"MC3T3-E1 Subclone 4 小鼠原成骨細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹 
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣 
細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)基本操作：①進(jìn)無菌室前要徹底洗手，按規(guī)定穿隔離衣。開始操作前要用７５%酒精棉球擦手、擦瓶口和燒灼瓶口。②操作者動(dòng)作要輕，安裝吸管帽、打開或封閉瓶口等操作應(yīng)在火焰近處并經(jīng)過燒灼進(jìn)行。但要注意，金屬器械不能在火焰中長(zhǎng)時(shí)間燒灼，以防退火；燒過的器械要冷卻后才能使用；已吸過培養(yǎng)液的吸管不能再用火焰燒灼，因殘留在吸管內(nèi)的培養(yǎng)液成分如蛋白質(zhì)等燒焦后會(huì)產(chǎn)生有害物質(zhì)，吸管再用時(shí)會(huì)將其帶到培養(yǎng)液中；膠塞、橡皮乳頭及塑料的細(xì)胞培養(yǎng)用品過火焰是也不能時(shí)間太長(zhǎng)，以免燒焦產(chǎn)生有毒氣體，危害培養(yǎng)細(xì)胞，同時(shí)塑料細(xì)胞培養(yǎng)用品也會(huì)產(chǎn)生變形影響使用。③使用培養(yǎng)液前不宜過早開瓶，開瓶后的培養(yǎng)液應(yīng)保持斜位，避免直立，以防止下落細(xì)菌的污染。不再使用的培養(yǎng)液應(yīng)立即封閉瓶口，培養(yǎng)的細(xì)胞在處理之前勿過早暴露在空氣中。④操作時(shí)盡量不要談話，咳嗽以防止來自唾沫和呼出的氣流所造成的污染。⑤吸取培養(yǎng)液、細(xì)胞懸液時(shí)，應(yīng)專管專用，一旦發(fā)現(xiàn)吸管口接觸了手和其他污染物品應(yīng)棄去，以防止污染擴(kuò)大或造成培養(yǎng)物之間的交叉污染。⑥操作完畢后應(yīng)整理好工作臺(tái)面，用消毒水浸泡的紗布擦拭臺(tái)面；防止細(xì)胞交叉污染：所有從別處轉(zhuǎn)來的或是自己所建的細(xì)胞系都要早期留有的充足的凍存儲(chǔ)備，一旦懷疑發(fā)生交叉污染，可做細(xì)胞遺傳學(xué)方面的鑒定，如發(fā)現(xiàn)原有的細(xì)胞遺傳物發(fā)生改變，可以復(fù)蘇早期凍存的細(xì)胞使用。重要細(xì)胞系的傳代工作應(yīng)由兩人獨(dú)立進(jìn)行；無菌室的徹底消毒①新潔爾滅全面徹底擦洗無菌室。使用前應(yīng)稀釋即配即用。新潔爾滅和酒精相比，的優(yōu)點(diǎn)是便宜，而且可以稀釋５０倍用，而同樣量的酒精價(jià)格可能是新潔爾滅的幾十倍。②甲醛熏蒸法：甲醛是一種廣譜滅菌劑菌，其水溶液和氣體對(duì)各種細(xì)菌、芽孢及真菌等微生物均有殺滅作用。甲醛價(jià)廉，熏蒸消毒時(shí)不損壞衣服、家具、皮革、橡膠等。市售的甲醛水溶液中一般含３７－４０%的甲醛。 
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁 
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源 
MC3T3-E1 Subclone 4 小鼠原成骨細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支) 
公司細(xì)胞庫凍存并保種有2300多種各類細(xì)胞系。針對(duì)每種不同的細(xì)胞系，公司摸索并積累了大量細(xì)胞培養(yǎng)條件和優(yōu)化參數(shù)，為您的細(xì)胞實(shí)驗(yàn)保駕護(hù)航。細(xì)胞培養(yǎng)是生命科學(xué)研究中最基礎(chǔ)、也是最常用的實(shí)驗(yàn)手段。從凍存→復(fù)蘇→傳代→實(shí)驗(yàn)，在每一次細(xì)胞培養(yǎng)的過程中我們都是精心呵護(hù)，小心培養(yǎng)，心里都是默默承諾：我要護(hù)你一世周全！可是可是……無數(shù)次細(xì)胞都因污染而離我而去，投入的不只是我們貌美如花的青春，還有那一去不復(fù)返的經(jīng)費(fèi)！在細(xì)胞生物學(xué)，生物化學(xué)，免疫學(xué)，神經(jīng)生物學(xué)，病理學(xué)……只要涉及細(xì)胞的研究領(lǐng)域，都面臨著支原體污染的威脅。在眾多污染物中，也就屬支原體最狡猾了，他最善于隱藏自己，因?yàn)楸恢гw污染的細(xì)胞不會(huì)馬上死亡，但會(huì)改變細(xì)胞的新陳代謝，甚至?xí)淖兗?xì)胞的基因表達(dá)譜，我們就這樣被欺騙了無數(shù)次，誰讓我們就是個(gè)看“顏值”的花癡了?？墒俏覀兺ㄟ^被虐了幾百次的經(jīng)驗(yàn)中總結(jié)出來，當(dāng)你的細(xì)胞出現(xiàn)了這些癥狀時(shí)：生長(zhǎng)速率改變；活性減弱；形態(tài)改變；染色體畸變；轉(zhuǎn)染效率顯著降低；細(xì)胞復(fù)蘇后存活率降低……。那你就得千萬小心了，也許你的細(xì)胞已經(jīng)被支原體欺凌了！ 
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。 
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系 
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁或懸浮，詳見細(xì)胞說明書部分 
MC3T3-E1 Subclone 4 小鼠原成骨細(xì)胞系
細(xì)胞傳代時(shí)消化的問題：可以這樣說，對(duì)于需要消化傳代的細(xì)胞，每一次的消化都是對(duì)這個(gè)細(xì)胞存活與否，狀態(tài)好與不好最至關(guān)重要的考驗(yàn)。很多同學(xué)都遇到過這個(gè)問題，自己養(yǎng)的細(xì)胞開始的幾代長(zhǎng)的還挺好的，可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細(xì)胞，狀態(tài)越來越差勁了。對(duì)于這個(gè)問題，可以非常肯定地說，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細(xì)胞受到較大損傷了。所以，越長(zhǎng)越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細(xì)胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個(gè)問題就是，細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)是不一樣的，每一個(gè)細(xì)胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細(xì)胞消化同樣的時(shí)間對(duì)細(xì)胞是不公平的，他們受到了差別待遇當(dāng)然會(huì)有脾氣啊。我后來對(duì)消化的方法進(jìn)行了改良。爭(zhēng)取做到因材施教呵呵。我稱之為“四步消化法”。（以難消化細(xì)胞為例）；具體操作：１)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗１-２遍，（這是前奏，即為步，目的是將漂浮著的死細(xì)胞之類盡量洗掉。２)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細(xì)胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。即為第二步（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細(xì)胞對(duì)比觀察看誰長(zhǎng)的更好一點(diǎn)就知道該細(xì)胞對(duì)胰酶的敏感度了。）３)吸干凈瓶?jī)?nèi)剩余液體，加入０.３ml左右的胰酶潤(rùn)洗一遍，吸掉棄之，再加入１ml左右的胰酶消化。消化的同時(shí)置于顯微鏡下觀察，待細(xì)胞與細(xì)胞之間間隙明顯的時(shí)候立即吸掉胰酶與干凈子彈頭里備用，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打２-３遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用２ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。（你也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對(duì)比。）這是第三步。４)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進(jìn)去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細(xì)胞。當(dāng)然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，呵呵。繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細(xì)胞間隙明顯，細(xì)胞獨(dú)立開來的時(shí)候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據(jù)實(shí)際情況你自己把握）。這是第四步。其實(shí)還可以有第五步，對(duì)于特別難消化的細(xì)胞和對(duì)胰酶特別敏感的細(xì)胞的話，你可以繼續(xù)加第五步甚至第六步。為了細(xì)胞更好的狀態(tài)，更漂亮的樣子，沒辦法，你必須分多批多次消化，這樣才能限度地將胰酶對(duì)細(xì)胞的損傷降到最低，保證細(xì)胞的狀態(tài)能夠。當(dāng)然了，如果細(xì)胞是屬于那種很容易消化的細(xì)胞，像RAW２６４.７，僅僅第二步就搞定了。就沒必要第三步第四步了。這個(gè)是需要你在實(shí)驗(yàn)中能夠自己用心去體會(huì)的。建議你接受一個(gè)新細(xì)胞時(shí)把各步消化的細(xì)胞分別培養(yǎng)起來做比較，去摸索好細(xì)胞對(duì)胰酶的要求。便于你后續(xù)實(shí)驗(yàn)的開展。將細(xì)胞消化分成這幾步，除了是為了避免胰酶對(duì)細(xì)胞的損傷之外，還有一個(gè)更重要的作用就是，可以程度地把細(xì)胞吹打成單個(gè)單個(gè)的狀態(tài)，不成片不連體。 
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書 
GC-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR 4細(xì)胞、C57/B6-L細(xì)胞、TSCC1細(xì)胞 
RWPE2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8細(xì)胞、DMS 153細(xì)胞、SCLC21H細(xì)胞 
WM-2664細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mahlavu細(xì)胞、SNUC2B細(xì)胞、MDCK supertube細(xì)胞 
LC-1-sq細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RH35細(xì)胞、P30OHK細(xì)胞、Panc_03_27細(xì)胞 
P3 NS1 Ag4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 706.T細(xì)胞、National Medical Center-Glioma 1細(xì)胞、RCC-10細(xì)胞 
A 172細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A427細(xì)胞、BEAS2B細(xì)胞、Tissue Culture-1細(xì)胞 
SKML-28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CT26.CL25細(xì)胞、TE32細(xì)胞、PG13細(xì)胞 
JJN3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DrG細(xì)胞、SK-RC 39細(xì)胞、MiaPaca.2細(xì)胞 
PC-3M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Murine Lung Epithelial-12細(xì)胞、NCIH128細(xì)胞、8226/S細(xì)胞 
U266B1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OV433細(xì)胞、EO771細(xì)胞、OV1063細(xì)胞 
EFM-192C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-33A細(xì)胞、MDAPC2B細(xì)胞、293-H細(xì)胞 
SUM-190PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-F1細(xì)胞、Calu-1細(xì)胞、CWR22-R1細(xì)胞 
X63Ag8-653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCMEC(BL12-H)細(xì)胞、HCCLM3細(xì)胞、GNM細(xì)胞 
FC33細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MonoMac1細(xì)胞、HEK-A細(xì)胞、AM38細(xì)胞 
AR4IP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：D341 Med細(xì)胞、IEC 6細(xì)胞、SUDHL-16細(xì)胞 
SU-DHL6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuT78細(xì)胞、NCI-H661細(xì)胞、IOSE-29細(xì)胞 
A704細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VP229細(xì)胞、HFLS細(xì)胞、Hs606細(xì)胞 
CA-46細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B-95-8細(xì)胞、Daoy細(xì)胞、9L細(xì)胞 
UMNSAH/DF-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCM-460細(xì)胞、NCIH1666細(xì)胞、H-1993細(xì)胞 
HL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EM-3細(xì)胞、KU-812F細(xì)胞、Human Foreskin Fibroblast細(xì)胞 
MC3T3-E1 Subclone 4 小鼠原成骨細(xì)胞系
H2330細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MeT-5A細(xì)胞、OEC19細(xì)胞、hTERTHME1細(xì)胞 
MRASMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tohoku Hospital Pediatrics-1細(xì)胞、EC9706細(xì)胞、CCD-18Co細(xì)胞 
BRL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293細(xì)胞、LAD 2細(xì)胞、Hs 445細(xì)胞 
SUM-159細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1341細(xì)胞、HS5細(xì)胞、JurkatE6-1細(xì)胞 
LM6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NFS 60細(xì)胞、NCI-H735細(xì)胞、P30-OHKUBO細(xì)胞 
SUPB15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SN12C-PM6細(xì)胞、HRPEpiC細(xì)胞、A 2058細(xì)胞 
GB-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DLD-1細(xì)胞、RPVSMC細(xì)胞、MOLT3細(xì)胞 
JeKo 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPAF-2細(xì)胞、TE-8細(xì)胞、hOMF細(xì)胞 
MBVP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-16細(xì)胞、Human Corneal Endothelial Cells-12細(xì)胞、SK-N-DZ細(xì)胞 
TE 32細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pro-5 Lec1.3c細(xì)胞、T-ALL 1細(xì)胞、NCI-H23細(xì)胞 
CW2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Epstein-Barr-2細(xì)胞、MJ細(xì)胞、HS 683T細(xì)胞 
KLM1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EU-4細(xì)胞、ESC-410細(xì)胞、NCIH2110細(xì)胞 
Hs 729.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-820細(xì)胞、KYSE-50細(xì)胞、WM115mel細(xì)胞 
TK-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TM3細(xì)胞、PC-3M細(xì)胞、GLC-15細(xì)胞 
Lymph Node Carcinoma of the prostate細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1623細(xì)胞、H-719細(xì)胞、OVSAHO細(xì)胞 
NOR10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-387細(xì)胞、SL-29細(xì)胞、UM-UC14細(xì)胞 
P3.NS-1/1.Ag4.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BJAB細(xì)胞、SKUT1細(xì)胞、B16F1細(xì)胞 
C3H10T1/2CL8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNFI細(xì)胞、TE-15細(xì)胞、H-2073細(xì)胞 
Human ErythroLeukemia細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EBC-1細(xì)胞、LAN6細(xì)胞、GM3570細(xì)胞 
UPCI:SCC090細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：alpha-TC1.6細(xì)胞、HP615細(xì)胞、EFM-19細(xì)胞 
VMM5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NuTu 19細(xì)胞、HCC9724細(xì)胞、EM3細(xì)胞 
Hs.27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-526細(xì)胞、Hs 578Bst細(xì)胞、Nb 2細(xì)胞 
CAKI 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI Ly10細(xì)胞、MILE SVEN1細(xì)胞、RC-4B/C細(xì)胞 
SUDHL8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI Ly19細(xì)胞、N1E115細(xì)胞、GM05887細(xì)胞 
NCI-HUT-69細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKUT1細(xì)胞、Karpas 299細(xì)胞、H596細(xì)胞 
NCIH1770細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：J45.01細(xì)胞、293 F細(xì)胞、Kasumi 1細(xì)胞 
Hs 636 T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNG-M細(xì)胞、Hs.27細(xì)胞、A-101D細(xì)胞 
HTori3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM637A細(xì)胞、MDA330細(xì)胞、P30/Ohkubo細(xì)胞 
SCC7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Douglas Foster-1細(xì)胞、ASH3細(xì)胞、Balb/3T3-4-Cl31細(xì)胞 
ML2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HARA-B細(xì)胞、H-526細(xì)胞、SGC996細(xì)胞 
HCCLM3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HAEC細(xì)胞、Panc_03_27細(xì)胞、EB-3細(xì)胞 
C2A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HaCaT細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-435細(xì)胞、Hs445細(xì)胞 
U-343 MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MGH-U3 (RN)細(xì)胞、H735細(xì)胞、H1385細(xì)胞 
Walker256細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1993細(xì)胞、kms 11細(xì)胞、624mel細(xì)胞 
OCI-Ly8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FRTL5細(xì)胞、LCMS細(xì)胞、NCI-H69細(xì)胞 
YD-38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H64細(xì)胞、293-FT細(xì)胞、MS 751細(xì)胞 
ACHN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCV 29細(xì)胞、BrCL18細(xì)胞、MDA-MB-468細(xì)胞 
HUVEC-C[HUVEC]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：N1S1細(xì)胞、M-07e細(xì)胞、Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D細(xì)胞 
OC-316細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ZR75_1細(xì)胞、HT-115細(xì)胞、alpha-TC1.6細(xì)胞 
Mono-Mac-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ssMCF7細(xì)胞、ATC241細(xì)胞、Normal Rat Kidney細(xì)胞 
TFK1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ID8細(xì)胞、H520細(xì)胞、HCC1143細(xì)胞 
MC3T3-E1 Subclone 4 小鼠原成骨細(xì)胞系
RMS 13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1793細(xì)胞、EBC1細(xì)胞、LC-1Sq細(xì)胞 
LS-411N細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：N-87細(xì)胞、H1648細(xì)胞、MESSA細(xì)胞 
CCD 841 CoN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUD4細(xì)胞、DF-1細(xì)胞、GM05887A細(xì)胞 
MSTO-211H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-748細(xì)胞、Bx-PC3細(xì)胞、ECGI10細(xì)胞 
SHEP1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKRC-39細(xì)胞、Panc-08.13細(xì)胞、Hs940T細(xì)胞 
D-341Med細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MT2細(xì)胞、hTERT-HPNE細(xì)胞、RPMI #8226細(xì)胞 
UMR-106細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NK 10a細(xì)胞、T8細(xì)胞、HOS-TE85細(xì)胞 
TGW細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Clone Y-1細(xì)胞、ARO細(xì)胞、RCC-JF細(xì)胞 
MLMA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H727細(xì)胞、COLO-16細(xì)胞、SW1417細(xì)胞 
Anip[973]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16BL6細(xì)胞、PNT-1A細(xì)胞、GTL16細(xì)胞 
MS1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1522細(xì)胞、GM05372E細(xì)胞、PTK 2細(xì)胞 
WM-2664細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mahlavu細(xì)胞、PAI細(xì)胞、GM00215A細(xì)胞 
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