"NCI-H358細胞：人非小細胞肺癌細胞系
細胞背景資料：１９８１年從一位開始化療之前的患者的腫瘤組織中分離建株。超微結(jié)構(gòu)研究表明細胞質(zhì)中有Clara細胞的特征結(jié)構(gòu)細胞表達主要的肺表面結(jié)合蛋白SP-A的蛋白和RNA。不表達SP-B和SP-C。他們在軟瓊脂中的克隆形成效率為０.８３%。
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：消化３-５分鐘。１：２。３天內(nèi)可長滿。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
細胞生長特性：貼壁生長
【細胞培養(yǎng)中細菌、霉菌的污染情況總結(jié)】細菌：細菌在普通倒置顯微鏡下為黑色細沙狀，根據(jù)感染細菌的不同，可有不同的外形，培養(yǎng)液一般會渾濁變黃，對細胞生長影響明顯。仔細檢查一下器皿的滅菌情況，是否在高壓滅菌時放氣時間足夠，壓力足夠！尤其是和儲存培養(yǎng)液接觸的移液管等物品，連續(xù)兩次污染的話有可能造成儲存液污染，一定要注意！下次使用前檢查一下培養(yǎng)液是否存在渾濁的現(xiàn)象！可在培養(yǎng)液中加相應(yīng)的抗生素處理；霉菌：培養(yǎng)液是清亮的，倒置顯微鏡下無雜質(zhì)，３７度孵箱培養(yǎng)２-３天，仍清亮，但出現(xiàn)絮狀雜質(zhì)，鏡下可見呈細絲狀的團狀漂浮物，可看到明顯的菌絲，細胞仍可生長，但時間長之后，細胞的活力狀態(tài)變差，用酸銅溶液擦拭CO２孵箱內(nèi)，再把水盤里也加上飽和量的酸銅?；蛘咴谂囵B(yǎng)箱的托盤加入飽和的消毒二鈉高鹽液體,可以防止霉菌污染。CO２孵箱被霉菌污染后，可把所有細胞暫時轉(zhuǎn)移，采用擦洗孵箱(包括隔板，箱壁)。并把放置在孵箱內(nèi)一個小時，使其蒸汽彌漫。待的氣味消散后，再移入細胞。孵箱應(yīng)定期清潔(２月左右)，尤其在多雨的季節(jié)。其它培養(yǎng)箱清洗方法是：用８４液擦洗－清水擦洗－７５%酒精擦洗－紫外燈照。預(yù)防霉菌污染，可在培養(yǎng)基里加３u/ml的兩性霉素或制霉菌素或D或雙抗；但細胞一旦污染，很難挽救，制霉菌素或D或雙抗都于事無補，建議舍棄該污染細胞，將環(huán)境徹底消毒，如果所有細胞都污染，可能是系統(tǒng)污染，檢查一下培養(yǎng)基和器材，如果只是個別污染，可能是操作問題，就要注意操作。
傳代的操作步驟注意事項：1)操作前要洗手，進入超凈臺后手要用75%酒精或0.2%新潔爾滅擦試。試劑等瓶口也要擦試。2)點燃酒精燈，操作在火焰附近進行，耐熱物品要經(jīng)常在火焰上燒灼，金屬器械燒灼時間不能太長，以免退火，并冷卻后才能夾取組織，吸取過營養(yǎng)液的用具不能再燒灼，以免燒焦形成碳膜。3)操作動作要準(zhǔn)確敏捷，但又不能太快，以防空氣流動，增加污染機會。4)不能用手觸已消毒器皿的工作部分，工作臺面上用品要布局合理。5)瓶子開口后要盡量保持45℃斜位。6)吸溶液的吸管等不能混用。貼壁細胞傳代的操作步驟：1)吸除培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液。2)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶和EDTA混合液少許，以能覆滿瓶底為限。3)置溫箱中2-5分鐘，當(dāng)發(fā)現(xiàn)細胞質(zhì)回縮，細胞間隙增大后，立即終止消化。4)吸除消化液，向瓶內(nèi)注入Hanks液數(shù)毫升，輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶，把殘余消化液沖掉。注意加Hanks液沖洗細胞時，動作要輕，以免把已松動的細胞沖掉流失，如用胰蛋白酶液單獨消化，吸除胰蛋白酶液后，可不用Hanks液沖洗，直接加入培養(yǎng)液。5)用吸管吸取營養(yǎng)液輕輕反復(fù)吹打瓶壁細胞，使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。6)計數(shù)板計數(shù)后，把細胞懸液分成等份分裝入數(shù)個培養(yǎng)瓶中，置溫箱中培養(yǎng)。懸浮細胞傳代的操作步驟：1)吸出細胞培養(yǎng)液，放入離心管中，離心1000rpm5分鐘。2)吸掉上清液，加入適量之新鮮培養(yǎng)基，混和均勻后，依稀釋比例轉(zhuǎn)移至新的培養(yǎng)瓶中，以正常培養(yǎng)條件培養(yǎng)。
很多朋友討論細胞培養(yǎng)問題，見到很多很好的經(jīng)驗總結(jié)，這里說一些我個人的經(jīng)驗，因為一些比較特殊的原因，我自己培養(yǎng)接觸過近３００種細胞，常用于做實驗的，累積有百余種，可以說遇到過許多各式各樣古怪的細胞。這里挑細胞消化開始做我的篇專題，并不是因為細胞消化最重要，而是近期看到大家頻繁討論這個話題，我就拋磚引玉，下面幾點拙見，可能與其它朋友總結(jié)的一些經(jīng)驗有點出入，僅供大家參考。許多同學(xué)對細胞消化做了許多研究，得出了很多有價值的經(jīng)驗，也見到很多人的困惑。其實細胞培養(yǎng)，尤其是細胞系的培養(yǎng)，就消化而言，不是太難，做得多了，善于總結(jié)經(jīng)驗，就能把細胞越養(yǎng)越好。一般的程序步驟，細節(jié)操作，我這里就不講了，只講一些基本操作背后的知識，如果不對之處，歡迎指正，總結(jié)下來，細胞培養(yǎng)中消化很重要，但其實消化并不是細胞培養(yǎng)的關(guān)鍵所在(雖然很重要)，關(guān)鍵所在是細胞來源，血清質(zhì)量和水源(自己配制溶液的話)。我看到版上許多人養(yǎng)細胞遇到各種各樣的問題，很多時候bottleneck沒有找到，雖然通過其它方法有所改善，但仍然是事倍功半。因為人們往往注意自己的操作，總覺得自己沒有經(jīng)驗，而忽視試劑，溶液尤其是細胞的質(zhì)量，后者其實才是許多細胞培養(yǎng)實驗室常見的問題。
PANC1005細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2198細胞、N-87細胞、MOLM-16細胞
CoCL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]細胞、143BTK-細胞、J774A.1細胞
Opossum Kidney細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK RC 52細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1細胞、NHA細胞
HEL-92細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 737.T細胞、NCIH1184細胞、PT-K75細胞
A 72細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AC29細胞、SW-579細胞、UPCISCC154細胞
MG-63細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TEV-1細胞、NRK-52E細胞、FK81細胞
Tb1.Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CPA47細胞、H-1869細胞、L363細胞
GP293細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KU 812細胞、CL-11細胞、BMSC/hBMSCs細胞
HCM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-AD293細胞、AG 9細胞、WIL2-S細胞
KP-N-RT-BM-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCIAML3細胞、KAT5細胞、578T細胞
NIH-OVCAR-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：251 MG細胞、Mono-Mac-6細胞、High-5細胞
U-87MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：D341Med細胞、B16/BL6細胞、TT細胞
Hs 27細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-13細胞、A101D細胞、HEP-3B2細胞
WBF344細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1428細胞、TF-1細胞、WRL 68細胞
Madin Darby Bovine Kidney細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LU65細胞、JB6 [Mouse]細胞、H1623細胞
Human Epidermoid carcinoma #2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1569細胞、NBL-4細胞、NS20Y細胞
Human Epidermoid carcinoma #2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1569細胞、NBL-4細胞、NS20Y細胞
McG-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Y3.AG.1.2.3細胞、HPDEC細胞、ECV-304細胞
RH-35細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2452細胞、Psi2-DAP細胞、H498細胞
Mv.1.Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：YAC細胞、BC-027細胞、LICCF細胞
SO-Rb 50細胞系相關(guān)產(chǎn)品：293/EBNA細胞、H-1385細胞、RASMC細胞
SCL-II細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C41細胞、LL/2(LLc1)細胞、CCFSTTG1細胞
OSK-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：REC-1細胞、Pro-5 Lec1.3c細胞、A-549細胞
A375-SM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RT4-D6-P2T細胞、HepG2細胞、NCI-H165細胞
SkChA1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：REC1細胞、H-146細胞、LU165細胞
MBT-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEY-A8細胞、HT-1376細胞、EC109細胞
293 c18細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-668細胞、HPAF-I細胞、A431/P細胞
HFL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC3T3細胞、COLO-684細胞、SKO-007細胞
LIPF178C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NEC8細胞、GM04154細胞、C41細胞
H-2085細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC-PAP細胞、GTL16細胞、NCTC 3960細胞
MGH-UI細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ASH3細胞、Bovine Turbinate細胞、SK-MEL3細胞
MCF12A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EST50細胞、NCI-SNU-C2B細胞、GC-2細胞
LC-2/ad細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-85 clone 5細胞、SDBMSC細胞、AG 9細胞
SF-763細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF SB細胞、RH8994細胞、L細胞：細胞
Hep G2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKLU1細胞、NCI-H187細胞、C8166-CD4細胞
HCT 15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COV 434細胞、NCIH2170細胞、MSTO211H細胞
CP70細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUTU80細胞、HEL-92-1-7細胞、NCI-N87細胞
CP70細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUTU80細胞、HEL-92-1-7細胞、NCI-N87細胞
H6c7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Y-1細胞、253JB-V細胞、LL/2細胞
L-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L02細胞、ATN-1細胞、HOS-143B細胞
FHCRC-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Metastatic Variant-522細胞、SupT1細胞、NCI-H2227細胞
HBSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 832(C).T細胞、SW1222細胞、CWR22R細胞
Huh-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCM細胞、EAhy926細胞、MDAMB435S細胞
Intestinal Epithelioid細胞： No. 18細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hx-147細胞、H510A細胞、NIH:OVCAR3細胞
L615細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM02132C細胞、KOSC-2細胞、Earles's cells細胞
293 EBNA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Calu 3細胞、SUM159細胞、B 95-8細胞
EFM-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKMES細胞、RD-ES細胞、HT-115細胞
74Int細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RT-BM細胞、H-1581細胞、H6c7細胞
TM-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS174細胞、3T3-A31細胞、746T細胞
KYSE-70細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK/293細胞、NCI-H82細胞、Nthy-ori 3.1細胞
NCI-128細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SL1細胞、SW 48細胞、NCIH1651細胞
CAKI 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI-6666細胞、BNL 1MEA.7R.1細胞、CHL/IU細胞
KRC Y細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L540細胞、B-95-8細胞、McG-1細胞
H-1688細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA330細胞、LLC-PK-1細胞、Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1細胞
Mink Lung細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1915細胞、HCC-44細胞、LNCaP clone FGC細胞
NCI-SNU-119細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NRK clone 49F細胞、MDAMB134細胞、H-2172細胞
CNE-2Z細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Centre Antoine Lacassagne-27細胞、WM35細胞、Line 870 Emory University-4細胞
Ra #1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-10細胞、MDAMB157細胞、H-1781細胞
NCIH838細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MAVER1細胞、KMM-1細胞、NE-4C細胞
DHL10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1793細胞、TB-1 Lu細胞、32D CL3細胞
Mo7e細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2196細胞、CAKI 2細胞、NCI-H510細胞
CTV-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3/NS1/Ag4-1細胞、T-98G細胞、FLS細胞
1301細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L細胞：細胞、CoCL2細胞、PSN-1細胞
HSCT6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LSECs細胞、BI-Mel細胞、SVGp12細胞
HEK-293 c18細胞系相關(guān)產(chǎn)品：brain-derived Endothelial cells.3細胞、Caki2細胞、GES-1細胞
HLEpiC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tca8113細胞、AAV293細胞、DHL5細胞
MCF-7/ADR-RES細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PT67細胞、B16-F0細胞、MDAMB-231細胞
Porcine Kidney-15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLA801C細胞、LS-1034細胞、8305C_1細胞
BNL 1ME A.7R.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC2218細胞、SW 1573細胞、COLO 684細胞
K7M2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03569D細胞、Pro-Lec1.3C細胞、NCI-H1092細胞
SUM-159-PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sp2/0-Ag-14細胞、P36細胞、OVCAR-8細胞
PC-3M-IE8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-231-GFP細胞、Balb/c3T3細胞、H1930細胞
Opossum Kidney細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK RC 52細胞、SGC 7901細胞、Panc8.13細胞
HOS TE85細胞系相關(guān)產(chǎn)品：tdott細胞、DH82細胞、TMK-1細胞
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