"RL-65 大鼠肺上皮細胞系
細胞背景資料：詳見相關文獻介紹 
細胞形態(tài)：上皮細胞樣 
細胞培養(yǎng)方面注意的幾點：無菌意識要強：實驗進行前，超凈臺以紫外燈照射３０分鐘滅菌，以７０%ethanol擦拭無菌操作抬面，并開啟超凈工作臺風扇運轉數(shù)分鐘后，才開始實驗操作。每次操作只處理一株細胞株，以避免失誤混淆或細胞間污染。實驗完畢后，將實驗物品帶出工作臺，以７０%ethanol擦拭無菌操作抬面。無菌操作工作區(qū)域應保持清潔及寬敞，必要物品，例如支架、吸管等公用物品可以暫時放置，其它個人實驗用品用完應立即拿出。實驗用品以７０%乙醇擦拭后才帶入無菌操作臺內(nèi)。實驗操作應在中央無菌區(qū)域，一般勿在邊緣區(qū)域操作。小心取用無菌之實驗物品，避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或是容器瓶口，亦不要在打開之容器正上方操作實驗。容器打開后，以手夾住瓶蓋并握住瓶身，傾斜約４５°角取用，盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。選擇正確的培養(yǎng)基：不同的細胞可能培養(yǎng)基不同，甚至不同的文獻可能對相同的細胞培養(yǎng)基成分也是可能不同的。如我當時培養(yǎng)神經(jīng)干細胞，有文獻就選用neurobase培養(yǎng)基，而我的實驗目的主要是做抗氧化和氧化方面的，而這種培養(yǎng)基中含有抗氧化劑成分，此時，我就不得不選擇另外一種不含抗氧化劑的培養(yǎng)基。瓶裝血清一定要逐步解凍:４℃冰箱全溶后再分裝，在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沉淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結而發(fā)生沉淀。熱滅活是指５６℃，３０分鐘加熱已完全解凍之血清。水浴鍋升到５６℃后，將血清放入，待溫度升高到５６℃后計時，一般５分鐘左右規(guī)則搖晃均勻一次。此熱處理之目的是使血清中之補體成份去活化。除非必須，一般不要作此熱處理，因為會造成沉淀物之顯著增多，且會影響血清之品質(zhì)。注意更換新血清(包括不同批次)對細胞的影響。 
細胞生長：貼壁 
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源 
RL-65 大鼠肺上皮細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支) 
凍存和復蘇的原則：慢凍快融》當細胞冷到零度以下，可以產(chǎn)生以下變化：細胞器脫水，細胞中可溶性物質(zhì)濃度升高，并在細胞內(nèi)形成冰晶。如果緩慢冷凍，可使細胞逐步脫水，細胞內(nèi)不致產(chǎn)生大的冰晶；相反，結晶就大，大結晶會造成細胞膜、綱胞器的損傷和破裂。復蘇過程應快融，目的是防止小冰晶形成大冰晶，即冰晶的重結晶。慢凍程序》1.標準程序：采用細胞凍存器》當溫度在-25℃以上時，1~2℃/min；當溫度達-25℃以下時，5~10℃/min；當溫度達-100℃時，可迅速放入液氮中。2.簡易程序：將冷凍管（管口要朝上）放入紗布袋內(nèi)，紗布袋系以線繩，通過線繩將紗布袋固定于液氮罐罐口，按每分鐘溫度下降1~2℃的速度，在40min內(nèi)降至液氮表面過夜，次晨投人液氮中。3.傳統(tǒng)程序：冷凍管置于4℃10分鐘→-20℃30分鐘→-80℃16~18小時（或隔夜）→液氮槽長期儲存。細胞凍存方法：1.預先配制凍存液》（1）8%DMSO+細胞生長液（92%血清）2.取對數(shù)生長期細胞，經(jīng)胰酶消化后，加入適量凍存液，用吸管吹打制成細胞懸液（1×10(6)~5×10(6)細胞/ml）。3.加入1ml細胞于凍存管中，密封后標記冷凍細胞名稱和冷凍日期。液氮長期保存。保存細胞的復蘇方法：1.快速解凍》凍存細胞從液氮中取出后，立即放入37℃水浴中，輕輕搖動冷凍管，使其在1分鐘內(nèi)全部融化（不要超過3分鐘）。2.解凍后的細胞可直接接種到含完全生長培養(yǎng)液的細胞培養(yǎng)瓶中直接進行培養(yǎng)，24小時后再用新鮮完全培養(yǎng)液替換舊培養(yǎng)液，以去除DMSO。3.如果細胞對冷凍保護劑特別敏感解凍后的細胞應先通過離心去除冷凍保護劑，然后再接種到含完全生長培養(yǎng)液的培養(yǎng)瓶中。 
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。 
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 
細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分 
RL-65 大鼠肺上皮細胞系
因為細胞生長的時候肯定是要相互聯(lián)系，大部分的細胞都是要成片生長的，尤其是對于貼壁細胞，單個細胞貼壁之后長著長著就長到一片去了。但是如果是成片的細胞抱團的話，傳代后細胞是不能貼壁的，這樣抱團的細胞就會死亡。所以，消化傳代的時候一定要將細胞消化成單個單個的獨立狀態(tài)，這個啊是非常考究你的功夫的！細胞一旦脫落入懸液里你很難再將他吹打成單個，因為他沒有受力點了。很難找到受力點讓你對他吹打的力分散開細胞。所以必須要在細胞未脫落之前將其吹打開，受力點就是細胞貼壁的地方。這樣你就必須要嚴格控制好消化的程度啊，這和大師做飯掌握好火候是一樣的道理啊。既要消化到容易吹打下來，又不能太過，一吹就整片脫落，要單個單個地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是為了保證不同生長狀態(tài)貼壁程度的細胞能夠都維持在好的受力點分散開。這個是很重要的一點。尤其是對于某些細胞這一點就是他活去死的致命點。像Caco-２細胞就是如此。另外關于傳代很重要一點就是一定不能等到細胞長滿的時候才去消化傳代。要在細胞長到７０%左右的時候就要傳代了，一旦發(fā)現(xiàn)細胞生長中已經(jīng)有疊層生長的時候就要立即進行消化傳代。不能再拖了。關于換液傳代時候洗瓶的問題。對于用DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)的細胞，你在洗的時候如果是用無血清１６４０去洗細胞在隨即后的幾次中會比用DMEM洗的長的要好。同樣，用１６４０培養(yǎng)的也有這個現(xiàn)象。如果不嫌麻煩的話，可以用PBS來洗，洗的效果和用無血清培養(yǎng)基洗的效果基本上是一樣的，對于有些細胞會更勝一籌。洗的目的主要是洗去培養(yǎng)瓶里殘留的血清，防止它對胰酶的影響。這樣能夠保證胰酶的消化能力優(yōu)先，是很關鍵的一點。先補充這么多，還會后續(xù)更新。再補充一點：傳代時PBS洗是很重要的一步，最近發(fā)現(xiàn)，用PBS就可以把細胞消化開來。加入PBS放置１０-１５分鐘，有些需要更長的時間，等到細胞一個個分離開來的時候，就可以直接吹打下來，但是和胰酶消化一樣，要控制好時間，不能時間太過了，要不然損傷細胞，細胞不容易成活，狀態(tài)容易不好。這個方法對于某些細胞是很管用的。有些細胞用胰酶消化不容易消化成單個的時候，或者臨時沒有胰酶了，可以選用此方法。不過一定要試試，看是否適合你的細胞。 
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書 
NCIH1915細胞系相關產(chǎn)品：SW260細胞、293細胞、MDA 435細胞 
CZ-1細胞系相關產(chǎn)品：ST細胞、EFO-27細胞、HMC細胞 
HEK293EBNA細胞系相關產(chǎn)品：OACP4 C細胞、NCIH2110細胞、3AA細胞 
L5178Y TK+/-3.7.2c細胞系相關產(chǎn)品：293S細胞、A375mel細胞、H4IIEC3細胞 
H-2009細胞系相關產(chǎn)品：NTera 2細胞、SJSA-1細胞、Caco2-BBE細胞 
HHUA細胞系相關產(chǎn)品：U266BL細胞、Hs-578Bst細胞、NK92-MI細胞 
CC-LP-I細胞系相關產(chǎn)品：MES-SA Dx5細胞、NCIH2052細胞、OVHM細胞 
Molm 14細胞系相關產(chǎn)品：M-O7e細胞、HCO細胞、38C-13細胞 
AGS細胞系相關產(chǎn)品：Glioma 261細胞、B 95.8細胞、H-596細胞 
PM6細胞系相關產(chǎn)品：H-1694細胞、hEEC細胞、HCT116細胞 
A101D細胞系相關產(chǎn)品：SNU-C2B細胞、NCI-A549細胞、B6Tert-1細胞 
THP-1(ATCC)細胞系相關產(chǎn)品：J.E6-1細胞、BLO-11細胞、Vero 76細胞 
L細胞系相關產(chǎn)品：PMVEC細胞、DU-4475細胞、NCI-SNU-668細胞 
NCIH1341細胞系相關產(chǎn)品：L5178-R細胞、WRL68細胞、HCC-827細胞 
SKRC-42細胞系相關產(chǎn)品：H-1618細胞、Ra No. 1細胞、NK-92MI細胞 
H929細胞系相關產(chǎn)品：639 V細胞、VK-2/E6E7細胞、NOK細胞 
H929細胞系相關產(chǎn)品：639 V細胞、VK-2/E6E7細胞、NOK細胞 
A9(Hamprecht)細胞系相關產(chǎn)品：SCC-15細胞、HCC-1359細胞、PC-14細胞 
EU-2細胞系相關產(chǎn)品：TE-11細胞、Roswell Park Memorial Institute 7951細胞、NCI-H1404細胞 
OPM2細胞系相關產(chǎn)品：KP-N-YN細胞、SKRC 39細胞、RSC-364細胞 
RL-65 大鼠肺上皮細胞系
K299細胞系相關產(chǎn)品：CL34細胞、H-2347細胞、NK-92細胞 
BC-024細胞系相關產(chǎn)品：MGH-UI細胞、SUM 159細胞、MV-1-Lu細胞 
COLO 320HSR細胞系相關產(chǎn)品：A 72細胞、OV90細胞、HHL-5細胞 
XWLC-05細胞系相關產(chǎn)品：H1770細胞、V79-1細胞、Hela-mock細胞 
Vx2細胞系相關產(chǎn)品：697細胞、NCIH2196細胞、Psi-2 DAP細胞 
A375S2細胞系相關產(chǎn)品：H1341細胞、PANC 1005細胞、PNT1-a細胞 
HCC-1395細胞系相關產(chǎn)品：SCaBER細胞、MOLP8細胞、HO1-N1細胞 
MDA415細胞系相關產(chǎn)品：H2135細胞、A 375細胞、HPDLF細胞 
Y3.AG.1.2.3細胞系相關產(chǎn)品：Rat Fetal Lung-6細胞、MES-SA/Dx5細胞、TALL 1細胞 
EAhy 926細胞系相關產(chǎn)品：SU86_86細胞、SK-MES-1細胞、huH 1細胞 
NCI-H322T細胞系相關產(chǎn)品：Rh30細胞、H-660細胞、BC-PAP細胞 
Y3-Ag 1.2.3細胞系相關產(chǎn)品：0V-1063細胞、DU_145細胞、ECC-10細胞 
BC-PAP細胞系相關產(chǎn)品：NMCG-1細胞、QG56細胞、WM 239A細胞 
University of Arizona Cell Culture-893細胞系相關產(chǎn)品：GM2132細胞、SKBr3細胞、Sp2/O細胞 
OUMS23細胞系相關產(chǎn)品：LA795細胞、WEHI-164細胞、Panc 03.27細胞 
SUM 52細胞系相關產(chǎn)品：MDA415細胞、SU86-86細胞、SKRC-20細胞 
HT 115細胞系相關產(chǎn)品：SBC5細胞、H2171細胞、KYSE520細胞 
CHOK1細胞系相關產(chǎn)品：SKRC20細胞、R 1610細胞、KHYG-1細胞 
CFSC-8B細胞系相關產(chǎn)品：L-6 myoblast細胞、HCAEC細胞、M20 [Human melanoma]細胞 
Centre Antoine Lacassagne-85-1細胞系相關產(chǎn)品：CHP-212細胞、Caco2BBe細胞、MDA330細胞 
hTERT RPE1細胞系相關產(chǎn)品：RPMI-8226細胞、MHCC97-H細胞、H-2108細胞 
SU86_86細胞系相關產(chǎn)品：HFL-I細胞、Melan-a細胞、L-Wnt3A細胞 
PF382細胞系相關產(chǎn)品：FRTL-5 Cl 2細胞、RWPE1細胞、PC 61 5.3細胞 
HR-1細胞系相關產(chǎn)品：HEK293F細胞、Walker-256-TC細胞、SNU638細胞 
V-79-4細胞系相關產(chǎn)品：HBZY 1細胞、C3H/10T1/2 clone 8細胞、A204細胞 
DSL6A/C1細胞系相關產(chǎn)品：HSC-4細胞、SW 900細胞、LK-2細胞 
HCAEC細胞系相關產(chǎn)品：NCIH522細胞、H.Ep.-2細胞、PLC細胞 
brain-derived Endothelial cells.3細胞系相關產(chǎn)品：NH-6細胞、RPMI 7951細胞、OCI-Ly 3細胞 
NCIH820細胞系相關產(chǎn)品：HBE細胞、SNU-668細胞、SKBr3細胞 
CHL/IU細胞系相關產(chǎn)品：NCI-747細胞、DoTc2細胞、MOLP8細胞 
SNU5細胞系相關產(chǎn)品：NCI-SNU-C2B細胞、Hela-Ap-1細胞、HEK 293-EBNA細胞 
Mouse Podocyte Clone-5細胞系相關產(chǎn)品：DSL-6A/C1細胞、HCEC-12細胞、U-251細胞 
MN-9D細胞系相關產(chǎn)品：Mono Mac6細胞、BT549細胞、H-2405細胞 
Anip-973細胞系相關產(chǎn)品：D 407細胞、HR-8348細胞、RKOE6細胞 
IPEC-J2細胞系相關產(chǎn)品：NT2細胞、Det. 562細胞、ACC-M細胞 
UWB1-289細胞系相關產(chǎn)品：A2780/CP細胞、HHFK細胞、DBTRG-05MG細胞 
SKMES-1細胞系相關產(chǎn)品：PCI-04B細胞、MDBK細胞、GES1細胞 
SGC996細胞系相關產(chǎn)品：HEI-193細胞、HDF-a細胞、SNU-407細胞 
Strain V細胞系相關產(chǎn)品：NeHepLxHT細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-4細胞、SUDHL6細胞 
H23細胞系相關產(chǎn)品：EC-GI細胞、HUSMC細胞、2T細胞 
ST細胞系相關產(chǎn)品：HGF-1細胞、THPI細胞、RGM-1細胞 
RL-65 大鼠肺上皮細胞系
ME 180細胞系相關產(chǎn)品：RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma]細胞、RD 2細胞、IR 983F細胞 
C 643細胞系相關產(chǎn)品：NPC-TW 01細胞、HTh74細胞、MDA-453細胞 
HNE2細胞系相關產(chǎn)品：SKN-AS細胞、Panc-05.04細胞、HPAEC細胞 
HCC1428細胞系相關產(chǎn)品：P-388細胞、CTLL-2細胞、NR8383.1細胞 
T-ALL 1細胞系相關產(chǎn)品：ZR75-30細胞、NUGC-3細胞、OCI-Ly 19細胞 
Alexander cells細胞系相關產(chǎn)品：HEK 293 c18細胞、M2-10B4細胞、CAL 85-1細胞 
GM02219細胞系相關產(chǎn)品：KMY1022細胞、KP-2細胞、MDA 231-LM2-4175細胞 
HDQP1細胞系相關產(chǎn)品：Tissue Culture-1細胞、HuP-T4細胞、Ect1/E6E7細胞 
OCI AML3細胞系相關產(chǎn)品：SW 839細胞、MOLP-8細胞、OVISE細胞 
MeWo細胞系相關產(chǎn)品：OCI-Ly3細胞、87 MG細胞、OS-732細胞 
NB1-RGB細胞系相關產(chǎn)品：D10.G4.1細胞、HT144-mel細胞、Tu-177細胞 
HEK-293-EBNA細胞系相關產(chǎn)品：32Dcl3細胞、SCL2細胞、PE/CA-PJ34 (clone C12)細胞 
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