"M059K 人腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹 
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣 
傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細(xì)胞培養(yǎng)成功以后，需要進(jìn)行分離培養(yǎng)，否則細(xì)胞會(huì)因生存空間不足或密度過大，營養(yǎng)障礙，影響細(xì)胞生長(zhǎng)。細(xì)胞由原培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細(xì)胞允許培養(yǎng)的細(xì)胞擴(kuò)增(形成細(xì)胞株)，可以進(jìn)行細(xì)胞克隆，易于保存，但可能喪失一些特殊的細(xì)胞和分化特征。傳代細(xì)胞形成細(xì)胞株的利處在于提供了大量持久的實(shí)驗(yàn)材料，便于實(shí)驗(yàn)?！静僮鞑襟E】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶?jī)?nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進(jìn)行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細(xì)胞間隙增大后，應(yīng)立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶?jī)?nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)液，按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細(xì)胞，使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。吹打時(shí)動(dòng)作要輕柔，以防用力過猛損傷細(xì)胞；６)用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)；７)細(xì)胞培養(yǎng)換液時(shí)間應(yīng)根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)的狀態(tài)和實(shí)驗(yàn)要求來確定。一般２～３d后應(yīng)換一次生長(zhǎng)液。待細(xì)胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴(kuò)大培養(yǎng)或換成維持液。【注意事項(xiàng)】１)掌握好細(xì)胞消化的時(shí)間，消化時(shí)間過短時(shí)，細(xì)胞不宜從瓶壁脫落，過長(zhǎng)的消化會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞脫落、損傷；２)掌握好消化濃度，當(dāng)消化液濃度過高時(shí)，消化時(shí)間應(yīng)縮短，過低時(shí)細(xì)胞消化時(shí)間相對(duì)延長(zhǎng)。 
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁 
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源 
M059K 人腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支) 
懸浮細(xì)胞不容易轉(zhuǎn)染：懸浮細(xì)胞是指細(xì)胞生長(zhǎng)不依賴支持物表面，在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長(zhǎng)，如淋巴細(xì)胞。在實(shí)驗(yàn)室經(jīng)常會(huì)遇到懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染，其和貼壁細(xì)胞轉(zhuǎn)染還是有很大不同的。目前大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室用的是脂質(zhì)體類的轉(zhuǎn)染試劑，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染是基于電荷吸引原理，先形成脂質(zhì)體-DNA復(fù)合物，散布在細(xì)胞周圍，然后通過細(xì)胞的內(nèi)吞作用，將目的基因?qū)爰?xì)胞內(nèi)，而脂質(zhì)體復(fù)合物與貼壁細(xì)胞的接觸機(jī)會(huì)比懸浮細(xì)胞高出很多倍，所以，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染時(shí)懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率要明顯低于貼壁細(xì)胞。其次，脂質(zhì)體試劑的毒性較大，這就使得懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染更為困難了。另外，懸浮細(xì)胞不易培養(yǎng)，易死亡，也給細(xì)胞轉(zhuǎn)染造成了一定的困難。為了提高懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率，可以使用非脂質(zhì)體的轉(zhuǎn)染試劑，如納米材料的。也可以使用電轉(zhuǎn)染方法，針對(duì)懸浮細(xì)胞等難轉(zhuǎn)染細(xì)胞還是挺不錯(cuò)的，電擊對(duì)細(xì)胞有一定的損傷，選用具有細(xì)胞膜修復(fù)功能的電轉(zhuǎn)染試劑，可以將電擊對(duì)細(xì)胞的傷害降到最低，懸浮細(xì)胞不易轉(zhuǎn)染，選對(duì)試劑及良好的細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境才是關(guān)鍵。 
細(xì)胞傳代方法：１：６-１：８?jìng)鞔?；每周換液２-３次。 
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng) 
M059K 人腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞系
【胰蛋白酶消化操作】１)加入消化液：小心吸出舊培養(yǎng)液，用PBS清洗(沖洗)，加入適量消化液(胰蛋白酶液)，注意消化液的量以蓋住細(xì)胞，消化溫度是３７℃；２)顯微鏡下觀察細(xì)胞：倒置顯微鏡下觀察消化細(xì)胞，若胞質(zhì)回縮，細(xì)胞之間不再連接成片，表明此時(shí)細(xì)胞消化適度；(３)吸棄消化液加入培養(yǎng)液：棄去胰蛋白酶液，注意更換吸管，加入新鮮的培養(yǎng)液?！敬荡蚍稚⒓?xì)胞操作】１)吹打制懸：用滴管將已經(jīng)消化細(xì)胞吹打成細(xì)胞懸液；２)吸細(xì)胞懸液入離心管：將細(xì)胞懸液吸入１０ml離心管中；３)平衡離心：平衡后將離心管放入臺(tái)式離心機(jī)中，以１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心６-８分鐘；４)棄上清液，加入新培養(yǎng)液：棄去上清液，加入２ml培養(yǎng)液，用滴管輕輕吹打細(xì)胞制成細(xì)胞懸液?！痉盅b稀釋細(xì)胞操作】１)顯微鏡下觀察細(xì)胞：倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞量，必要是計(jì)數(shù)。注意密度過小會(huì)影響傳代細(xì)胞的生長(zhǎng)，傳代細(xì)胞的密度應(yīng)該不低于５×１０５/ml。最后要做好標(biāo)記；２)分裝：將細(xì)胞懸液吸出分裝至２～３個(gè)培養(yǎng)瓶中，加入適量培養(yǎng)基旋緊瓶蓋；３)繼續(xù)培養(yǎng)：用酒精棉球擦拭培養(yǎng)瓶，適當(dāng)旋松瓶蓋，放入CO２培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。傳代細(xì)胞２小時(shí)后開始貼附在瓶壁上。 
細(xì)胞形態(tài)特性：成纖維細(xì)胞 
RINm5F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AMO1細(xì)胞、U138MG細(xì)胞、SKHEP-1細(xì)胞 
2B4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOPC細(xì)胞、PK 15細(xì)胞、KY180細(xì)胞 
Psi2-DAP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ca759細(xì)胞、UACC812細(xì)胞、TC-1[JHU-1]細(xì)胞 
Oregon J-111細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RGC6細(xì)胞、hTERT-HME1細(xì)胞、ARIP細(xì)胞 
CEL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FCCH1024細(xì)胞、U266S細(xì)胞、H-2342細(xì)胞 
GM 637細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TALL 1細(xì)胞、MV-1-Lu細(xì)胞、HCT15細(xì)胞 
NOR-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ROS-17/2.8細(xì)胞、H146細(xì)胞、SKNFI細(xì)胞 
GCT0404細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS766T細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 1788細(xì)胞、SL1細(xì)胞 
MIMVEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A2780細(xì)胞、CCLP1細(xì)胞、SW-780細(xì)胞 
HIT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM-52細(xì)胞、PLA801C細(xì)胞、MEL-526細(xì)胞 
OCI-Ly3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C8166細(xì)胞、WERI-Rb-1細(xì)胞、PLA801D細(xì)胞 
SNU520細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2170細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6細(xì)胞、MPASMC細(xì)胞 
SkMel31細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CWR22R-V1細(xì)胞、LS-174細(xì)胞、32D:cl3細(xì)胞 
HO-1-N-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PGLH7細(xì)胞、Kobe university Oral Squamous Cell culture-2細(xì)胞、HUSMC細(xì)胞 
NG-108-15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TC-1 [Mouse lung]細(xì)胞、CL11細(xì)胞、BNL CL.2細(xì)胞 
H2108細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MES-13細(xì)胞、H-2405細(xì)胞、NCIH69細(xì)胞 
H2108細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MES-13細(xì)胞、H-2405細(xì)胞、NCIH69細(xì)胞 
DU-145細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HRGEC細(xì)胞、Human Pancreatic Duct Epithelial細(xì)胞、Hx-147細(xì)胞 
CT-26細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Immortal Pig Intestinal-2I細(xì)胞、Hs-606-T細(xì)胞、A2780/Taxol細(xì)胞 
HNE2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKN-AS細(xì)胞、Panc-05.04細(xì)胞、HPAEC細(xì)胞 
M059K 人腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞系
NHA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MPP-89細(xì)胞、CNE細(xì)胞、NIE 115細(xì)胞 
ACC-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：4T1-LUC細(xì)胞、HRA 19細(xì)胞、SUM-149細(xì)胞 
RPMI 8226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LLC1細(xì)胞、A204細(xì)胞、Intestinal Epithelioid Cell line No. 18細(xì)胞 
U-373MG ATCC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IPLB-Sf21-AE細(xì)胞、A2780-CP細(xì)胞、HK-2 [Human kidney]細(xì)胞 
NCI-H1417細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KTCTL-140細(xì)胞、SNU-620細(xì)胞、HuT78細(xì)胞 
U118細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HNE-2細(xì)胞、GM17346細(xì)胞、MRAEC細(xì)胞 
T98細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUPB-15細(xì)胞、CF PAC-1細(xì)胞、MV-4-11細(xì)胞 
TE-13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat clone A3細(xì)胞、HOS (TE85)細(xì)胞、NRK細(xì)胞 
675T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-428細(xì)胞、VM-CUB-I細(xì)胞、FRTL 5細(xì)胞 
EnCa1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：K7M2-WT細(xì)胞、CHL-11細(xì)胞、NCI-H2023細(xì)胞 
H358細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3/NS1/1-Ag4.1細(xì)胞、NK-92 transfected with MFG-hIL2細(xì)胞、ACC-2細(xì)胞 
HOP 62細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU886細(xì)胞、NCI-SNU-16細(xì)胞、H-1105細(xì)胞 
UMNSAH/DF-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCM-460細(xì)胞、NCIH1666細(xì)胞、H-1993細(xì)胞 
NCI-H1819細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2110細(xì)胞、KYSE 510細(xì)胞、CNE1細(xì)胞 
SW962細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A375.S2細(xì)胞、HTR-8/SVneo細(xì)胞、3T6-Swiss albino細(xì)胞 
CMEC/D3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DB細(xì)胞、GM00215A細(xì)胞、FBHE細(xì)胞 
L5178Y TK+/-3.7.2c細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：293S細(xì)胞、A375mel細(xì)胞、H4IIEC3細(xì)胞 
C-4-I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Capan2細(xì)胞、beta-TC6細(xì)胞、Jijoye細(xì)胞 
U251n細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IM-9細(xì)胞、NCIH748細(xì)胞、H-1672細(xì)胞 
EPC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：M059J細(xì)胞、SPCA1細(xì)胞、HCC1419細(xì)胞 
WIL2-S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 824細(xì)胞、TH1細(xì)胞、HRPEpiC細(xì)胞 
GOTO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MTC-TT細(xì)胞、OV 1063細(xì)胞、KRC-Y細(xì)胞 
L1210細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCA-7細(xì)胞、SVG p12細(xì)胞、TE9細(xì)胞 
E6-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FRhK-4細(xì)胞、293 c18細(xì)胞、143 B細(xì)胞 
TSU-Pr1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1568細(xì)胞、COLO-829細(xì)胞、R.K.13細(xì)胞 
WM35細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-172細(xì)胞、293F細(xì)胞、H-2286細(xì)胞 
BL1339細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L363細(xì)胞、OVISE細(xì)胞、H-358細(xì)胞 
Case 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2106細(xì)胞、BGC823細(xì)胞、H1666細(xì)胞 
MSB-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI3細(xì)胞、MC57細(xì)胞、NBL-5細(xì)胞 
HEK 293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM266細(xì)胞、PaTu8988s細(xì)胞、LN382細(xì)胞 
RMS1598細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1355細(xì)胞、T2細(xì)胞、Ramos 1細(xì)胞 
SACCLM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK 293細(xì)胞、HCT/Taxo1細(xì)胞、Det. 562細(xì)胞 
GM03671細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-3A細(xì)胞、NCI-H295R細(xì)胞、E304細(xì)胞 
NCIH1838細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：High Five細(xì)胞、A-20細(xì)胞、RMS 1598細(xì)胞 
3T3-442A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL-MeWo細(xì)胞、PANC 327細(xì)胞、RKO-AS45-1細(xì)胞 
WM-115細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1944細(xì)胞、MHHCALL2細(xì)胞、SK-BR-3細(xì)胞 
MOLT-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEL92.1.7細(xì)胞、RGC-5細(xì)胞、SNU668細(xì)胞 
M3 Clone M-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HMy2.CIR細(xì)胞、HN-6細(xì)胞、T/G HA-VSMC細(xì)胞 
NCIH1436細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RD-ES細(xì)胞、NR8383細(xì)胞、HLEC細(xì)胞 
EFM192B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-394細(xì)胞、NCI-H2227細(xì)胞、Helacyton gartleri細(xì)胞 
EM3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WISH細(xì)胞、BRL3A細(xì)胞、Mino細(xì)胞 
M059K 人腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞系
SKMES-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PCI-04B細(xì)胞、MDBK細(xì)胞、GES1細(xì)胞 
Tsup-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCFSTTG1細(xì)胞、58F細(xì)胞、HCC-1954BL細(xì)胞 
C-Li-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-780細(xì)胞、SJSA1細(xì)胞、KU 812F細(xì)胞 
OAW42細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EAC細(xì)胞、M210B4細(xì)胞、MDA-MB-175-VII細(xì)胞 
H-378細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW839細(xì)胞、NCI-H87細(xì)胞、Alpha Mouse Liver 12細(xì)胞 
COLO-680N細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-293FT細(xì)胞、KP 4細(xì)胞、HGSMC細(xì)胞 
Kit225-K6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H358細(xì)胞、Okayama University Medical School-27細(xì)胞、HeLa.S3細(xì)胞 
A2780S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OE-33細(xì)胞、3T3 clone A31細(xì)胞、WSU-DLCL2細(xì)胞 
H820細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHP-100細(xì)胞、PC 61細(xì)胞、IAR-20細(xì)胞 
NCI-H125細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：J82COT細(xì)胞、MESSA Dx5細(xì)胞、SUM-52PE細(xì)胞 
UCLA-RO 81細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：M-14細(xì)胞、J111細(xì)胞、WTRL1細(xì)胞 
Psi2-DAP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ca759細(xì)胞、HuTu 80細(xì)胞、Ly1細(xì)胞 
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