"MH7A 關(guān)節(jié)炎成纖維細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：關(guān)節(jié)；成纖維細(xì)胞；SV４０轉(zhuǎn)化；女性 
細(xì)胞形態(tài)：成纖維細(xì)胞樣 
購(gòu)買細(xì)胞注意事項(xiàng)：１)收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系；２)仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū)，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等；３)用７５%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落，將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)過(guò)夜，隔天再取出觀察。此時(shí)多數(shù)細(xì)胞均會(huì)貼壁，若細(xì)胞仍不能貼壁請(qǐng)用臺(tái)盼藍(lán)染色測(cè)定細(xì)胞活力，如果證實(shí)細(xì)胞活力正常，請(qǐng)將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng)；如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無(wú)活力，請(qǐng)拍下照片及時(shí)和我們聯(lián)系，信息確認(rèn)后我們?yōu)槟倜赓M(fèi)寄送一次；４)建議客戶收到細(xì)胞后前３天各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和公司技術(shù)部溝通交流?！炯?xì)胞傳代操作步驟】一、貼壁細(xì)胞傳代：１)提前將培養(yǎng)基、PBS放入３７℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用７５%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi)；２)吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞；３)加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，３７℃孵育，每隔２~３min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動(dòng)細(xì)胞瓶，終止胰酶作用；４)用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ?，避免產(chǎn)生大量的氣泡；５)將細(xì)胞懸液分別接種到另外的２~３個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置３７℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。二、懸浮細(xì)胞傳代：１)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi)，１０００rpm離心５min；２)棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液；３)將細(xì)胞懸液分別接種到另外的２~３個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置３７℃溫箱培養(yǎng)。 
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁 
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源 
MH7A 關(guān)節(jié)炎成纖維細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支) 
可以這樣說(shuō)，對(duì)于需要消化傳代的細(xì)胞，每一次的消化都是對(duì)這個(gè)細(xì)胞存活與否，狀態(tài)好與不好至關(guān)重要的考驗(yàn)。很多同學(xué)都遇到過(guò)這個(gè)問(wèn)題，自己養(yǎng)的細(xì)胞開(kāi)始的幾代長(zhǎng)的還挺好的，可是穿過(guò)幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細(xì)胞不行了，狀態(tài)越來(lái)越差勁了。對(duì)于這個(gè)問(wèn)題，可以非常肯定地說(shuō)，你的消化環(huán)節(jié)出問(wèn)題了。你每一次的消化都讓細(xì)胞受到較大損傷了。所以，越長(zhǎng)越差。在消化的過(guò)程中，你加入胰酶后，所有細(xì)胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個(gè)問(wèn)題就是，細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)是不一樣的，每一個(gè)細(xì)胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒(méi)有那么牢固的，所以，讓所有的細(xì)胞消化同樣的時(shí)間對(duì)細(xì)胞是不公平的，他們受到了差別待遇當(dāng)然會(huì)有脾氣的，大家爭(zhēng)取做到因材施教，比如試試下面的“四步消化法”。（以難消化細(xì)胞為例），具體操作：1)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗1-2遍（目的是將漂浮著的死細(xì)胞之類盡量洗掉）。2)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細(xì)胞吹打下來(lái)。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過(guò)的細(xì)胞對(duì)比觀察看誰(shuí)長(zhǎng)的更好一點(diǎn)就知道該細(xì)胞對(duì)胰酶的敏感度了）3)吸干凈瓶?jī)?nèi)剩余液體，加入0.3ml左右的胰酶潤(rùn)洗一遍，吸掉棄之，再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同時(shí)置于顯微鏡下觀察，待細(xì)胞與細(xì)胞之間間隙明顯的時(shí)候立即吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基開(kāi)始吹打，吹打2-3遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用2ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。(也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對(duì)比)4)然后把前面剛吸出來(lái)的胰酶重新加進(jìn)去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細(xì)胞。當(dāng)然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細(xì)胞間隙明顯，細(xì)胞獨(dú)立開(kāi)來(lái)的時(shí)候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據(jù)實(shí)際情況把握）。 
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。 
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系 
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁 
MH7A 關(guān)節(jié)炎成纖維細(xì)胞系
細(xì)胞消化過(guò)程總結(jié)：其實(shí)絕大部分細(xì)胞消化的時(shí)候是只要用胰酶潤(rùn)洗一遍即可，吸去胰酶后，殘留的那些無(wú)法計(jì)算體積的附著在細(xì)胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足夠消化細(xì)胞（絕大部分１min不到）。對(duì)于這些細(xì)胞原則上不要用胰酶孵育細(xì)胞，連續(xù)這樣傳代，對(duì)細(xì)胞傷害很大。簡(jiǎn)單的程序是PBS潤(rùn)洗吸去，胰酶潤(rùn)洗吸去，然后３７度消化。２，什么算是消化好了呢？不是細(xì)胞全部成間隔分布很離散的單個(gè)圓形才算消化好了，一般你肉眼觀察貼壁細(xì)胞層，只要能移動(dòng)了，多半呈沙壯移動(dòng)，其實(shí)已經(jīng)可以了，很多人喜歡把細(xì)胞消化或者吹打成完全分離細(xì)胞，這是沒(méi)有必要的。一般能移動(dòng)了，說(shuō)明細(xì)胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了，細(xì)胞之間的附著也已經(jīng)消失了，細(xì)胞已經(jīng)獨(dú)立分布了（雖然沒(méi)有呈現(xiàn)很廣的離散分布）。這個(gè)時(shí)候應(yīng)該停止消化，不要等到看到鏡下所有細(xì)胞都分離得非常好，間隙很大，才停止。細(xì)胞就是完全成單個(gè)細(xì)胞懸液，之后在貼壁的過(guò)程中仍然會(huì)聚集，這個(gè)是貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，尤其是腫瘤細(xì)胞的一個(gè)特性，無(wú)論死活的細(xì)胞都是如此，你可以嘗試，準(zhǔn)備１００%的單個(gè)細(xì)胞懸液，貼壁后觀察細(xì)胞，仍然是幾個(gè)幾個(gè)細(xì)胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細(xì)胞也是如此，容易聚集，不要去嘗試過(guò)幾個(gè)小時(shí)就拿出來(lái)吹打成單細(xì)胞懸液（不要笑，這個(gè)是初養(yǎng)懸浮細(xì)胞的人常犯的錯(cuò)誤，以為懸浮培養(yǎng)就是一個(gè)一個(gè)分開(kāi)）。細(xì)胞只要能從基質(zhì)上脫離下來(lái)，這個(gè)時(shí)候即使是成片的（比如Calu-３細(xì)胞），吹打不超過(guò)２０次后（一般１０次即可），成小規(guī)模聚集（１０個(gè)細(xì)胞左右），是正常的，不要試圖再去延長(zhǎng)消化時(shí)間，或者像有的同學(xué)那樣吹打１h，等待單細(xì)胞懸液出現(xiàn)。比較難消化的細(xì)胞（潤(rùn)洗方法５min還不能消化），比如HCT１５, LS４１１和KM１２，這樣的細(xì)胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００mm dish，一次最多加入５００ul，就足夠了，一般我加３００ul。即使這樣難消化的細(xì)胞，一般不超過(guò)５min，即可見(jiàn)細(xì)胞成片移動(dòng)，就應(yīng)該停止消化。一些正常細(xì)胞也會(huì)有難消化的時(shí)候，比如tsDC細(xì)胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙狀移動(dòng)。 
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū) 
H2073細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：253J B-V細(xì)胞、CSQT-2細(xì)胞、McA-RH8994細(xì)胞 
GM 2132細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM04154B細(xì)胞、GI-1細(xì)胞、EFM-192A細(xì)胞 
NFS60細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUT-125細(xì)胞、PLC PRF 5細(xì)胞、P1-Raji細(xì)胞 
GM00215A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOSEpiC細(xì)胞、H2122細(xì)胞、GM02219D細(xì)胞 
SCC 25細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1650細(xì)胞、hESC細(xì)胞、PAN 02細(xì)胞 
NCI-H1755細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEAS2B細(xì)胞、Leukemia 1210細(xì)胞、LCLC103H細(xì)胞 
MS 751細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCA5細(xì)胞、BALB 3T3 clone A31細(xì)胞、NCI-H520細(xì)胞 
ECGI10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CG4細(xì)胞、BDCM細(xì)胞、C3H/10T1/2 clone 8細(xì)胞 
VM-CUB1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC4細(xì)胞、MSCs（mUCMSCs）細(xì)胞、SW-948細(xì)胞 
LU165細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WIL2-S細(xì)胞、hMSC-BM細(xì)胞、HCT 116細(xì)胞 
MDBK (NBL-1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H378細(xì)胞、RIN-m細(xì)胞、COR-L23/P細(xì)胞 
MCF 7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：293-GP細(xì)胞、MyLa2059細(xì)胞、NCI-H2444細(xì)胞 
WM 239細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PAEC細(xì)胞、DLD-1細(xì)胞、HCT8細(xì)胞 
NOR 10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Capan1細(xì)胞、CTX TNA2細(xì)胞、Hut292細(xì)胞 
MUGCHOR1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：no.11細(xì)胞、HCCC-9810細(xì)胞、WIL2S細(xì)胞 
GRSL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Granta519細(xì)胞、DBTRG-05MG細(xì)胞、NCI-H1836細(xì)胞 
GRSL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Granta519細(xì)胞、DBTRG-05MG細(xì)胞、NCI-H1836細(xì)胞 
OCM-1A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A.704細(xì)胞、Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B細(xì)胞、OCILY3細(xì)胞 
DH 82細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A549/DDP細(xì)胞、MEG01細(xì)胞、IMR 32細(xì)胞 
THP-1(ATCC)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：J.E6-1細(xì)胞、BLO-11細(xì)胞、Vero 76細(xì)胞 
MH7A 關(guān)節(jié)炎成纖維細(xì)胞系
NCI-H-295細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KM932細(xì)胞、LN-229細(xì)胞、NCCIT細(xì)胞 
3T3-Swiss albino細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPTEC/TERT1細(xì)胞、SVG(P12)細(xì)胞、ANA-1細(xì)胞 
KYSE-180細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM190細(xì)胞、PC-2 [Human pancreatic carcinoma]細(xì)胞、SKNBE(1)細(xì)胞 
T2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-38細(xì)胞、Mel-624細(xì)胞、Hs-695-T細(xì)胞 
PIEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-SH-SY5Y細(xì)胞、GC-1 spg細(xì)胞、WiDr-TC細(xì)胞 
NE-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：159 PT細(xì)胞、MGC803細(xì)胞、HSC-6細(xì)胞 
UPCI:SCC154細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PTK1細(xì)胞、Lu99A細(xì)胞、HSC3細(xì)胞 
Detroit562細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NALM-6細(xì)胞、OE-33細(xì)胞、UCD-MLA-144細(xì)胞 
PL-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF-CEM細(xì)胞、UACC-893細(xì)胞、NTera2 cl.D1細(xì)胞 
COLO-394細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H810細(xì)胞、T2 (174 x CEM.T2)細(xì)胞、NBL-12細(xì)胞 
MG-HU-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-32細(xì)胞、CCD-1112sk細(xì)胞、LTEPa2細(xì)胞 
OE-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Nthy-ori 3.1細(xì)胞、CTLA4Ig-24細(xì)胞、JM-1細(xì)胞 
HOS TE 85細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：293AD細(xì)胞、LI7細(xì)胞、MOVAS-1細(xì)胞 
GTL-16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H35 Reuber細(xì)胞、SNG-M細(xì)胞、Colo205細(xì)胞 
SK-HEP-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKM-1細(xì)胞、MC3T3-E1細(xì)胞、rRMECs細(xì)胞 
PL-12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLT-3細(xì)胞、NCIH747細(xì)胞、NIE-115細(xì)胞 
CAL-27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL-51細(xì)胞、My-La 2059細(xì)胞、NCI-747細(xì)胞 
S3-HeLa細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hi-five細(xì)胞、RPTEC/TERT 1細(xì)胞、HNTEC細(xì)胞 
SW-13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B35細(xì)胞、RH35細(xì)胞、MCF-7B細(xì)胞 
D324細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IMR32細(xì)胞、NCI-H211細(xì)胞、RMC-1細(xì)胞 
SK HEP 01細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HcaF細(xì)胞、Wien-133細(xì)胞、CAMA-1細(xì)胞 
ZR7530細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Caco2-BBE細(xì)胞、293-F細(xì)胞、H-1092細(xì)胞 
COLO-738細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Roswell Park Memorial Institute 1846細(xì)胞、M3 Clone M-3細(xì)胞、GM05862細(xì)胞 
NCI-H2198細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ca761細(xì)胞、OVCAR5細(xì)胞、DSL6A/C1細(xì)胞 
SU-DHL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DU-145細(xì)胞、H28細(xì)胞、A375-MEL細(xì)胞 
COLO 16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFM192C細(xì)胞、MSTO-211H細(xì)胞、MES23.5細(xì)胞 
BE2M17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LLC-PK-1細(xì)胞、KU 19-19細(xì)胞、Ketr-3細(xì)胞 
Leukemic 1210細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2108細(xì)胞、H-1693細(xì)胞、Co320細(xì)胞 
T-HEECs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：QBI-HEK 293A細(xì)胞、MV4;11細(xì)胞、MDA134細(xì)胞 
H-1770細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RSC 96細(xì)胞、Fetal Human Lens-124細(xì)胞、PLC/PRF/5細(xì)胞 
Human Melanoma Cell Bowes細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jeko1細(xì)胞、hEM15A細(xì)胞、Ca 9-22細(xì)胞 
NCI-H2085細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-6細(xì)胞、H-7721細(xì)胞、HT55細(xì)胞 
NHDF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL 33細(xì)胞、UCLA-SO-M21細(xì)胞、D341 Med細(xì)胞 
MDCK Type II細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LMH細(xì)胞、Michigan Cancer Foundation-12F細(xì)胞、HEC-1A細(xì)胞 
GM03573A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc 5.04細(xì)胞、NOMO1細(xì)胞、LLC-PK1細(xì)胞 
HPB-ALL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Eca 109細(xì)胞、H3396細(xì)胞、PCI-4.2細(xì)胞 
NCTC-1469細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-357細(xì)胞、Jeko1細(xì)胞、FRhK4細(xì)胞 
KYSE510細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Eph4 1424細(xì)胞、AE1201細(xì)胞、Ramos 2G6.4C10細(xì)胞 
SUDHL-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF-10 Attached細(xì)胞、University of Michigan-Renal Carcinoma-2細(xì)胞、RGC-5細(xì)胞 
UCLA SO M21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MAVER-1細(xì)胞、Mono Mac 6細(xì)胞、SF-295細(xì)胞 
Cloudman S91 melanoma細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 206細(xì)胞、CAL39細(xì)胞、NCI-522細(xì)胞 
MH7A 關(guān)節(jié)炎成纖維細(xì)胞系
COLO 684細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-620細(xì)胞、AtT-20細(xì)胞、SKMEL2細(xì)胞 
SK Hep1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：D-324MED細(xì)胞、Murine Lung Epithelial-12細(xì)胞、CCD841CoTr細(xì)胞 
P3X63Ag8653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A704細(xì)胞、CHO cell clone K1細(xì)胞、HEC-1B細(xì)胞 
H22-H8D8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHL1細(xì)胞、NCI-H69C細(xì)胞、HS-294-T細(xì)胞 
CCD-1095Sk細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC 9細(xì)胞、hFOB 1.19細(xì)胞、HCO細(xì)胞 
SGC 7901細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-2932細(xì)胞、UK Pan-1細(xì)胞、P30/0HK細(xì)胞 
Jurkat E6.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1869細(xì)胞、H2291細(xì)胞、NCI522細(xì)胞 
Suzhou Human Glioma-44細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：52PE細(xì)胞、H-157細(xì)胞、B16 melanoma F10細(xì)胞 
TE-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Wien-133細(xì)胞、Daudi細(xì)胞、Wien 133細(xì)胞 
KYSE-140細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-453細(xì)胞、Kato-III細(xì)胞、HEK 293細(xì)胞 
WM-2664細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mahlavu細(xì)胞、PAI細(xì)胞、GM00215A細(xì)胞 
NFS60細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUT-125細(xì)胞、NGEC細(xì)胞、RPMI 1846細(xì)胞 
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