"COLO 738 人胸腔積液惡性纖維組織細胞系
細胞背景資料：詳見相關文獻介紹 
細胞形態(tài)：上皮細胞樣 
細胞培養(yǎng)方面注意的幾點：無菌意識要強：實驗進行前，超凈臺以紫外燈照射３０分鐘滅菌，以７０%ethanol擦拭無菌操作抬面，并開啟超凈工作臺風扇運轉(zhuǎn)數(shù)分鐘后，才開始實驗操作。每次操作只處理一株細胞株，以避免失誤混淆或細胞間污染。實驗完畢后，將實驗物品帶出工作臺，以７０%ethanol擦拭無菌操作抬面。無菌操作工作區(qū)域應保持清潔及寬敞，必要物品，例如支架、吸管等公用物品可以暫時放置，其它個人實驗用品用完應立即拿出。實驗用品以７０%乙醇擦拭后才帶入無菌操作臺內(nèi)。實驗操作應在中央無菌區(qū)域，一般勿在邊緣區(qū)域操作。小心取用無菌之實驗物品，避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或是容器瓶口，亦不要在打開之容器正上方操作實驗。容器打開后，以手夾住瓶蓋并握住瓶身，傾斜約４５°角取用，盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。選擇正確的培養(yǎng)基：不同的細胞可能培養(yǎng)基不同，甚至不同的文獻可能對相同的細胞培養(yǎng)基成分也是可能不同的。如我當時培養(yǎng)神經(jīng)干細胞，有文獻就選用neurobase培養(yǎng)基，而我的實驗目的主要是做抗氧化和氧化方面的，而這種培養(yǎng)基中含有抗氧化劑成分，此時，我就不得不選擇另外一種不含抗氧化劑的培養(yǎng)基。瓶裝血清一定要逐步解凍:４℃冰箱全溶后再分裝，在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沉淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀。熱滅活是指５６℃，３０分鐘加熱已完全解凍之血清。水浴鍋升到５６℃后，將血清放入，待溫度升高到５６℃后計時，一般５分鐘左右規(guī)則搖晃均勻一次。此熱處理之目的是使血清中之補體成份去活化。除非必須，一般不要作此熱處理，因為會造成沉淀物之顯著增多，且會影響血清之品質(zhì)。注意更換新血清(包括不同批次)對細胞的影響。 
細胞生長：貼壁 
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源 
COLO 738 人胸腔積液惡性纖維組織細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支) 
凍存和復蘇的原則：慢凍快融》當細胞冷到零度以下，可以產(chǎn)生以下變化：細胞器脫水，細胞中可溶性物質(zhì)濃度升高，并在細胞內(nèi)形成冰晶。如果緩慢冷凍，可使細胞逐步脫水，細胞內(nèi)不致產(chǎn)生大的冰晶；相反，結(jié)晶就大，大結(jié)晶會造成細胞膜、綱胞器的損傷和破裂。復蘇過程應快融，目的是防止小冰晶形成大冰晶，即冰晶的重結(jié)晶。慢凍程序》1.標準程序：采用細胞凍存器》當溫度在-25℃以上時，1~2℃/min；當溫度達-25℃以下時，5~10℃/min；當溫度達-100℃時，可迅速放入液氮中。2.簡易程序：將冷凍管（管口要朝上）放入紗布袋內(nèi)，紗布袋系以線繩，通過線繩將紗布袋固定于液氮罐罐口，按每分鐘溫度下降1~2℃的速度，在40min內(nèi)降至液氮表面過夜，次晨投人液氮中。3.傳統(tǒng)程序：冷凍管置于4℃10分鐘→-20℃30分鐘→-80℃16~18小時（或隔夜）→液氮槽長期儲存。細胞凍存方法：1.預先配制凍存液》（1）8%DMSO+細胞生長液（92%血清）2.取對數(shù)生長期細胞，經(jīng)胰酶消化后，加入適量凍存液，用吸管吹打制成細胞懸液（1×10(6)~5×10(6)細胞/ml）。3.加入1ml細胞于凍存管中，密封后標記冷凍細胞名稱和冷凍日期。液氮長期保存。保存細胞的復蘇方法：1.快速解凍》凍存細胞從液氮中取出后，立即放入37℃水浴中，輕輕搖動冷凍管，使其在1分鐘內(nèi)全部融化（不要超過3分鐘）。2.解凍后的細胞可直接接種到含完全生長培養(yǎng)液的細胞培養(yǎng)瓶中直接進行培養(yǎng)，24小時后再用新鮮完全培養(yǎng)液替換舊培養(yǎng)液，以去除DMSO。3.如果細胞對冷凍保護劑特別敏感解凍后的細胞應先通過離心去除冷凍保護劑，然后再接種到含完全生長培養(yǎng)液的培養(yǎng)瓶中。 
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。 
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 
細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分 
COLO 738 人胸腔積液惡性纖維組織細胞系
細胞培養(yǎng)實驗相關問題總結(jié)：支原體(mycoplasma)污染的細胞，是否能以肉眼觀察出異狀？不能。除極有經(jīng)驗之專家外，大多數(shù)遭受支原體污染的細胞株，無法以其外觀分辨之；支原體污染會對細胞培養(yǎng)有何影響？支原體污染幾乎可影響所有細胞之生長參數(shù)，代謝及研究之任一數(shù)據(jù)。故進行實驗前，必須確認細胞為mycoplasma-free，實驗結(jié)果之數(shù)據(jù)方有意義；偵測出細胞株有支原體污染時，該如何處理？直接滅菌后丟棄，以避免污染其它細胞株；CO２培養(yǎng)箱之水盤如何保持清潔？定期(至少每兩周一次) 以無菌蒸餾水或無菌去離子水更換之；為何培養(yǎng)基保存于４°C冰箱中，顏色會偏暗紅色，且pH值會越來越偏堿性？培養(yǎng)基保存于４°C冰箱中，培養(yǎng)基內(nèi)之CO２會逐漸溢出，造成培養(yǎng)基越來越偏堿性。而培養(yǎng)基中之酸堿指示劑(通常為phenol red)的顏色也會隨堿性增加而更偏暗紅。培養(yǎng)基偏堿之結(jié)果，將造成細胞生長停滯或死亡。若培養(yǎng)基偏堿時，可以通入無菌過濾之CO２，以調(diào)整pH值；購買之細胞冷凍管經(jīng)解凍后，為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形？研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少，大都是因為離心過程操作上的失誤，造成細胞的物理性損傷，以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心，應待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可；購買之細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因？研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳，常見原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后，加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–８０°C太久；收到之冷凍管瓶身破裂，瓶蓋有裂紋，或瓶蓋脫落之原因？冷凍管瓶蓋裂紋，或瓶身破裂，可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當，造成冷凍管裂損，建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫，乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象，冷凍管有可能因此而造成細胞污染，故冷凍管于放入和取出液氮桶時，均應立刻將冷凍管再一次扭緊。 
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書 
H-157細胞系相關產(chǎn)品：U266 B1細胞、NCI-H1876細胞、Panc10.05細胞 
Tadarida brasiliensis 1 lung細胞系相關產(chǎn)品：JCA-1細胞、SCC15細胞、P30/OHK細胞 
Baby Hamster Kidney-21細胞系相關產(chǎn)品：UMC-11細胞、SW527細胞、HCC4006細胞 
HUC-1細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H187細胞、Astrocyte type I clone細胞、TE-12細胞 
SW579細胞系相關產(chǎn)品：Human ErythroLeukemia細胞、HS766T細胞、Ej138細胞 
P-3J細胞系相關產(chǎn)品：TE14細胞、NCI-H1944細胞、VMCUB-1細胞 
MNNG細胞系相關產(chǎn)品：I90細胞、Clone 929細胞、SW 839細胞 
P30/Ohkubo細胞系相關產(chǎn)品：OVCAR 433細胞、SUM 149細胞、CEM T4細胞 
CX1細胞系相關產(chǎn)品：RH7777細胞、SW 1417細胞、H-716細胞 
786O細胞系相關產(chǎn)品：OCI-Ly 1細胞、NCI/ADR-RES細胞、NCI-H441-4細胞 
H2.35細胞系相關產(chǎn)品：LNT-229細胞、CCD1112Sk細胞、Karpas 299細胞 
Nb-2細胞系相關產(chǎn)品：C666-1細胞、SK MEL 5細胞、CL40細胞 
TGW細胞系相關產(chǎn)品：Clone Y-1細胞、ARO細胞、RCC-JF細胞 
DHBE細胞系相關產(chǎn)品：SW900細胞、Suzhou Human Glioma-44細胞、Hep 3B2_1-7細胞 
Embryonic Bovine Tracheal cells細胞系相關產(chǎn)品：NCM460細胞、HNE2細胞、DMS 153細胞 
CEM-C1細胞系相關產(chǎn)品：Reuber H35細胞、AG06814-J細胞、Hs 729細胞 
CEM-C1細胞系相關產(chǎn)品：Reuber H35細胞、AG06814-J細胞、Hs 729細胞 
Human Embryo Kidney-2細胞系相關產(chǎn)品：U-251-MG細胞、JROECL 21細胞、C-26細胞 
MKN 7細胞系相關產(chǎn)品：MCAEC細胞、COR-L279細胞、JEG-3細胞 
130 T細胞系相關產(chǎn)品：H2106細胞、3396細胞、MDAMB231細胞 
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SKMEL5細胞系相關產(chǎn)品：C57 Mouse Tumor 93細胞、PC-3M-1E8細胞、293-EBNA1細胞 
LMH細胞系相關產(chǎn)品：SAOS 2細胞、Madin-Darby Canine Kidney細胞、NCI-H920細胞 
NH-6細胞系相關產(chǎn)品：SKNBE-2細胞、HS0578T細胞、SK-MES1細胞 
EU-4細胞系相關產(chǎn)品：FUOV1細胞、ZYM-DIEC02細胞、HEK-293F細胞 
HT1197細胞系相關產(chǎn)品：190PT細胞、MKN1細胞、A-375細胞 
WRL68細胞系相關產(chǎn)品：D-283細胞、H-2107細胞、LC-2/ad細胞 
NOK細胞系相關產(chǎn)品：Biologics Standards-Cercopithecus-1細胞、RPMI 1846細胞、DoHH2細胞 
BMDC細胞系相關產(chǎn)品：KGN細胞、AHH-1細胞、MDA MB 231細胞 
MES-SA Dx5細胞系相關產(chǎn)品：Hs294細胞、HSC6細胞、C-33 A細胞 
KP2細胞系相關產(chǎn)品：Hs832.Tc細胞、PAa細胞、NRCC細胞 
SLK細胞系相關產(chǎn)品：SUM-52-PE細胞、SK_N_BE2C細胞、CAMA細胞 
PBMC細胞系相關產(chǎn)品：kms 11細胞、LLC-MK-2細胞、526-mel細胞 
HCT-GEO細胞系相關產(chǎn)品：SF 126細胞、H460細胞、NALM6細胞 
FHs 74 Int細胞系相關產(chǎn)品：KPL1細胞、H-510細胞、HEC-251細胞 
Vero 76細胞系相關產(chǎn)品：SK-N-BE(1)細胞、HM細胞、PG-4 S+L-細胞 
GM 2132細胞系相關產(chǎn)品：GM04154B細胞、GI-1細胞、EFM-192A細胞 
Hs 604.T細胞系相關產(chǎn)品：H2073細胞、L(TK-)細胞、U266-B1細胞 
RINm-5F細胞系相關產(chǎn)品：Capan-2細胞、NCIH1781細胞、hs 68細胞 
H-28細胞系相關產(chǎn)品：NCIH2126細胞、NCI-H2228細胞、UACC-812細胞 
SK_N_BE2C細胞系相關產(chǎn)品：MSTO-211 H細胞、NCI-H865細胞、NCIH2126細胞 
J 774A.1細胞系相關產(chǎn)品：Panc4.03細胞、SKCol1細胞、KBM-5細胞 
RT112細胞系相關產(chǎn)品：RS4;11細胞、P 815細胞、HaCaT細胞 
Turbot Embryonic Cell line細胞系相關產(chǎn)品：RAOEC細胞、SKNEP細胞、Caco-2/BBe細胞 
H-1385細胞系相關產(chǎn)品：WIL2 Secreting細胞、H125細胞、Bat lung細胞 
NCI-H322細胞系相關產(chǎn)品：CEM-T4細胞、MCA205細胞、BT 20細胞 
Tu-686細胞系相關產(chǎn)品：HEK-AD 293細胞、Tohoku Hospital Pediatrics-1細胞、ROS 17/2.8細胞 
BOWES細胞系相關產(chǎn)品：T 24細胞、MDA 435細胞、3T3-A31細胞 
NCIH548細胞系相關產(chǎn)品：COLO 679細胞、HGC27細胞、NCI-H838細胞 
NCI-H1355細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H1618細胞、COLO-1細胞、T 24細胞 
NCI-H1105細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H1694細胞、RKO-E6細胞、Sup T-1細胞 
Neuro2a細胞系相關產(chǎn)品：DKMG細胞、IPAM-WT細胞、H-1651細胞 
MC3T3, E1 subgroup-4 clone細胞系相關產(chǎn)品：Ketr-3細胞、HAPI細胞、C-6細胞 
NTC-200細胞系相關產(chǎn)品：Panc-05.04細胞、MDAMB-231細胞、K7M2 wt細胞 
PCI-4M細胞系相關產(chǎn)品：hTERT RPE1細胞、52PE細胞、WM451Lu細胞 
RPMI2650細胞系相關產(chǎn)品：H747細胞、HEC-1-A細胞、HS688AT細胞 
CAL 62細胞系相關產(chǎn)品：NTC200細胞、TB1 Lu細胞、SP2-0-Ag14細胞 
IPLB-SF 21AE細胞系相關產(chǎn)品：SKO3細胞、Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2細胞、HCC-2108細胞 
Panc-03.27細胞系相關產(chǎn)品：COLO 320F細胞、NKT細胞、B16-BL6細胞 
AMJ2C8細胞系相關產(chǎn)品：Capan 2細胞、BE2C細胞、X63-Ag 8.6.5.3細胞 
H-650細胞系相關產(chǎn)品：LCLC103H細胞、ARO 81-1細胞、AtT 20細胞 
HGC-27細胞系相關產(chǎn)品：FLS細胞、H510細胞、Roswell Park Memorial Institute 7951細胞 
COLO 738 人胸腔積液惡性纖維組織細胞系
BT 549細胞系相關產(chǎn)品：DU4475細胞、HS-729細胞、Mouse podocyte細胞 
SUM-102PT細胞系相關產(chǎn)品：MZCRC1細胞、UWB1289細胞、D283細胞 
MESSA/Dx5細胞系相關產(chǎn)品：KM12-SM細胞、HLEC-B3細胞、MEG01細胞 
PCI-4.2細胞系相關產(chǎn)品：CWR22-R1細胞、D-283細胞、DMS114細胞 
NALM-6-M1細胞系相關產(chǎn)品：HCC-15細胞、KRCY細胞、LAD 2細胞 
HO1-N-1細胞系相關產(chǎn)品：143TK-細胞、NCIH847細胞、YD15細胞 
OVCAR4細胞系相關產(chǎn)品：PL45細胞、Duke University 145細胞、H-2195細胞 
WSU-DLCL2細胞系相關產(chǎn)品：RL-95-2細胞、MIO-M1細胞、CEM/C1細胞 
HEK-AD293細胞系相關產(chǎn)品：KASUMI1細胞、ROS1728細胞、LA-N-5細胞 
M1細胞系相關產(chǎn)品：VM-CUB-1細胞、PC3M-2B4細胞、HT-3細胞 
BC-019細胞系相關產(chǎn)品：OVCAR 8細胞、MDAMB175細胞、SCL I細胞 
Baby Hamster Kidney-21細胞系相關產(chǎn)品：UMC-11細胞、OCI-AML-3細胞、H196細胞 
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