"WTRL1 大鼠肺細胞系
細胞背景資料：肺；成纖維樣細胞；雄性 
細胞形態(tài)：上皮細胞樣 
細胞傳代培養(yǎng)的胰酶消化法：傳代培養(yǎng)：是指細胞從一個培養(yǎng)瓶以１：２或１：２以上的比例轉移，接種到另一培養(yǎng)瓶的培養(yǎng)。傳代細胞，可根據不同細胞采取不同的方法進行細胞傳代。貼壁生長的細胞用消化法傳代，部分貼壁的細胞用直接吹打或用硅膠軟刮的刮除法傳代。懸浮細胞可采用加入等量新鮮培養(yǎng)基后直接吹打分散進行傳代，或用自然沉降法加入新培養(yǎng)基后再吹打分散進行傳代。實驗步驟：①入無菌室之前用肥皂洗手，再用７５% 的酒精擦拭消毒雙手；②倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài)，確定細胞是否傳代及細胞需要稀釋的倍數。將培養(yǎng)用液３７℃下預熱；③超凈臺臺面應整潔，用７５%酒精棉球擦拭清潔；④打開超凈工作臺的紫外燈照射臺面２０min左右，關閉紫外燈，打開風機清潔空氣除去臭氧；⑤點燃酒精燈;取出無菌試管，巴士德吸管和刻度吸管;安上橡皮頭;過酒精燈火焰略燒后插在無菌試管內；⑥將培養(yǎng)用液瓶口用７５%酒精消毒，過酒精燈火焰后斜置于酒精燈旁的架子上；⑦倒掉培養(yǎng)細胞的舊培養(yǎng)基。酌情可用２-３ml Hanks液洗去殘留的就培養(yǎng)基，或用少量胰酶涮洗一下；⑧每個大培養(yǎng)瓶加入１ml胰酶，小培養(yǎng)瓶用量酌減，蓋好瓶蓋后在倒置顯微鏡下觀察。當細胞收回突起變圓時立即翻轉培養(yǎng)瓶，使細胞脫離胰酶，然后將胰酶倒掉。注意勿使細胞提早脫落入消化液中；⑨加入少量的含血清的新鮮培養(yǎng)基，反復吹打消化好的細胞使其脫壁并分散，再根據分傳瓶數補加一定量的含血清的新鮮培養(yǎng)基(７-１０ml/大瓶;３-５ml/小瓶)制成細胞懸液，然后分裝到新培養(yǎng)瓶中。蓋好瓶蓋，適度擰緊后稍回轉，以利于CO２的進入，將培養(yǎng)瓶放回CO２培養(yǎng)箱；⑩對懸浮培養(yǎng)細胞，步驟７-９不做。直接將細胞懸液進行離心去除舊培養(yǎng)基上清，加入新鮮培養(yǎng)基，然后分裝到各瓶中。 
細胞生長：貼壁 
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源 
WTRL1 大鼠肺細胞系
細胞產品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支) 
可以這樣說，對于需要消化傳代的細胞，每一次的消化都是對這個細胞存活與否，狀態(tài)好與不好至關重要的考驗。很多同學都遇到過這個問題，自己養(yǎng)的細胞開始的幾代長的還挺好的，可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細胞不行了，狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題，可以非常肯定地說，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細胞受到較大損傷了。所以，越長越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個問題就是，細胞的生長狀態(tài)是不一樣的，每一個細胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細胞消化同樣的時間對細胞是不公平的，他們受到了差別待遇當然會有脾氣的，大家爭取做到因材施教，比如試試下面的“四步消化法”。（以難消化細胞為例），具體操作：1)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗1-2遍（目的是將漂浮著的死細胞之類盡量洗掉）。2)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細胞對比觀察看誰長的更好一點就知道該細胞對胰酶的敏感度了）3)吸干凈瓶內剩余液體，加入0.3ml左右的胰酶潤洗一遍，吸掉棄之，再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察，待細胞與細胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打2-3遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用2ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。(也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對比)4)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細胞。當然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細胞間隙明顯，細胞獨立開來的時候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據實際情況把握）。 
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。 
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數國外著名大學建系 
細胞生長特性：貼壁 
WTRL1 大鼠肺細胞系
細胞培養(yǎng)過程中相關問題總結：懸浮性細胞應如何繼代處理？一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中，稀釋細胞濃度即可，若培養(yǎng)液太多時，可將培養(yǎng)角瓶口端稍微抬高，直到無法容納為止。分瓶時取出一部份含細胞之培養(yǎng)液至另一新的培養(yǎng)角瓶，加入新鮮培養(yǎng)基稀釋至適當濃度，重復前述步驟即可。欲將一般動物細胞離心下來，其離心速率應為多少轉速？欲回收動物細胞，其離心速率一般為３００xg(約１,０００rpm)，５-１０分鐘，過高之轉速，將造成細胞死亡；細胞之接種密度為何？依照細胞株基本數據上之接種密度或稀釋分盤之比例接種即可。細胞數太少或稀釋的太多亦是造成細胞無法生長之一重要原因；細胞冷凍培養(yǎng)基之成份為何？動物細胞冷凍保存時最常使用的冷凍培養(yǎng)基是含５-１０%DMSO(dimethyl sulfoxide)和９０-９５%原來細胞生長用之新鮮培養(yǎng)基均勻混合之。注意：由于DMSO稀釋時會放出大量熱能，故不可將DMSO直接加入細胞液中，必須使用前先行配制完成；DMSO之等級和無菌過濾之方式為何？冷凍保存使用之DMSO等級，必須為Tissue culture grade之DMSO，其本身即為無菌狀況，次開瓶后應立即少量分裝于無菌試管中，保存于４°C，避免反復冷凍解凍造成DMSO之裂解而釋出有害物質，并可減少污染之機會。若要過濾DMSO，則須使用耐DMSO之Nylon材質濾膜；冷凍保存細胞之方法？冷凍保存方法一：冷凍管置于４°C ３０~６０分鐘→ (-２０°C ３０分鐘)→-８０°C １６~１８小時(或隔夜)→液氮槽vaporphase長期儲存。冷凍保存方法二：冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降１-３°C至–８０°C以下，再放入液氮槽vapor phase長期儲存。-２０°C不可超過１小時，以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-８０°C冰箱中，惟存活率稍微降低一些；細胞欲冷凍保存時，細胞冷凍管內應有多少細胞濃度？冷凍管內細胞數目一般為１x１０(６)cells/ml vial，融合瘤細胞則以５x１０(６)cells/ml vial為宜；應如何避免細胞污染？細胞污染的種類可分成細菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉?jié){菌。主要的污染原因為無菌操作技術不當、操作室環(huán)境不佳、污染之血清和污染之細胞等。嚴格之無菌操作技術、清潔的環(huán)境、與品質良好之細胞來源和培養(yǎng)基配制是減低污染之方法；如果細胞發(fā)生微生物污染時，應如何處理？直接滅菌后丟棄之。 
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書 
OCI-Ly18細胞系相關產品：HCC9724細胞、C-643細胞、LoVo細胞 
HS 683T細胞系相關產品：NCI-H522細胞、U266細胞、3T3-Swiss細胞 
L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)細胞系相關產品：ECC-12細胞、HCC2108細胞、CHP 100細胞 
Be-Wo細胞系相關產品：BC-022細胞、SIRC細胞、3T3(A31)細胞 
RSC 96細胞系相關產品：Ej138細胞、SKMEL-31細胞、IEC 18細胞 
HL-1細胞系相關產品：HK-2 [Human kidney]細胞、H1792細胞、OCI-Ly7細胞 
COLO 394細胞系相關產品：HRPEpiC細胞、NPC-TW-039細胞、MHCC 97-L細胞 
4T1-A細胞系相關產品：KU-812細胞、IMR 90細胞、OVCA5細胞 
CAL-33細胞系相關產品：COLO 678細胞、WM451細胞、hTERT-HPNE細胞 
Oka-C1細胞系相關產品：H-719細胞、NCI-H322細胞、HHFK細胞 
C3H/10T1/2 clone 8細胞系相關產品：TE 32細胞、PIG1細胞、RPMI-8402細胞 
16HBE140細胞系相關產品：NCI-SNU-475細胞、LCLC-103H細胞、BTI-TN5B1-4細胞 
DLD-1細胞系相關產品：HCC1419細胞、BGC-823細胞、LS1034細胞 
H-1793細胞系相關產品：ECC-10細胞、Swiss 3T6細胞、SCC-25細胞 
NCI-H1435細胞系相關產品：Rat-1細胞、MHCC97L細胞、NCI-H1668細胞 
SNU-C2A細胞系相關產品：AAV293細胞、SNU-354細胞、SNU-5細胞 
SNU-C2A細胞系相關產品：AAV293細胞、SNU-354細胞、SNU-5細胞 
MC3T3E1細胞系相關產品：Panc10.05細胞、RH7777細胞、UT7細胞 
STC-1細胞系相關產品：Tu-686細胞、P3-NS1/1Ag 4.1細胞、NIH/3T3細胞 
H-596細胞系相關產品：H-661細胞、CAL62細胞、Tb1Lu細胞 
WTRL1 大鼠肺細胞系
H-747細胞系相關產品：HPC-Y5細胞、H727細胞、VMRC-LCD細胞 
H69細胞系相關產品：KYSE-50細胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4細胞、PG [Human lung carcinoma]細胞 
B16-BL6細胞系相關產品：C6661細胞、COLO 357細胞、HLEC-B3細胞 
L540細胞系相關產品：MES-SA/Dx5細胞、P31 FUJ細胞、RS(4;11)細胞 
Sp2/O細胞系相關產品：X63-AG 8.653細胞、OUMS-23細胞、SCC4細胞 
P31-FUJ細胞系相關產品：801-D細胞、HCT 15細胞、SL-29細胞 
HCC1395細胞系相關產品：COLO-829細胞、3T6細胞、Human Fetal Thymocyte-8810細胞 
PK13細胞系相關產品：MIA PaCa-2細胞、MM1S細胞、BEAS-2B細胞 
HEK-2細胞系相關產品：HCC0366細胞、SUM-102細胞、Namalva細胞 
ARO 81-1細胞系相關產品：FHCRC-11細胞、MV-3細胞、CNE-2Z細胞 
MS1細胞系相關產品：H1522細胞、MS-751細胞、YES-2細胞 
Neuro-2a細胞系相關產品：HBSMC細胞、IOSE80細胞、Madin Darby Bovine Kidney細胞 
RPE D407細胞系相關產品：WM115F細胞、MGHU3細胞、SW-480細胞 
Panc327細胞系相關產品：KPL-1細胞、BEL-7402細胞、COLO-320HSR細胞 
T-HEECs細胞系相關產品：QBI-HEK 293A細胞、MV4;11細胞、MDA134細胞 
H1395細胞系相關產品：MIO-M1細胞、Hs840_T細胞、Caco2BBe細胞 
Cates 1B細胞系相關產品：KP2細胞、67NR細胞、A549細胞 
JTC-39細胞系相關產品：H460細胞、OS-RC-2細胞、MOLT-4細胞 
Caco2-BBE細胞系相關產品：Hs729細胞、OCI-AML5細胞、Embryonic Bovine Tracheal cells細胞 
COLO320-DM細胞系相關產品：HuO9細胞、RBMEC細胞、Cloudman S91 melanoma clone M-3細胞 
SW780細胞系相關產品：TOV-21G細胞、EB3 [Human Burkitt lymphoma]細胞、Vero E6細胞 
UACC893細胞系相關產品：H-841細胞、HEK-293FT細胞、CCRF-CEM/S細胞 
HEYA8細胞系相關產品：Hs675T細胞、SJRH30細胞、FET細胞 
KP4細胞系相關產品：NS653細胞、F9細胞、VP229細胞 
751細胞系相關產品：SK-NEP-1細胞、H-1792細胞、RIN-14B細胞 
GM2219C細胞系相關產品：AK細胞、HEK 293-EBNA細胞、Loucy細胞 
SCC154細胞系相關產品：Plaepi 34細胞、VM-CUB1細胞、BHT101細胞 
NCI-H1563細胞系相關產品：HO-8910PM細胞、U87MG細胞、FHCRC-11細胞 
NCIH2452細胞系相關產品：B-3細胞、NMCG1細胞、HPMEC細胞 
STO細胞系相關產品：NCIH1092細胞、WEHI3B細胞、H-146細胞 
NBL-2細胞系相關產品：NPC-039細胞、Farage Original Line細胞、EFM192B細胞 
HCCC9810細胞系相關產品：Hs 840.T細胞、MEL細胞、Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a細胞 
NOZAWA細胞系相關產品：ME180細胞、NCI-SNU-878細胞、HepaRG細胞 
COS-7細胞系相關產品：U-87MG細胞、HS-695T細胞、TE-9細胞 
MC-CAR細胞系相關產品：NSH細胞、SKLU1細胞、BE2M17細胞 
H-1688細胞系相關產品：MDA330細胞、LLC-PK-1細胞、Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1細胞 
NCI-H1573細胞系相關產品：CCD19-Lu細胞、CNE1-LUC細胞、Scott細胞 
NCI.H460細胞系相關產品：THP-1(ATCC)細胞、P3J HR-1細胞、NS-I/1細胞 
Hs742T細胞系相關產品：Colo741細胞、CEM-C7細胞、SUM190PT細胞 
IPLB-Sf21AE細胞系相關產品：NCI-H378細胞、NCI-SNU-520細胞、hFOB細胞 
MOLM-13細胞系相關產品：NCI N87細胞、Sol8細胞、WEHI3B細胞 
WTRL1 大鼠肺細胞系
3T3細胞系相關產品：Me-Wo細胞、WERIRb1細胞、Line 207細胞 
M 1細胞系相關產品：32D.cl3細胞、NCIH187細胞、639 V細胞 
Hs888Lu細胞系相關產品：COLO 829細胞、Y79細胞、SUM52PE細胞 
PF382細胞系相關產品：FRTL-5 Cl 2細胞、RWPE1細胞、PC 61 5.3細胞 
RMG-I細胞系相關產品：HMCB細胞、C3H-10T1/2細胞、293T/17細胞 
MC-4細胞系相關產品：SUIT2細胞、PTK-2細胞、CAL-85-1細胞 
Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B細胞系相關產品：QBC(939)細胞、JB 6細胞、HIT T15細胞 
T-ALL1細胞系相關產品：RS(4;11)細胞、HFE-145細胞、SKMel-5細胞 
TCC-SUP細胞系相關產品：NTERA-2/D1細胞、COLO824細胞、SK-RC-20細胞 
TSU-Pr1細胞系相關產品：H1568細胞、CMT 93細胞、HME-1細胞 
Lewis-Lung細胞系相關產品：NCIH187細胞、UM-UC-3細胞、MGSMC細胞 
L5178-R細胞系相關產品：Karpas-299細胞、NIH:OVCAR-4細胞、SRS-82細胞 
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