"RBE細(xì)胞：人膽管癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：人肝膽管癌細(xì)胞。據(jù)說產(chǎn)CEA和CA１９-９。
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長：貼壁
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：消化３-５分鐘。１：２。３天內(nèi)可長滿。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
細(xì)胞生長特性：貼壁生長
【細(xì)胞培養(yǎng)中原蟲的污染情況總結(jié)】原蟲：培養(yǎng)液可輕微渾濁，顯微鏡下那些細(xì)小的點狀物數(shù)量非常多，輕微活動，細(xì)胞雖然可以生長但繁殖速度卻明顯減慢，而且細(xì)胞狀態(tài)不好，邊緣不清楚，細(xì)胞不透亮。他們與細(xì)胞可共生但會與細(xì)胞爭奪營養(yǎng)。這種共生是非常普遍的，但他們的數(shù)量小，細(xì)胞站優(yōu)勢所以不會影響到細(xì)胞的正常生長，只有當(dāng)他們到達(dá)一定的數(shù)量時就會影響到細(xì)胞的生長，最終形成惡性循環(huán)。污染的可能原因：可能原因很多比如配液消毒問題、操作問題、環(huán)境問題等等關(guān)于培養(yǎng)基的無菌狀況，取培養(yǎng)基至培養(yǎng)瓶中(不加細(xì)胞)，３７度試培養(yǎng)一段時間后觀察。如果沒有細(xì)菌生長就是操作的問題。也可以在培養(yǎng)基中事先加入雙抗(酸鏈霉素和芐青霉素)。但雙抗有時會影響細(xì)胞的狀態(tài)，所以在做轉(zhuǎn)染、檢測細(xì)胞某項指標(biāo)前一定要撤去雙抗，以避免影響實驗結(jié)果。１)孵箱應(yīng)定期用三氧機(jī)消毒或者紫外光照射，并用酒精和新潔爾滅試擦孵箱同時孵箱內(nèi)的水應(yīng)是三蒸水；２)超凈臺\取材\器材\培養(yǎng)液\培養(yǎng)瓶\操作等因素；３)超凈臺的風(fēng)機(jī)不能過大，風(fēng)機(jī)到６-８格。否則也可能能致霉菌污染；４)無菌室經(jīng)甲醛熏蒸消毒后，可用同等量的噴灑中和，約幾小時即可進(jìn)入操作。
在細(xì)胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細(xì)胞生長角度來說，針對細(xì)胞培養(yǎng)過程中生長不好、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細(xì)胞生長不好》可能原因：細(xì)胞本身的狀態(tài)》1)細(xì)胞傳代次數(shù)多，細(xì)胞老化；2)細(xì)胞的接種量：接種量過低，細(xì)胞生長緩慢；3)細(xì)胞傳代時間過晚：細(xì)胞中毒，影響傳代后的細(xì)胞生長；4)胰酶消化時間過長或過短：時間過長，細(xì)胞死亡；時間過短，細(xì)胞未完全分離而成團(tuán)，細(xì)胞死亡；5)細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進(jìn)行驗證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準(zhǔn)確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應(yīng)是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個方面的可能原因，做出針對性的解決方案》1)注意細(xì)胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，經(jīng)過驗證；4)注意實驗室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細(xì)胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動太大；3)細(xì)胞凍存或復(fù)蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細(xì)胞種；4)檢測培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。
常規(guī)的細(xì)胞實驗(增殖，凋亡，遷移，分化之類的)，受消化影響不是很大，如果不用胰酶去孵育而使用潤洗的方法消化的話(難消化細(xì)胞例外)。但少數(shù)實驗，比如病毒包裝，對細(xì)胞代數(shù)，對細(xì)胞狀態(tài)要求極高。這個時候，胰酶消化，就是潤洗，都會對細(xì)胞包裝病毒的能力有影響，傳代次數(shù)一多，細(xì)胞包裝能力就會逐漸下降(當(dāng)然也有其它因素影響包裝效率)。這個時候都不用胰酶消化，用一些鹽溶液(不是EDTA液)即可。這些鹽溶液通過影響ECM相關(guān)酶的活性，來使得細(xì)胞脫離基質(zhì)附著表面，但不切割任何蛋白；EDTA的作用。許多人不用胰酶，只用EDTA，或者用trypsin/EDTA聯(lián)合作用。這里要明白，trypsin切割ECM的一些負(fù)責(zé)粘連和附著的蛋白，而EDTA通過螯合Ca離子，作用于Integrin的活性，所以EDTA的作用更加溫和。有的人在trypsin里添加一些EDTA，或者對付特別難消化的細(xì)胞，添加多一些EDTA，就是這個道理。一般不要試圖延長消化時間(如果１０min還消化不徹底的話)，而應(yīng)該想其它辦法；PBS洗滌。消化之前用PBS洗滌，是常見的操作，因為Serum含有抑制trypsin的蛋白。但這里面也有學(xué)問可以講，對于一些難消化細(xì)胞，那么可以配制不含Ca，Mg離子的PBS，因為這些離子也會抑制trypsin的活性。但對于絕大部分胰酶或者EDTA溶液潤洗即可消化的細(xì)胞，不需要配制如此溶液。
A2780/CP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HGC-27細(xì)胞、Hs-746T細(xì)胞、SNU-601細(xì)胞
HSC3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc3_27細(xì)胞、NCI-H498細(xì)胞、HuTu-80細(xì)胞
RCSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR.8細(xì)胞、H-2073細(xì)胞、LAN-5細(xì)胞
SUP T1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT-325細(xì)胞、MT-2細(xì)胞、SKNF1細(xì)胞
H1963細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK Col 1細(xì)胞、GA-10 clone 4細(xì)胞、MCF-7/ADR細(xì)胞
NCI-H2029細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ku812細(xì)胞、P30 OHK細(xì)胞、SK-NEP-1細(xì)胞
SEG-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1522細(xì)胞、CNLMG-B5537SKIN細(xì)胞、AR4-2J細(xì)胞
GTL 16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FO [Mouse myeloma]細(xì)胞、UPCISCC154細(xì)胞、MDAMB436細(xì)胞
NCI-H2444細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MPC-5細(xì)胞、NCI-H2009細(xì)胞、KPL4細(xì)胞
HN-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ANA-1細(xì)胞、MDA-MB 453細(xì)胞、OSA細(xì)胞
3T3-Swiss細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK Mel 24細(xì)胞、LIPF155C細(xì)胞、DMS-79細(xì)胞
SKNO1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-175VII細(xì)胞、HCC-1937細(xì)胞、CT26細(xì)胞
EC-9706細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LTEP-s細(xì)胞、BaF3細(xì)胞、G292細(xì)胞
NUGC3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VMRC-RCZ細(xì)胞、SU-DHL6細(xì)胞、16-HBEo細(xì)胞
P31FUJ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DHL-16細(xì)胞、ME1細(xì)胞、FU-OV-1細(xì)胞
CWR22R-V1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HLE-SRA-01/04細(xì)胞、NG-108-15細(xì)胞、CAL12T細(xì)胞
Tu-212細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-475細(xì)胞、NCI-H526細(xì)胞、V79-4細(xì)胞
Clone 166細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD-33Co細(xì)胞、COLO 320F細(xì)胞、SV40 MES 13細(xì)胞
NTC200細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUPB15細(xì)胞、SK-ES細(xì)胞、P815細(xì)胞
Colo741細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE-410細(xì)胞、EnCa1細(xì)胞、TE671細(xì)胞
NCIH128細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC3T3, E1 subgroup-4 clone細(xì)胞、EBTr (NBL-4)細(xì)胞、G361mel細(xì)胞
LCLC103H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHO-S細(xì)胞、OAC-P4C細(xì)胞、MDA-MB-134細(xì)胞
SKNBE-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKOV-433細(xì)胞、BC3H-1細(xì)胞、JS1細(xì)胞
Panc-8_13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUV-EC-C細(xì)胞、KMST6細(xì)胞、NCIH838細(xì)胞
J82COT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK MES 1細(xì)胞、P3-X63-Ag 8.653細(xì)胞、SJCRH30細(xì)胞
R 1610細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：E0771細(xì)胞、PA1細(xì)胞、MLE12細(xì)胞
LTEP-sm 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mono-Mac-6細(xì)胞、UPCI-SCC-090細(xì)胞、SNU-475細(xì)胞
CAL51細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB231細(xì)胞、HEK/293細(xì)胞、HSC細(xì)胞
HEK-293F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat E6細(xì)胞、FTC-133細(xì)胞、COLO 320DM細(xì)胞
H-1522細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KNS-42細(xì)胞、CAL-78細(xì)胞、Hs 766.T細(xì)胞
HEK 293 c18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBEpiC細(xì)胞、OVCAR 420細(xì)胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2細(xì)胞
MEC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：J 111細(xì)胞、Rat Chondrosarcoma Swarm細(xì)胞、SK Col 1細(xì)胞
SGC 7901細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-2932細(xì)胞、UK Pan-1細(xì)胞、P30/0HK細(xì)胞
SK-N-BE(2)C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB157細(xì)胞、NCI-H64細(xì)胞、J-111細(xì)胞
L(TK-)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC57G細(xì)胞、SUNE-1細(xì)胞、RKO-AS-45-1細(xì)胞
KU.812細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：J-774A.1細(xì)胞、Hi-five細(xì)胞、HEK-293-H細(xì)胞
D10G41細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM-102細(xì)胞、AR4IP細(xì)胞、bEnd3細(xì)胞
A-2780細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H9c2細(xì)胞、SCL-2細(xì)胞、BALL1細(xì)胞
ELD-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNEP-1細(xì)胞、22Rv-1細(xì)胞、BT-483細(xì)胞
NCIH1770細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：J45.01細(xì)胞、293 F細(xì)胞、Kasumi 1細(xì)胞
BL1339細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L363細(xì)胞、OVISE細(xì)胞、H-358細(xì)胞
TC-1[JHU-1]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI/AML5細(xì)胞、BEL/FU細(xì)胞、MLA 144細(xì)胞
C6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1975細(xì)胞、GNM細(xì)胞、MUTZ-3細(xì)胞
SUM 190PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS174T細(xì)胞、HeLaS3細(xì)胞、NE-1細(xì)胞
H-1975細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL-28細(xì)胞、U-343-MG細(xì)胞、PT67細(xì)胞
NCI-H2081細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H102細(xì)胞、Mouse podocyte細(xì)胞、Evsa-T細(xì)胞
Jiyoye (P-2003)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1299細(xì)胞、COS1細(xì)胞、HMCB細(xì)胞
3T3F442A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Microbiological Associates-104細(xì)胞、JB-6 Cl 30細(xì)胞、NWA細(xì)胞
Pa16C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：F9細(xì)胞、Panc02-H0細(xì)胞、HO-8910 PM細(xì)胞
NFHIOSE-80細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Renal Proximal Tubule Epithelial Cells/TERT-immortalized 1細(xì)胞、RBL2H3細(xì)胞、COLO394細(xì)胞
H-226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RSC96細(xì)胞、CAL 62細(xì)胞、NCI-H28細(xì)胞
HT-22細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC 70細(xì)胞、Lewis lung carcinoma line 1細(xì)胞、Walker 256細(xì)胞
MGH-U1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-AML2細(xì)胞、IM-9細(xì)胞、GM02219C細(xì)胞
SKRC-20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2342細(xì)胞、JOSK-M細(xì)胞、SUM 52細(xì)胞
MRC9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HLEB-3細(xì)胞、NCI-H226細(xì)胞、NCIH510細(xì)胞
Ca9-22細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C643細(xì)胞、MV-4-11細(xì)胞、NCIH128細(xì)胞
KPL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS-940-T細(xì)胞、C2BBe1細(xì)胞、MV 3細(xì)胞
MCF.7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNEP1細(xì)胞、HCEC細(xì)胞、AGS細(xì)胞
SK-HEP-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKM-1細(xì)胞、MC3T3-E1細(xì)胞、rRMECs細(xì)胞
SCL-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BNCL-2細(xì)胞、LNCaP subline C4-2細(xì)胞、PIG3細(xì)胞
HET1A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COR-L279細(xì)胞、Mv 1 Lu細(xì)胞、HAVSMC細(xì)胞
CMT64細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LN382細(xì)胞、Ramos(RA1)細(xì)胞、LMH細(xì)胞
OVCAR420細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SiHa細(xì)胞、MDA MB 134VI細(xì)胞、SF767細(xì)胞
Hs-600-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1781細(xì)胞、TMK1細(xì)胞、FM88細(xì)胞
GTL 16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FO [Mouse myeloma]細(xì)胞、UPCISCC154細(xì)胞、MDAMB436細(xì)胞
hTERT-HME1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-673細(xì)胞、COLO 320 HSR細(xì)胞、NL-20細(xì)胞
MV 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB361細(xì)胞、UCLA SO M21細(xì)胞、Stanford University Pediatric T-cell line 1細(xì)胞
Hs-852-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-343MG細(xì)胞、H-295R細(xì)胞、ACC2細(xì)胞
NCI-H2085細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-6細(xì)胞、H-7721細(xì)胞、HT55細(xì)胞
UCLA NPA-87-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-16細(xì)胞、MHCC97-L細(xì)胞、HCC78細(xì)胞
Mouse Colon 38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KTC1細(xì)胞、NCI-H1573細(xì)胞、BV2細(xì)胞
MAVER細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuH 6細(xì)胞、C-33A細(xì)胞、OB2細(xì)胞
RCSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR.8細(xì)胞、EoL-1細(xì)胞、KYSE450細(xì)胞
Hs746T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1092細(xì)胞、SMC-1細(xì)胞、HO1-N-1細(xì)胞
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