"NKL 人NK細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：NK細(xì)胞淋巴瘤/白血病；男性 
細(xì)胞形態(tài)：淋巴母細(xì)胞樣 
培養(yǎng)細(xì)胞的凍存及復(fù)蘇：細(xì)胞低溫凍存是培養(yǎng)室常規(guī)工作和通用技術(shù)。細(xì)胞凍存在-１９６℃液氮中，儲(chǔ)存時(shí)間幾乎是無限的。細(xì)胞凍存及復(fù)蘇的原則是慢凍快融?！緝龃婕?xì)胞】１)選對(duì)數(shù)增生期細(xì)胞(證明無支原體污染)，在凍存前１d換液；２)按常規(guī)方法把培養(yǎng)細(xì)胞制備成懸液，計(jì)數(shù)，使細(xì)胞密度達(dá)５×１０／ml左右密度，離心，去上清；３)加入配制好的凍存液(培養(yǎng)液６.８ml，小牛血清２ml，DMSO １ml，５.６%NaHCO３ ０.１ml)，按與去上清相同的量一滴一滴加入離心管中，然后用吸管輕輕吹打令細(xì)胞重懸。凍存細(xì)胞時(shí)培養(yǎng)液中加入保護(hù)劑１０％二甲基亞砜(DMSO)或甘油，可使冰點(diǎn)降低，使細(xì)胞內(nèi)水分在凍結(jié)前透出細(xì)胞外；４)分裝于無菌凍存管中，每管加１.５m懸液；５)旋好凍存管并仔細(xì)檢查，一定要蓋緊，做好標(biāo)記；６)凍存：在特殊的儀器或簡(jiǎn)易的液氮容器中，按-１℃／min的速度，在３０～４０min時(shí)間內(nèi)，下降到液氮表面，再停３０min后，直接投入液氮中。要適當(dāng)掌握下降冷凍速度，過快能影響細(xì)胞內(nèi)水分透出，太慢則促進(jìn)冰晶形成。操作時(shí)應(yīng)戴防護(hù)眼鏡和手套，以免液氮凍傷?！緩?fù)蘇細(xì)胞】１)從罐中取出凍存管；２)迅速放入３６℃～３７℃水浴，不時(shí)搖動(dòng)，使其急速融化，３０～６０s內(nèi)完成；３)凍存管用７０％酒精擦拭消毒后，打開蓋子，用吸管將細(xì)胞懸液注入離心管中，再滴加１０ml培養(yǎng)液；４)低速離心(５００～１０００r／min) ５min，去上清后再用培養(yǎng)液洗一次；５)用培養(yǎng)液適當(dāng)稀釋后，裝入培養(yǎng)瓶３７℃培養(yǎng)，次日更換一次培養(yǎng)液后，繼續(xù)培養(yǎng)。以后仍按常規(guī)進(jìn)行培養(yǎng)。凍存細(xì)胞數(shù)量要充分，密度應(yīng)達(dá)到１０／ml，在融后稀釋２０倍時(shí)，仍能保持５×１０／ml數(shù)量。 
細(xì)胞生長(zhǎng)：懸浮 
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源 
NKL 人NK細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支) 
有一些細(xì)胞是數(shù)量多一點(diǎn)比較好生長(zhǎng)，生長(zhǎng)狀態(tài)也比較好。這種一般是屬于生長(zhǎng)速度慢的細(xì)胞。譬如內(nèi)皮細(xì)胞。而有一些是細(xì)胞是數(shù)量少一點(diǎn)細(xì)胞狀態(tài)會(huì)生長(zhǎng)的比較好，譬如巨噬細(xì)胞和某些腫瘤細(xì)胞。尤其是巨噬細(xì)胞，生長(zhǎng)速度非常得快，貼壁速度很快，所以傳代時(shí)就應(yīng)該留很少量的細(xì)胞，這樣細(xì)胞狀態(tài)會(huì)比較好。并且巨噬細(xì)胞比較喜歡扎堆生長(zhǎng)，而堆與堆之間是有空間的。如果長(zhǎng)成相連在一起的一滿片的時(shí)候，細(xì)胞形態(tài)基本上就會(huì)差了，老化的會(huì)比較多，對(duì)后期實(shí)驗(yàn)結(jié)果是不好的。所以在養(yǎng)細(xì)胞的時(shí)候應(yīng)該摸索該細(xì)胞喜歡的生長(zhǎng)空間密度問題。這個(gè)其實(shí)是有一個(gè)方法可以改善的。對(duì)于貼壁細(xì)胞，如果細(xì)胞形態(tài)不好，（或者細(xì)胞形態(tài)不清晰，表面似有異物等）可以在傳代的時(shí)候進(jìn)行如下操作：首先，倒掉舊的培養(yǎng)基，加入3ml新的培養(yǎng)基（有無血清的都可）洗滌一次，用滴管吸走，然后再加入3ml的培養(yǎng)基，進(jìn)行預(yù)吹打，控制吹打力度，輕輕地大概沿著瓶底過一遍，然后吸走。這時(shí)侯再開始正式的消化、吹打。（巨噬細(xì)胞建議只吹打，不消化）其次，把吹打下來的細(xì)胞懸液加入到新的培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，培養(yǎng)瓶事先加入培養(yǎng)基，放入培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)，按時(shí)間點(diǎn)觀察細(xì)胞貼壁情況。10分鐘觀察一次，20分鐘，30分鐘觀察一次。選擇一個(gè)時(shí)間點(diǎn)，已經(jīng)有部分細(xì)胞貼壁的情況下，重新置于潔凈臺(tái)，底面朝上迅速倒出其中的培養(yǎng)基，加入3ml新培養(yǎng)基再輕輕洗一次。然后加入完全培養(yǎng)基培養(yǎng)。后續(xù)觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況以及形態(tài)。通常稱之為“二傳”。如果一次效果還不理想，可重復(fù)多次。直到找到細(xì)胞上乘形態(tài)。其中要注意，結(jié)合細(xì)胞喜歡的生長(zhǎng)情況。喜歡多一點(diǎn)數(shù)量長(zhǎng)得好的細(xì)胞你就等貼壁細(xì)胞比較多點(diǎn)的時(shí)候再傳。反之亦然。 
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。 
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系 
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：懸浮 
NKL 人NK細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞系
因?yàn)榧?xì)胞生長(zhǎng)的時(shí)候肯定是要相互聯(lián)系，大部分的細(xì)胞都是要成片生長(zhǎng)的，尤其是對(duì)于貼壁細(xì)胞，單個(gè)細(xì)胞貼壁之后長(zhǎng)著長(zhǎng)著就長(zhǎng)到一片去了。但是如果是成片的細(xì)胞抱團(tuán)的話，傳代后細(xì)胞是不能貼壁的，這樣抱團(tuán)的細(xì)胞就會(huì)死亡。所以，消化傳代的時(shí)候一定要將細(xì)胞消化成單個(gè)單個(gè)的獨(dú)立狀態(tài)，這個(gè)啊是非?？季磕愕墓Ψ虻?！細(xì)胞一旦脫落入懸液里你很難再將他吹打成單個(gè)，因?yàn)樗麤]有受力點(diǎn)了。很難找到受力點(diǎn)讓你對(duì)他吹打的力分散開細(xì)胞。所以必須要在細(xì)胞未脫落之前將其吹打開，受力點(diǎn)就是細(xì)胞貼壁的地方。這樣你就必須要嚴(yán)格控制好消化的程度啊，這和大師做飯掌握好火候是一樣的道理啊。既要消化到容易吹打下來，又不能太過，一吹就整片脫落，要單個(gè)單個(gè)地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是為了保證不同生長(zhǎng)狀態(tài)貼壁程度的細(xì)胞能夠都維持在好的受力點(diǎn)分散開。這個(gè)是很重要的一點(diǎn)。尤其是對(duì)于某些細(xì)胞這一點(diǎn)就是他活去死的致命點(diǎn)。像Caco-２細(xì)胞就是如此。另外關(guān)于傳代很重要一點(diǎn)就是一定不能等到細(xì)胞長(zhǎng)滿的時(shí)候才去消化傳代。要在細(xì)胞長(zhǎng)到７０%左右的時(shí)候就要傳代了，一旦發(fā)現(xiàn)細(xì)胞生長(zhǎng)中已經(jīng)有疊層生長(zhǎng)的時(shí)候就要立即進(jìn)行消化傳代。不能再拖了。關(guān)于換液傳代時(shí)候洗瓶的問題。對(duì)于用DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)的細(xì)胞，你在洗的時(shí)候如果是用無血清１６４０去洗細(xì)胞在隨即后的幾次中會(huì)比用DMEM洗的長(zhǎng)的要好。同樣，用１６４０培養(yǎng)的也有這個(gè)現(xiàn)象。如果不嫌麻煩的話，可以用PBS來洗，洗的效果和用無血清培養(yǎng)基洗的效果基本上是一樣的，對(duì)于有些細(xì)胞會(huì)更勝一籌。洗的目的主要是洗去培養(yǎng)瓶里殘留的血清，防止它對(duì)胰酶的影響。這樣能夠保證胰酶的消化能力優(yōu)先，是很關(guān)鍵的一點(diǎn)。先補(bǔ)充這么多，還會(huì)后續(xù)更新。再補(bǔ)充一點(diǎn)：傳代時(shí)PBS洗是很重要的一步，最近發(fā)現(xiàn)，用PBS就可以把細(xì)胞消化開來。加入PBS放置１０-１５分鐘，有些需要更長(zhǎng)的時(shí)間，等到細(xì)胞一個(gè)個(gè)分離開來的時(shí)候，就可以直接吹打下來，但是和胰酶消化一樣，要控制好時(shí)間，不能時(shí)間太過了，要不然損傷細(xì)胞，細(xì)胞不容易成活，狀態(tài)容易不好。這個(gè)方法對(duì)于某些細(xì)胞是很管用的。有些細(xì)胞用胰酶消化不容易消化成單個(gè)的時(shí)候，或者臨時(shí)沒有胰酶了，可以選用此方法。不過一定要試試，看是否適合你的細(xì)胞。 
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書 
Mono-Mac-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ssMCF7細(xì)胞、ATC241細(xì)胞、Normal Rat Kidney細(xì)胞 
C-4I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BMF細(xì)胞、YH-13細(xì)胞、Pa18C細(xì)胞 
DMS114細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LL/2細(xì)胞、Nb 2細(xì)胞、HCC-9204細(xì)胞 
H-841細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM 102PT細(xì)胞、MES-SA細(xì)胞、CEM/0細(xì)胞 
KYSE510細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Eph4 1424細(xì)胞、AE1201細(xì)胞、Ramos 2G6.4C10細(xì)胞 
HEp-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat-E6細(xì)胞、HCC38細(xì)胞、beta TC6細(xì)胞 
SF-295細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSMC細(xì)胞、SUM-149PT細(xì)胞、Ly8細(xì)胞 
R D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL 120細(xì)胞、MDA-MB-175VII細(xì)胞、SUM 149細(xì)胞 
SW 962細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly07細(xì)胞、MMAc.SF細(xì)胞、SNU-119細(xì)胞 
SCC090細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A673細(xì)胞、MOLM13細(xì)胞、Lewis Lung細(xì)胞 
MFE296細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU-DHL1細(xì)胞、CCD-841CoTr細(xì)胞、HBL1細(xì)胞 
SUM149PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1954細(xì)胞、hTERT RPE1細(xì)胞、HEK293-F細(xì)胞 
CTLA4 Ig-24細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LC-1-sq細(xì)胞、LC-2/ad細(xì)胞、253JB-V細(xì)胞 
RS4-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1688細(xì)胞、H-292細(xì)胞、C-643細(xì)胞 
H-1417細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CFPAC1細(xì)胞、NCIH1581細(xì)胞、KOSC-2 cl3-43細(xì)胞 
Hela-Ap-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LC-2/ad細(xì)胞、HSKMC細(xì)胞、MKN1細(xì)胞 
Hela-Ap-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LC-2/ad細(xì)胞、HSKMC細(xì)胞、MKN1細(xì)胞 
A3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF-763細(xì)胞、X63-Ag8-653細(xì)胞、NPA87細(xì)胞 
P3-X63Ag8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PL-11細(xì)胞、RMS1598細(xì)胞、MUTZ-1細(xì)胞 
NS20Y細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MA-782細(xì)胞、bEnd.3[BEND3]細(xì)胞、Mc Coy細(xì)胞 
NKL 人NK細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞系
AA-Mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW1463細(xì)胞、L 929細(xì)胞、HT-1080細(xì)胞 
IMR32細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tu686細(xì)胞、TE8細(xì)胞、266 Bl細(xì)胞 
MA104細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ONS-76細(xì)胞、MOLM16細(xì)胞、HSC1細(xì)胞 
H446細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUIT 2細(xì)胞、OV-CA 432細(xì)胞、SF 767細(xì)胞 
RT 112細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLC/PRF5細(xì)胞、H-2291細(xì)胞、KYSE0520細(xì)胞 
OCI-Ly 19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-HEP-1細(xì)胞、UCLA RO-81-A-1細(xì)胞、J 82細(xì)胞 
NPC-TW 01細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-OV-3細(xì)胞、V79-4細(xì)胞、BLO11細(xì)胞 
SUM190細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 780細(xì)胞、JURKAT E-61細(xì)胞、SCC15細(xì)胞 
TGBC11T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Co 205細(xì)胞、CLONE M3細(xì)胞、CMT167細(xì)胞 
MOLP2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA231細(xì)胞、Panc2.03細(xì)胞、PTK1細(xì)胞 
HLFa細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1563細(xì)胞、SNU-398細(xì)胞、H2196細(xì)胞 
HMy2.CIR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3X63 Ag8.653細(xì)胞、OCI/AML3細(xì)胞、MC-38細(xì)胞 
HLF-a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TW01細(xì)胞、MDAMB330細(xì)胞、COLO.205細(xì)胞 
HEK-293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ramos 2G6.4C10細(xì)胞、OCI-Ly19細(xì)胞、NPA'87細(xì)胞 
TE-85 clone 5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE6細(xì)胞、MRC-5細(xì)胞、FT-293細(xì)胞 
huH 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lewis lung carcinoma細(xì)胞、D283 Med細(xì)胞、343MG細(xì)胞 
MDAMB330細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sarcoma OSteogenic-2細(xì)胞、OsA-CL細(xì)胞、MADISON LUNG TA-109細(xì)胞 
Line 207細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1806細(xì)胞、BC-022細(xì)胞、U251-MG細(xì)胞 
Evsa T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF-539細(xì)胞、U138細(xì)胞、IOSE 80細(xì)胞 
WM 239細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PAEC細(xì)胞、DLD-1細(xì)胞、HCT8細(xì)胞 
TGHAVSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC70細(xì)胞、Hs839.T細(xì)胞、Raji細(xì)胞 
SCC090細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A673細(xì)胞、MOLM13細(xì)胞、Lewis Lung細(xì)胞 
RLE-6TN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C3H10T1/2CL8細(xì)胞、U-251MG細(xì)胞、RWPE-1細(xì)胞 
Hs274T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1437細(xì)胞、CAOV3細(xì)胞、PC-9/S1細(xì)胞 
TCCPAN2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HLEC細(xì)胞、QGP-1細(xì)胞、OP9細(xì)胞 
HuH-28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCCAR細(xì)胞、Hs934T細(xì)胞、Jurkat, Clone E6-1細(xì)胞 
WPMY-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：8226細(xì)胞、K7M2-WT細(xì)胞、VM Cub 1細(xì)胞 
GM00637細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE0410細(xì)胞、H847細(xì)胞、CTSC-3細(xì)胞 
CEMC7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPDLF細(xì)胞、Jijoye細(xì)胞、H.Ep. #2細(xì)胞 
WM266-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MeT 5A細(xì)胞、OUMS23細(xì)胞、SGC7901細(xì)胞 
ECC12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-EBNA細(xì)胞、U-118 MG細(xì)胞、Tadarida brasiliensis 1 lung細(xì)胞 
Hs 839.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H661細(xì)胞、HEK 293細(xì)胞、HEK293-A細(xì)胞 
Rh30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT 115細(xì)胞、Ramos.G6.C10細(xì)胞、JM-Jurkat細(xì)胞 
T2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-38細(xì)胞、Mel-624細(xì)胞、Hs-695-T細(xì)胞 
HOP92細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF.7細(xì)胞、OCI-Ly03細(xì)胞、KYSE-270細(xì)胞 
NCI-H847細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Namalwa細(xì)胞、NCI-H-128細(xì)胞、IPLB-SF 21AE細(xì)胞 
OCIAML2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DF1細(xì)胞、Hk-2細(xì)胞、GM00637I細(xì)胞 
A 375細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 746T細(xì)胞、MCF-7/ADR細(xì)胞、451Lu細(xì)胞 
HCA 7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-292細(xì)胞、GC1-SPG細(xì)胞、AR4-IP細(xì)胞 
KP 4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Saos2細(xì)胞、D341Med細(xì)胞、CCD 19Lu細(xì)胞 
MCF-7/ADR-RES細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PT67細(xì)胞、B16-F0細(xì)胞、MDAMB-231細(xì)胞 
NKL 人NK細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞系
HFL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HeLaS3細(xì)胞、hTERT RPE-1細(xì)胞、SKLU-1細(xì)胞 
Factor Dependent Continuous-Paterson 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Capan-1細(xì)胞、HIT.T15細(xì)胞、MB 157細(xì)胞 
OCI-Ly03細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L929細(xì)胞、A-253細(xì)胞、MC/9細(xì)胞 
KTC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI 8226細(xì)胞、UMC11細(xì)胞、A 375細(xì)胞 
HEK293A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NK62a細(xì)胞、Panc 4.03細(xì)胞、L-540細(xì)胞 
293T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CMT-64細(xì)胞、HL-60 clone15細(xì)胞、SMA560細(xì)胞 
DoHH2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VMRCRCZ細(xì)胞、KYSE 180細(xì)胞、H-2291細(xì)胞 
SVEC4-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hx147細(xì)胞、CORL88細(xì)胞、Hs 729.T細(xì)胞 
AdHek細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BHT101細(xì)胞、WPE-int細(xì)胞、Hs 766細(xì)胞 
HT1080細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PK-13細(xì)胞、NT2-D1細(xì)胞、HT-1197細(xì)胞 
MDA-MB-231-luc細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：211H細(xì)胞、LN 382細(xì)胞、MHH-CALL2細(xì)胞 
DMS114細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LL/2細(xì)胞、EFO 27細(xì)胞、MC-4細(xì)胞 
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