"B16-F0 小鼠黑色素瘤細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹 
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣 
細(xì)胞傳代培養(yǎng)的胰酶消化法：傳代培養(yǎng)：是指細(xì)胞從一個(gè)培養(yǎng)瓶以１：２或１：２以上的比例轉(zhuǎn)移，接種到另一培養(yǎng)瓶的培養(yǎng)。傳代細(xì)胞，可根據(jù)不同細(xì)胞采取不同的方法進(jìn)行細(xì)胞傳代。貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞用消化法傳代，部分貼壁的細(xì)胞用直接吹打或用硅膠軟刮的刮除法傳代。懸浮細(xì)胞可采用加入等量新鮮培養(yǎng)基后直接吹打分散進(jìn)行傳代，或用自然沉降法加入新培養(yǎng)基后再吹打分散進(jìn)行傳代。實(shí)驗(yàn)步驟：①入無(wú)菌室之前用肥皂洗手，再用７５% 的酒精擦拭消毒雙手；②倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)，確定細(xì)胞是否傳代及細(xì)胞需要稀釋的倍數(shù)。將培養(yǎng)用液３７℃下預(yù)熱；③超凈臺(tái)臺(tái)面應(yīng)整潔，用７５%酒精棉球擦拭清潔；④打開超凈工作臺(tái)的紫外燈照射臺(tái)面２０min左右，關(guān)閉紫外燈，打開風(fēng)機(jī)清潔空氣除去臭氧；⑤點(diǎn)燃酒精燈;取出無(wú)菌試管，巴士德吸管和刻度吸管;安上橡皮頭;過酒精燈火焰略燒后插在無(wú)菌試管內(nèi)；⑥將培養(yǎng)用液瓶口用７５%酒精消毒，過酒精燈火焰后斜置于酒精燈旁的架子上；⑦倒掉培養(yǎng)細(xì)胞的舊培養(yǎng)基。酌情可用２-３ml Hanks液洗去殘留的就培養(yǎng)基，或用少量胰酶涮洗一下；⑧每個(gè)大培養(yǎng)瓶加入１ml胰酶，小培養(yǎng)瓶用量酌減，蓋好瓶蓋后在倒置顯微鏡下觀察。當(dāng)細(xì)胞收回突起變圓時(shí)立即翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶，使細(xì)胞脫離胰酶，然后將胰酶倒掉。注意勿使細(xì)胞提早脫落入消化液中；⑨加入少量的含血清的新鮮培養(yǎng)基，反復(fù)吹打消化好的細(xì)胞使其脫壁并分散，再根據(jù)分傳瓶數(shù)補(bǔ)加一定量的含血清的新鮮培養(yǎng)基(７-１０ml/大瓶;３-５ml/小瓶)制成細(xì)胞懸液，然后分裝到新培養(yǎng)瓶中。蓋好瓶蓋，適度擰緊后稍回轉(zhuǎn)，以利于CO２的進(jìn)入，將培養(yǎng)瓶放回CO２培養(yǎng)箱；⑩對(duì)懸浮培養(yǎng)細(xì)胞，步驟７-９不做。直接將細(xì)胞懸液進(jìn)行離心去除舊培養(yǎng)基上清，加入新鮮培養(yǎng)基，然后分裝到各瓶中。 
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁 
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源 
B16-F0 小鼠黑色素瘤細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支) 
貼壁細(xì)胞傳代實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備事項(xiàng)：將15mL離心管、T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶、PBS緩沖液、移液管、電動(dòng)移液器等物品提前放入生物安全柜中，紫外照射30min消毒滅菌；細(xì)胞完全培養(yǎng)基、0.25%胰酶-0.02%EDTA從4℃冰箱中取出后，復(fù)溫至室溫，備用。貼壁細(xì)胞傳代實(shí)驗(yàn)步驟：將準(zhǔn)備好的培養(yǎng)基等物品用酒精消毒后放入安全柜中；從培養(yǎng)箱中取出待處理的細(xì)胞，在顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)；用酒精消毒培養(yǎng)瓶，放入安全柜中；輕輕吸去細(xì)胞上清；加入2~3ml(PBS緩沖液)潤(rùn)洗一次，吸去上清；加入1mL(0.25%胰酶-0.02%EDTA)，輕輕晃勻、覆蓋所有細(xì)胞后，置于37℃培養(yǎng)箱靜置消化；消化1min左右，在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況；消化完全后，加3ml完全培養(yǎng)基終止；按比例將細(xì)胞懸液分裝至培養(yǎng)瓶中；在顯微鏡下觀察傳代后的細(xì)胞密度及狀態(tài)；將培養(yǎng)瓶放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。注意事項(xiàng)：培養(yǎng)過程中需維持細(xì)胞處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期，80%左右即可傳代，傳代比例請(qǐng)參照說明書建議；消化時(shí)間不宜過長(zhǎng)，大部分細(xì)胞回縮變圓并有少量細(xì)胞脫落即可中止消化，難消化的細(xì)胞可分次消化，每次時(shí)間不超過5min；培養(yǎng)過程中需要定期換液，一般細(xì)胞建議2~3天換液一次。 
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。 
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系 
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁或懸浮，詳見細(xì)胞說明書部分 
B16-F0 小鼠黑色素瘤細(xì)胞系
細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)相關(guān)問題總結(jié)：支原體(mycoplasma)污染的細(xì)胞，是否能以肉眼觀察出異狀？不能。除極有經(jīng)驗(yàn)之專家外，大多數(shù)遭受支原體污染的細(xì)胞株，無(wú)法以其外觀分辨之；支原體污染會(huì)對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)有何影響？支原體污染幾乎可影響所有細(xì)胞之生長(zhǎng)參數(shù)，代謝及研究之任一數(shù)據(jù)。故進(jìn)行實(shí)驗(yàn)前，必須確認(rèn)細(xì)胞為mycoplasma-free，實(shí)驗(yàn)結(jié)果之?dāng)?shù)據(jù)方有意義；偵測(cè)出細(xì)胞株有支原體污染時(shí)，該如何處理？直接滅菌后丟棄，以避免污染其它細(xì)胞株；CO２培養(yǎng)箱之水盤如何保持清潔？定期(至少每?jī)芍芤淮? 以無(wú)菌蒸餾水或無(wú)菌去離子水更換之；為何培養(yǎng)基保存于４°C冰箱中，顏色會(huì)偏暗紅色，且pH值會(huì)越來越偏堿性？培養(yǎng)基保存于４°C冰箱中，培養(yǎng)基內(nèi)之CO２會(huì)逐漸溢出，造成培養(yǎng)基越來越偏堿性。而培養(yǎng)基中之酸堿指示劑(通常為phenol red)的顏色也會(huì)隨堿性增加而更偏暗紅。培養(yǎng)基偏堿之結(jié)果，將造成細(xì)胞生長(zhǎng)停滯或死亡。若培養(yǎng)基偏堿時(shí)，可以通入無(wú)菌過濾之CO２，以調(diào)整pH值；購(gòu)買之細(xì)胞冷凍管經(jīng)解凍后，為何會(huì)發(fā)生細(xì)胞數(shù)目太少之情形？研究人員在冷凍細(xì)胞之培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)細(xì)胞數(shù)目太少，大都是因?yàn)殡x心過程操作上的失誤，造成細(xì)胞的物理性損傷，以及細(xì)胞流失。建議細(xì)胞解凍后不要立刻離心，應(yīng)待細(xì)胞生長(zhǎng)隔夜后再更換培養(yǎng)基即可；購(gòu)買之細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因？研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)存活率不佳，常見原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯(cuò)誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯(cuò)誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯(cuò)誤。冷凍細(xì)胞解凍后，加以洗滌細(xì)胞和離心。懸浮細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞。培養(yǎng)溫度使用錯(cuò)誤。細(xì)胞置于–８０°C太久；收到之冷凍管瓶身破裂，瓶蓋有裂紋，或瓶蓋脫落之原因？冷凍管瓶蓋裂紋，或瓶身破裂，可能是因?yàn)椴僮髡邐A取冷凍管時(shí)用力不當(dāng)，造成冷凍管裂損，建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動(dòng)或松脫，乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象，冷凍管有可能因此而造成細(xì)胞污染，故冷凍管于放入和取出液氮桶時(shí)，均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。 
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書 
CMK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS-411細(xì)胞、CV-1細(xì)胞、NCI-H128細(xì)胞 
Med 341細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：373MG細(xì)胞、HG2855細(xì)胞、U-87 MG細(xì)胞 
GM00215A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOSEpiC細(xì)胞、H2122細(xì)胞、GM02219D細(xì)胞 
JurkatE6-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Walker-256-TC細(xì)胞、NR8383.1細(xì)胞、28SC細(xì)胞 
HELF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BAR-T細(xì)胞、MBT-2細(xì)胞、CAL-120細(xì)胞 
SW-780細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-251 MG細(xì)胞、Kasumi 1細(xì)胞、ID8細(xì)胞 
MIA-Pa-Ca-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：451-LU細(xì)胞、JEG-3細(xì)胞、Panc 08.13細(xì)胞 
Capan 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAOV3細(xì)胞、BHP 10-3細(xì)胞、NCI-SNU-5細(xì)胞 
Walker256細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1993細(xì)胞、kms 11細(xì)胞、624mel細(xì)胞 
H-650細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LCLC103H細(xì)胞、ARO 81-1細(xì)胞、AtT 20細(xì)胞 
Capan-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1341細(xì)胞、NOR 10細(xì)胞、NG10815細(xì)胞 
MC-3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CESS細(xì)胞、A-172MG細(xì)胞、RFL 6細(xì)胞 
MDA-MB-453細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2444細(xì)胞、C57 Mouse Tumor 64細(xì)胞、HS-729細(xì)胞 
RGM1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C1R細(xì)胞、HT-29細(xì)胞、SKMel-28細(xì)胞 
Mv.1.Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：YAC細(xì)胞、BC-027細(xì)胞、LICCF細(xì)胞 
HCC-827細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF-7B細(xì)胞、NCI-H1341細(xì)胞、SW 527細(xì)胞 
HCC-827細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF-7B細(xì)胞、NCI-H1341細(xì)胞、SW 527細(xì)胞 
KMM-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF12F細(xì)胞、RPMI 2650細(xì)胞、CCRFCEM細(xì)胞 
EVSAT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MB49細(xì)胞、HCC0044細(xì)胞、PVEC細(xì)胞 
DHL-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTHY-ORI3.1細(xì)胞、Panc-813細(xì)胞、H2110細(xì)胞 
B16-F0 小鼠黑色素瘤細(xì)胞系
OsACL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Instituto Biologico-Rim Suino-2細(xì)胞、LU65細(xì)胞、SUM-159-PT細(xì)胞 
HFB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU484細(xì)胞、SUSM-1細(xì)胞、BA/F3細(xì)胞 
HEK-293A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ECV-304細(xì)胞、U-373 MG細(xì)胞、KPL-4細(xì)胞 
MC 3T3-E1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUNE1細(xì)胞、WBF344細(xì)胞、OE19細(xì)胞 
SKNDZ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：751-NA-15細(xì)胞、HCC366細(xì)胞、PFSK-1細(xì)胞 
MDA MB 175 VII細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5細(xì)胞、H-1623細(xì)胞、TO 175.T細(xì)胞 
KYSE-450細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MHHCALL2細(xì)胞、LA-N-1細(xì)胞、SW480細(xì)胞 
OB2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lieming Xu-2細(xì)胞、OCI/AML4細(xì)胞、A2780細(xì)胞 
TI-73細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hep 3B2.1-7細(xì)胞、KS-SLK細(xì)胞、P3J.HR1K細(xì)胞 
MUTZ-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1915細(xì)胞、NCIH1734細(xì)胞、DV-90細(xì)胞 
SKUT-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-498細(xì)胞、Kit225細(xì)胞、Ra #1細(xì)胞 
NCI-H2172細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pt K1細(xì)胞、NPC-TW 039細(xì)胞、Detroit 562細(xì)胞 
KU1919細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC9細(xì)胞、NMC-G1細(xì)胞、Panc 04.03細(xì)胞 
NK-10A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：X63細(xì)胞、EFO 27細(xì)胞、LL/2(LLc1)細(xì)胞 
IOSE-Van細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VM Cub 1細(xì)胞、Potorous tridactylus Kidney 1細(xì)胞、HMO6細(xì)胞 
JCA-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTC-200細(xì)胞、H-1975細(xì)胞、Fox/NY細(xì)胞 
H1672細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MIHA細(xì)胞、H-1437細(xì)胞、HS-695T細(xì)胞 
KMS-26細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ARH-77細(xì)胞、H-2110細(xì)胞、HME1細(xì)胞 
WEHI231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LICR-HN6細(xì)胞、McA-RH 7777細(xì)胞、VMRC-RCZ細(xì)胞 
MDA-468細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOC-1細(xì)胞、SO-Rb 50細(xì)胞、TCCPAN2細(xì)胞 
MN-60細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Wien133細(xì)胞、H-838細(xì)胞、HCC1599細(xì)胞 
H35細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OV 2008細(xì)胞、6T-CEM細(xì)胞、OVCAR8細(xì)胞 
bEND.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ATDC5細(xì)胞、KP-N-NS細(xì)胞、HES [Human embryonic skin fibroblast]細(xì)胞 
H1618細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-12細(xì)胞、TCMK-1細(xì)胞、H810細(xì)胞 
SK-MEL 28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NS1-Ag4細(xì)胞、OSC19細(xì)胞、IHC-ST1細(xì)胞 
DMS-114細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB-231細(xì)胞、253J細(xì)胞、293AD細(xì)胞 
A 375細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 746T細(xì)胞、MCF-7/ADR細(xì)胞、451Lu細(xì)胞 
LM TK negative細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW1088細(xì)胞、P3J細(xì)胞、HR1K細(xì)胞 
VP303細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Huh-7細(xì)胞、COLO 205細(xì)胞、MOLP-8細(xì)胞 
MCF7-GFP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3/NS-1細(xì)胞、SW 1353細(xì)胞、CCRF-CEM C1細(xì)胞 
52PE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc04.03細(xì)胞、BT-20細(xì)胞、Instituto Biologico-Rim Suino-2細(xì)胞 
H.Ep. No. 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RBL 2H3細(xì)胞、Immortalized Human Hepatocytes細(xì)胞、OVCAR8/ADR細(xì)胞 
293S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CL-34細(xì)胞、LC1sq細(xì)胞、RBL-2H3細(xì)胞 
SuDHL 5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 578.Bst細(xì)胞、LS-411細(xì)胞、ChaGo K-1細(xì)胞 
786O細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly 1細(xì)胞、NCI/ADR-RES細(xì)胞、NCI-H441-4細(xì)胞 
H522細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUASMC細(xì)胞、JHH-2細(xì)胞、Daudi細(xì)胞 
H-358細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-3M細(xì)胞、H-2126細(xì)胞、MG-63細(xì)胞 
102PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMH2細(xì)胞、COLO 16細(xì)胞、C2C12細(xì)胞 
NCI-H1819細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2110細(xì)胞、KYSE 510細(xì)胞、CNE1細(xì)胞 
U-hth74細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MEL-526細(xì)胞、HuT-78細(xì)胞、P3HR1細(xì)胞 
H-1522細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KNS-42細(xì)胞、CAL-78細(xì)胞、Hs 766.T細(xì)胞 
B16-F0 小鼠黑色素瘤細(xì)胞系
L5178-R細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Karpas-299細(xì)胞、GM3190細(xì)胞、P3X63-Ag8.653細(xì)胞 
P388-D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCL-I細(xì)胞、SU8686細(xì)胞、CoCL3細(xì)胞 
Hs819T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS-766-T細(xì)胞、U2OS細(xì)胞、INS1-E細(xì)胞 
CCK-81細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H6c7細(xì)胞、MA-c細(xì)胞、Mouse Colon 38細(xì)胞 
KMS18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NS20-Y細(xì)胞、UCLA NPA-87-1細(xì)胞、JHH-7細(xì)胞 
MCM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P-36細(xì)胞、C3H 10T1/2細(xì)胞、MFE280細(xì)胞 
NCIH1734細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL-1細(xì)胞、NCI-H1395細(xì)胞、SW-403細(xì)胞 
SW-1990細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2342細(xì)胞、NB19-RIKEN細(xì)胞、SKNEP細(xì)胞 
UC-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCFB（HCF）細(xì)胞、NCIH650細(xì)胞、DH-82細(xì)胞 
Clone 15 HL-60細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-578Bst細(xì)胞、PCI:SG231細(xì)胞、MDA MB 436細(xì)胞 
IOSE 80細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2330細(xì)胞、HEK293-F細(xì)胞、mouse Inner Medullary Collecting Duct-3細(xì)胞 
GM00215A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOSEpiC細(xì)胞、HEK 293FT細(xì)胞、4T1細(xì)胞 
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