"KOPN-8 人B淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：B淋巴細(xì)胞白血??；女性 
細(xì)胞形態(tài)：淋巴母細(xì)胞樣 
培養(yǎng)細(xì)胞的凍存及復(fù)蘇：細(xì)胞低溫凍存是培養(yǎng)室常規(guī)工作和通用技術(shù)。細(xì)胞凍存在-１９６℃液氮中，儲(chǔ)存時(shí)間幾乎是無限的。細(xì)胞凍存及復(fù)蘇的原則是慢凍快融。【凍存細(xì)胞】１)選對(duì)數(shù)增生期細(xì)胞(證明無支原體污染)，在凍存前１d換液；２)按常規(guī)方法把培養(yǎng)細(xì)胞制備成懸液，計(jì)數(shù)，使細(xì)胞密度達(dá)５×１０／ml左右密度，離心，去上清；３)加入配制好的凍存液(培養(yǎng)液６.８ml，小牛血清２ml，DMSO １ml，５.６%NaHCO３ ０.１ml)，按與去上清相同的量一滴一滴加入離心管中，然后用吸管輕輕吹打令細(xì)胞重懸。凍存細(xì)胞時(shí)培養(yǎng)液中加入保護(hù)劑１０％二甲基亞砜(DMSO)或甘油，可使冰點(diǎn)降低，使細(xì)胞內(nèi)水分在凍結(jié)前透出細(xì)胞外；４)分裝于無菌凍存管中，每管加１.５m懸液；５)旋好凍存管并仔細(xì)檢查，一定要蓋緊，做好標(biāo)記；６)凍存：在特殊的儀器或簡(jiǎn)易的液氮容器中，按-１℃／min的速度，在３０～４０min時(shí)間內(nèi)，下降到液氮表面，再停３０min后，直接投入液氮中。要適當(dāng)掌握下降冷凍速度，過快能影響細(xì)胞內(nèi)水分透出，太慢則促進(jìn)冰晶形成。操作時(shí)應(yīng)戴防護(hù)眼鏡和手套，以免液氮凍傷?！緩?fù)蘇細(xì)胞】１)從罐中取出凍存管；２)迅速放入３６℃～３７℃水浴，不時(shí)搖動(dòng)，使其急速融化，３０～６０s內(nèi)完成；３)凍存管用７０％酒精擦拭消毒后，打開蓋子，用吸管將細(xì)胞懸液注入離心管中，再滴加１０ml培養(yǎng)液；４)低速離心(５００～１０００r／min) ５min，去上清后再用培養(yǎng)液洗一次；５)用培養(yǎng)液適當(dāng)稀釋后，裝入培養(yǎng)瓶３７℃培養(yǎng)，次日更換一次培養(yǎng)液后，繼續(xù)培養(yǎng)。以后仍按常規(guī)進(jìn)行培養(yǎng)。凍存細(xì)胞數(shù)量要充分，密度應(yīng)達(dá)到１０／ml，在融后稀釋２０倍時(shí)，仍能保持５×１０／ml數(shù)量。 
細(xì)胞生長(zhǎng)：懸浮 
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源 
KOPN-8 人B淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支) 
公司細(xì)胞庫(kù)凍存并保種有2300多種各類細(xì)胞系。針對(duì)每種不同的細(xì)胞系，公司摸索并積累了大量細(xì)胞培養(yǎng)條件和優(yōu)化參數(shù)，為您的細(xì)胞實(shí)驗(yàn)保駕護(hù)航。細(xì)胞培養(yǎng)是生命科學(xué)研究中最基礎(chǔ)、也是最常用的實(shí)驗(yàn)手段。從凍存→復(fù)蘇→傳代→實(shí)驗(yàn)，在每一次細(xì)胞培養(yǎng)的過程中我們都是精心呵護(hù)，小心培養(yǎng)，心里都是默默承諾：我要護(hù)你一世周全！可是可是……無數(shù)次細(xì)胞都因污染而離我而去，投入的不只是我們貌美如花的青春，還有那一去不復(fù)返的經(jīng)費(fèi)！在細(xì)胞生物學(xué)，生物化學(xué)，免疫學(xué)，神經(jīng)生物學(xué)，病理學(xué)……只要涉及細(xì)胞的研究領(lǐng)域，都面臨著支原體污染的威脅。在眾多污染物中，也就屬支原體最狡猾了，他最善于隱藏自己，因?yàn)楸恢гw污染的細(xì)胞不會(huì)馬上死亡，但會(huì)改變細(xì)胞的新陳代謝，甚至?xí)淖兗?xì)胞的基因表達(dá)譜，我們就這樣被欺騙了無數(shù)次，誰讓我們就是個(gè)看“顏值”的花癡了?？墒俏覀兺ㄟ^被虐了幾百次的經(jīng)驗(yàn)中總結(jié)出來，當(dāng)你的細(xì)胞出現(xiàn)了這些癥狀時(shí)：生長(zhǎng)速率改變；活性減弱；形態(tài)改變；染色體畸變；轉(zhuǎn)染效率顯著降低；細(xì)胞復(fù)蘇后存活率降低……。那你就得千萬小心了，也許你的細(xì)胞已經(jīng)被支原體欺凌了！ 
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。 
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系 
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：懸浮 
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細(xì)胞傳代時(shí)消化的問題：可以這樣說，對(duì)于需要消化傳代的細(xì)胞，每一次的消化都是對(duì)這個(gè)細(xì)胞存活與否，狀態(tài)好與不好最至關(guān)重要的考驗(yàn)。很多同學(xué)都遇到過這個(gè)問題，自己養(yǎng)的細(xì)胞開始的幾代長(zhǎng)的還挺好的，可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細(xì)胞，狀態(tài)越來越差勁了。對(duì)于這個(gè)問題，可以非常肯定地說，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細(xì)胞受到較大損傷了。所以，越長(zhǎng)越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細(xì)胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個(gè)問題就是，細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)是不一樣的，每一個(gè)細(xì)胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細(xì)胞消化同樣的時(shí)間對(duì)細(xì)胞是不公平的，他們受到了差別待遇當(dāng)然會(huì)有脾氣啊。我后來對(duì)消化的方法進(jìn)行了改良。爭(zhēng)取做到因材施教呵呵。我稱之為“四步消化法”。（以難消化細(xì)胞為例）；具體操作：１)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗１-２遍，（這是前奏，即為步，目的是將漂浮著的死細(xì)胞之類盡量洗掉。２)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細(xì)胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。即為第二步（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細(xì)胞對(duì)比觀察看誰長(zhǎng)的更好一點(diǎn)就知道該細(xì)胞對(duì)胰酶的敏感度了。）３)吸干凈瓶?jī)?nèi)剩余液體，加入０.３ml左右的胰酶潤(rùn)洗一遍，吸掉棄之，再加入１ml左右的胰酶消化。消化的同時(shí)置于顯微鏡下觀察，待細(xì)胞與細(xì)胞之間間隙明顯的時(shí)候立即吸掉胰酶與干凈子彈頭里備用，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打２-３遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用２ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。（你也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對(duì)比。）這是第三步。４)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進(jìn)去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細(xì)胞。當(dāng)然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，呵呵。繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細(xì)胞間隙明顯，細(xì)胞獨(dú)立開來的時(shí)候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據(jù)實(shí)際情況你自己把握）。這是第四步。其實(shí)還可以有第五步，對(duì)于特別難消化的細(xì)胞和對(duì)胰酶特別敏感的細(xì)胞的話，你可以繼續(xù)加第五步甚至第六步。為了細(xì)胞更好的狀態(tài)，更漂亮的樣子，沒辦法，你必須分多批多次消化，這樣才能限度地將胰酶對(duì)細(xì)胞的損傷降到最低，保證細(xì)胞的狀態(tài)能夠。當(dāng)然了，如果細(xì)胞是屬于那種很容易消化的細(xì)胞，像RAW２６４.７，僅僅第二步就搞定了。就沒必要第三步第四步了。這個(gè)是需要你在實(shí)驗(yàn)中能夠自己用心去體會(huì)的。建議你接受一個(gè)新細(xì)胞時(shí)把各步消化的細(xì)胞分別培養(yǎng)起來做比較，去摸索好細(xì)胞對(duì)胰酶的要求。便于你后續(xù)實(shí)驗(yàn)的開展。將細(xì)胞消化分成這幾步，除了是為了避免胰酶對(duì)細(xì)胞的損傷之外，還有一個(gè)更重要的作用就是，可以程度地把細(xì)胞吹打成單個(gè)單個(gè)的狀態(tài)，不成片不連體。 
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書 
MESSA/Dx5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KM12-SM細(xì)胞、HLEC-B3細(xì)胞、MEG01細(xì)胞 
Hs 600.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B 95.8細(xì)胞、SuDHL 1細(xì)胞、H1963細(xì)胞 
GP293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KU 812細(xì)胞、CL-11細(xì)胞、BMSC/hBMSCs細(xì)胞 
N9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KB細(xì)胞、KU-812-F細(xì)胞、HT144mel細(xì)胞 
S37細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBE135-E6E7細(xì)胞、Jurkat, Clone E6-1細(xì)胞、NCIH716細(xì)胞 
NCIH1993細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：3AA細(xì)胞、KPL4細(xì)胞、HUV-EC-C細(xì)胞 
GM03320細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK.OV.3細(xì)胞、675T細(xì)胞、L-02細(xì)胞 
Lu-99A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3X63 Ag8細(xì)胞、HPAF II細(xì)胞、CHO K1細(xì)胞 
786-0WT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PATU-S細(xì)胞、BXPC3細(xì)胞、TW 01細(xì)胞 
F36P細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MiaPaCa-2細(xì)胞、WM-266-4細(xì)胞、373MG細(xì)胞 
MMVECs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MFE 280細(xì)胞、MOLT16細(xì)胞、JIMT1細(xì)胞 
U-343-MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OUMS-27細(xì)胞、CMT 93細(xì)胞、H1568細(xì)胞 
Line 697細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUT 226細(xì)胞、L-cells細(xì)胞、HeLa-S3細(xì)胞 
H2085細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Epstein-Barr-1細(xì)胞、MC3T3, E1 subgroup-4 clone細(xì)胞、H1618細(xì)胞 
H-2066細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCA433_Bast細(xì)胞、RKO-AS-45-1細(xì)胞、Panc 02細(xì)胞 
BAR-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-293F細(xì)胞、H22-H8D8細(xì)胞、CWR-22rv1細(xì)胞 
BAR-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-293F細(xì)胞、H22-H8D8細(xì)胞、CWR-22rv1細(xì)胞 
ISHI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF17細(xì)胞、MC-26細(xì)胞、NCI-SNU-387細(xì)胞 
KYSE0410細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H929細(xì)胞、GTL-16細(xì)胞、SKG-IIIa細(xì)胞 
NCIH1793細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：D-324 Med細(xì)胞、GM04154B細(xì)胞、NCIH82細(xì)胞 
KOPN-8 人B淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞系
MHCC-97細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-343細(xì)胞、LL2細(xì)胞、PTK-1細(xì)胞 
A-172MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HLEpiC細(xì)胞、SKG IIIa細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-361細(xì)胞 
FL62891細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PCI-SG231細(xì)胞、SNU-601細(xì)胞、SNU-668細(xì)胞 
HITT15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CNE-1細(xì)胞、Lu-65細(xì)胞、HR-1細(xì)胞 
MEF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OKAC1細(xì)胞、SNT-8細(xì)胞、C8-D1A細(xì)胞 
PBL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H35細(xì)胞、RAW 264.7細(xì)胞、MA-782細(xì)胞 
C4-2 B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AR41P細(xì)胞、EB-3細(xì)胞、Panc-813細(xì)胞 
CCK81細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HLE-B3細(xì)胞、IOSE29細(xì)胞、NCI H23細(xì)胞 
L-5178-Y細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Clone 929細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-330細(xì)胞、GM03569D細(xì)胞 
TK-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TM3細(xì)胞、PC-3M細(xì)胞、GLC-15細(xì)胞 
Det. 562細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H19-7細(xì)胞、SNU620細(xì)胞、MES 13細(xì)胞 
HKBML細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HL-1細(xì)胞、8226細(xì)胞、SW 962細(xì)胞 
MBdSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH810細(xì)胞、MC3T3-E細(xì)胞、HCT.116細(xì)胞 
AR4-IP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：S3 HeLa細(xì)胞、Scott and White No. 13細(xì)胞、Rat Fetal Lung-6細(xì)胞 
ROS17/28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Immortalized Human Hepatocytes細(xì)胞、MC57G細(xì)胞、IGROV-1細(xì)胞 
P3X63Ag8653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A704細(xì)胞、CHO cell clone K1細(xì)胞、HEC-1B細(xì)胞 
Leydig細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CTSC-3細(xì)胞、BPH-1細(xì)胞、MC3T3-L1細(xì)胞 
RMS1598細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1355細(xì)胞、T2細(xì)胞、Ramos 1細(xì)胞 
Panc8.13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM04680細(xì)胞、Nb2a細(xì)胞、NCIH660細(xì)胞 
RCC10RGB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLA801-95C細(xì)胞、Michigan Cancer Foundation-10A細(xì)胞、MIO-M1細(xì)胞 
Hs 695T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3/NS1/1-Ag4-1細(xì)胞、L-6細(xì)胞、Hos TE-85細(xì)胞 
NBL-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RL952細(xì)胞、H-2085細(xì)胞、WSUDLCL2細(xì)胞 
MCAEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM15452細(xì)胞、293T細(xì)胞、McA-RH 7777細(xì)胞 
KMH2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNBE(2)細(xì)胞、ARIP細(xì)胞、PG-4 (S+L-)細(xì)胞 
C-33A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH740細(xì)胞、CEM-T4細(xì)胞、PC3M-IE8細(xì)胞 
NCI/ADR-RES細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FM-88細(xì)胞、DC 2.4細(xì)胞、L-cell細(xì)胞 
NK-92MI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SLMT1細(xì)胞、SUPB-15細(xì)胞、NCI-SNU-407細(xì)胞 
L-540細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FRO 81-2細(xì)胞、NCI-H2405細(xì)胞、RL-95-2細(xì)胞 
LIXC002細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI/AML4細(xì)胞、Becker細(xì)胞、PC2細(xì)胞 
PG-LH7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RSMC細(xì)胞、T/GHA-VSMC細(xì)胞、CAL 78細(xì)胞 
PLC/PRF5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE 510細(xì)胞、SUPB15細(xì)胞、LC1sq細(xì)胞 
KCL22細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GC9811-P細(xì)胞、EC-GI細(xì)胞、Hs27F細(xì)胞 
P3-X63-Ag8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colo-678細(xì)胞、Sp2/mIL-6細(xì)胞、HEY A8細(xì)胞 
UCLA SO M14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-220細(xì)胞、CEF細(xì)胞、C2BBe 1細(xì)胞 
HRPEpiC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HDQ-P1細(xì)胞、RSC-364細(xì)胞、QBI-HEK 293A細(xì)胞 
SKNBE(2c)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Melan-a細(xì)胞、HCA 7細(xì)胞、NCI-H522細(xì)胞 
SKNBE(2c)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Melan-a細(xì)胞、HCA 7細(xì)胞、NCI-H522細(xì)胞 
MyLa 2059細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16 melanoma細(xì)胞、KYSE 520細(xì)胞、mRTEC細(xì)胞 
MB 157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UPCI:SCC090細(xì)胞、Z-138細(xì)胞、Hepatoma 22細(xì)胞 
NIE-115細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MRASMC細(xì)胞、Hs852細(xì)胞、L5178Y細(xì)胞 
COLO 824細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KY-270細(xì)胞、NP-69細(xì)胞、HEK293-EBNA細(xì)胞 
KOPN-8 人B淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞系
KG-1a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HVSMC細(xì)胞、ROS17/28細(xì)胞、QG-56細(xì)胞 
P-388D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OV1063細(xì)胞、L-Wnt3A細(xì)胞、Neuro 2a細(xì)胞 
TGBC11TKB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2085細(xì)胞、NCTC-3960細(xì)胞、OVCAR-433細(xì)胞 
NCI H226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Microvascular Endothelial Cell line-1細(xì)胞、HCC78細(xì)胞、BAR-T細(xì)胞 
Hs_578t細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NOZC-1細(xì)胞、MILE SVEN 1細(xì)胞、NCIH1876細(xì)胞 
Sp2/O-Ag14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MUVEC細(xì)胞、SJ-RH30細(xì)胞、H-87細(xì)胞 
H250細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VM-CUB1細(xì)胞、RERF-LC-MS細(xì)胞、NU-GC-2細(xì)胞 
HCC2935細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GLC82細(xì)胞、L5178Y TK+/-3.7.2c細(xì)胞、OC-3-VGH細(xì)胞 
COS1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pa14C細(xì)胞、H-1373細(xì)胞、YT細(xì)胞 
OEC33細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ZR-75-1細(xì)胞、AZ521細(xì)胞、NBL-2細(xì)胞 
Hca-F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ARO81細(xì)胞、OCM-1A細(xì)胞、HCCLM6細(xì)胞 
GP2-293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AM38細(xì)胞、HEK-A細(xì)胞、CaES-17細(xì)胞 
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