胞、HuTu-80細(xì)胞、6-T CEM細(xì)胞
IMR32細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tu686細(xì)胞、TE8細(xì)胞、266 Bl細(xì)胞
Detroit-562細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T98細(xì)胞、H-35 Reuber細(xì)胞、QGP-1細(xì)胞
hCMEC/D3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SACC-83細(xì)胞、EBTr細(xì)胞、MN9D細(xì)胞
NALM6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ramos (RA)細(xì)胞、IPEC-J2細(xì)胞、CTV1細(xì)胞
PLC-PRF-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH345細(xì)胞、DU 4475細(xì)胞、207細(xì)胞
HLEC-SRA 01/04細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs675細(xì)胞、Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8細(xì)胞、Hs940.T細(xì)胞
SK_HEP1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WIL2 S細(xì)胞、Panc 03.27細(xì)胞、Hk-2細(xì)胞
RC-K8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293-FT細(xì)胞、Molm 14細(xì)胞、KLN205細(xì)胞
HSC-T6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs742T細(xì)胞、MM6細(xì)胞、HOC-1細(xì)胞
LC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PAa細(xì)胞、EA. hy 926細(xì)胞、AN3 CA細(xì)胞
MT-3 [Human leukocytes]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PAMC82細(xì)胞、Hs 729T細(xì)胞、RPMI 8226/S細(xì)胞
GM03671C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JTC-28細(xì)胞、MCF7ADR細(xì)胞、U-118 MG細(xì)胞
Ramos.2G6.4C10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hepa1-6細(xì)胞、NCI-H1915細(xì)胞、GC-1 spg細(xì)胞
SUNE-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：D10G41細(xì)胞、SCC 15細(xì)胞、Hs822T細(xì)胞
NCI-H2108細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 684細(xì)胞、D6P2T細(xì)胞、University of Arizona Cell Culture-893細(xì)胞
SUDHL-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LP-1細(xì)胞、SK-N-BE-2細(xì)胞、8226細(xì)胞
Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs600T細(xì)胞、NCI-SNU-182細(xì)胞、NRK clone 52E細(xì)胞
DB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RGB細(xì)胞、NBL-3細(xì)胞、HEL299細(xì)胞
SU86.86細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NT2D1細(xì)胞、BIC細(xì)胞、H-1435細(xì)胞
H-2342細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT116/L細(xì)胞、H-661細(xì)胞、SKES-1細(xì)胞
K1735細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C3H 10T1/2細(xì)胞、NCI H929細(xì)胞、NCI-H596細(xì)胞
BE(2)-M17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-774細(xì)胞、KP-N-RT-BM-1細(xì)胞、SK ES 01細(xì)胞
COLO-357細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AtT-20細(xì)胞、SNU638細(xì)胞、P3J HR1-K細(xì)胞
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