"143B 人骨肉瘤細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹 
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣 
傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細(xì)胞培養(yǎng)成功以后，需要進(jìn)行分離培養(yǎng)，否則細(xì)胞會(huì)因生存空間不足或密度過(guò)大，營(yíng)養(yǎng)障礙，影響細(xì)胞生長(zhǎng)。細(xì)胞由原培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過(guò)程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細(xì)胞允許培養(yǎng)的細(xì)胞擴(kuò)增(形成細(xì)胞株)，可以進(jìn)行細(xì)胞克隆，易于保存，但可能喪失一些特殊的細(xì)胞和分化特征。傳代細(xì)胞形成細(xì)胞株的利處在于提供了大量持久的實(shí)驗(yàn)材料，便于實(shí)驗(yàn)?！静僮鞑襟E】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶?jī)?nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進(jìn)行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細(xì)胞間隙增大后，應(yīng)立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶?jī)?nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)液，按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細(xì)胞，使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。吹打時(shí)動(dòng)作要輕柔，以防用力過(guò)猛損傷細(xì)胞；６)用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)；７)細(xì)胞培養(yǎng)換液時(shí)間應(yīng)根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)的狀態(tài)和實(shí)驗(yàn)要求來(lái)確定。一般２～３d后應(yīng)換一次生長(zhǎng)液。待細(xì)胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴(kuò)大培養(yǎng)或換成維持液?！咀⒁馐马?xiàng)】１)掌握好細(xì)胞消化的時(shí)間，消化時(shí)間過(guò)短時(shí)，細(xì)胞不宜從瓶壁脫落，過(guò)長(zhǎng)的消化會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞脫落、損傷；２)掌握好消化濃度，當(dāng)消化液濃度過(guò)高時(shí)，消化時(shí)間應(yīng)縮短，過(guò)低時(shí)細(xì)胞消化時(shí)間相對(duì)延長(zhǎng)。 
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁 
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源 
143B 人骨肉瘤細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支) 
傳代的操作步驟注意事項(xiàng)：1)操作前要洗手，進(jìn)入超凈臺(tái)后手要用75%酒精或0.2%新潔爾滅擦試。試劑等瓶口也要擦試。2)點(diǎn)燃酒精燈，操作在火焰附近進(jìn)行，耐熱物品要經(jīng)常在火焰上燒灼，金屬器械燒灼時(shí)間不能太長(zhǎng)，以免退火，并冷卻后才能夾取組織，吸取過(guò)營(yíng)養(yǎng)液的用具不能再燒灼，以免燒焦形成碳膜。3)操作動(dòng)作要準(zhǔn)確敏捷，但又不能太快，以防空氣流動(dòng)，增加污染機(jī)會(huì)。4)不能用手觸已消毒器皿的工作部分，工作臺(tái)面上用品要布局合理。5)瓶子開(kāi)口后要盡量保持45℃斜位。6)吸溶液的吸管等不能混用。貼壁細(xì)胞傳代的操作步驟：1)吸除培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液。2)向瓶?jī)?nèi)加入胰蛋白酶和EDTA混合液少許，以能覆滿瓶底為限。3)置溫箱中2-5分鐘，當(dāng)發(fā)現(xiàn)細(xì)胞質(zhì)回縮，細(xì)胞間隙增大后，立即終止消化。4)吸除消化液，向瓶?jī)?nèi)注入Hanks液數(shù)毫升，輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶，把殘余消化液沖掉。注意加Hanks液沖洗細(xì)胞時(shí)，動(dòng)作要輕，以免把已松動(dòng)的細(xì)胞沖掉流失，如用胰蛋白酶液?jiǎn)为?dú)消化，吸除胰蛋白酶液后，可不用Hanks液沖洗，直接加入培養(yǎng)液。5)用吸管吸取營(yíng)養(yǎng)液輕輕反復(fù)吹打瓶壁細(xì)胞，使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。6)計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)后，把細(xì)胞懸液分成等份分裝入數(shù)個(gè)培養(yǎng)瓶中，置溫箱中培養(yǎng)。懸浮細(xì)胞傳代的操作步驟：1)吸出細(xì)胞培養(yǎng)液，放入離心管中，離心1000rpm5分鐘。2)吸掉上清液，加入適量之新鮮培養(yǎng)基，混和均勻后，依稀釋比例轉(zhuǎn)移至新的培養(yǎng)瓶中，以正常培養(yǎng)條件培養(yǎng)。 
細(xì)胞傳代方法：１：２—１：５傳代；每周換液２-３次 
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系 
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng) 
143B 人骨肉瘤細(xì)胞系
有關(guān)實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞培養(yǎng)基知識(shí)普及：經(jīng)典的培養(yǎng)基有很多種，Corning、Invitrogen(GIBCO)、Thermo Fisher(HyClone)等公司都可以提供。其中DMEM、RPMI １６４０、MEM、DMEM/F１２都是應(yīng)用最廣泛的培養(yǎng)基。其他如M１９９、IMDM、L１５培養(yǎng)基等也用于某些細(xì)胞的培養(yǎng)；MEM是由Eagle’s基礎(chǔ)培養(yǎng)基(BME)發(fā)展而來(lái)的，其中增加了組分的范圍及濃度；BEM(DMEM)培養(yǎng)基是為小鼠成纖維細(xì)胞設(shè)計(jì)的，現(xiàn)在常用于貼壁細(xì)胞的培養(yǎng)。DMEM的基酸濃度是MEM的兩倍，維生素濃度是MEM的４倍，采用雙倍的HCO３-和CO２濃度起到更好的緩沖作用。最初的配方中葡萄糖含量為１０００mg/L，后來(lái)為了某些細(xì)胞的生長(zhǎng)需要，將葡萄糖含量又調(diào)整為４５００mg/L，這就是大家常說(shuō)的低糖和高糖了；aMEM含有附加的基酸、維生素以及核苷和脂肪酸，它可廣泛應(yīng)用于各種細(xì)胞類型，包括對(duì)營(yíng)養(yǎng)成分要求苛刻的細(xì)胞；Ham’s F１２是為在低血清濃度下克隆CHO細(xì)胞而設(shè)計(jì)的，現(xiàn)在也廣泛應(yīng)用于克隆形成率的分析及原代培養(yǎng)。F１２還可以與DMEM等體積混合使用，得到一種高濃度與成分多樣化相結(jié)合的產(chǎn)物，這種培養(yǎng)基已應(yīng)用于許多原代培養(yǎng)及更難養(yǎng)的細(xì)胞系的培養(yǎng)；RPMI １６４０培養(yǎng)基是專為淋巴細(xì)胞培養(yǎng)而設(shè)計(jì)的，現(xiàn)在已廣泛應(yīng)用于懸浮細(xì)胞的培養(yǎng)。 
細(xì)胞形態(tài)特性：混合型 
COLO320DM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GC-1spg細(xì)胞、HFF細(xì)胞、HEL 92.1.7細(xì)胞 
SN4741細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tb1.Lu細(xì)胞、Tn-5細(xì)胞、Fetal Human Lens-124細(xì)胞 
ZR75_1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AML193細(xì)胞、CCC-ESF-1細(xì)胞、RPMI 2650細(xì)胞 
H1781細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MAC1細(xì)胞、mREC細(xì)胞、HEC151細(xì)胞 
DK-MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL-12T細(xì)胞、NRCC細(xì)胞、OCI-LY-18細(xì)胞 
751細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-NEP-1細(xì)胞、H-1792細(xì)胞、RIN-14B細(xì)胞 
NTERA2-D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TGBC11TKB細(xì)胞、H378細(xì)胞、BT-549細(xì)胞 
Psi2-DAP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ca759細(xì)胞、UACC812細(xì)胞、TC-1[JHU-1]細(xì)胞 
J82細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Y1細(xì)胞、SW-480細(xì)胞、CAKI 1細(xì)胞 
FHL124細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GCT0404細(xì)胞、MADISON LUNG TA-109細(xì)胞、HeLa-229細(xì)胞 
OCI-AML3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC0078細(xì)胞、UPCI:SCC90細(xì)胞、P3X63Ag8.653細(xì)胞 
TCC-PAN2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Suzhou Human Glioma-44細(xì)胞、LMH細(xì)胞、IOSE-Van細(xì)胞 
NCI-H2073細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Gerner 7666細(xì)胞、HS-68細(xì)胞、B35細(xì)胞 
HSAEC1-KT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-403細(xì)胞、Duke University 4475細(xì)胞、H-1623細(xì)胞 
Hs27F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LWnt3A細(xì)胞、IPLB-Sf21-AE細(xì)胞、HLEpiC細(xì)胞 
SK-Col-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1838細(xì)胞、NIE-115細(xì)胞、TYK-nu細(xì)胞 
SK-Col-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1838細(xì)胞、NIE-115細(xì)胞、TYK-nu細(xì)胞 
PG-4(S+L-)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：F36P細(xì)胞、NCI-H157細(xì)胞、VCaP細(xì)胞 
T-HSC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-119細(xì)胞、Leghorn Male Hepatoma cell line細(xì)胞、ROS17/2.8細(xì)胞 
TE 354.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NFHIOSE-80細(xì)胞、EB-1細(xì)胞、RPMI 7951細(xì)胞 
143B 人骨肉瘤細(xì)胞系
JROECL 21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KATOIII細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-231細(xì)胞、MeT5A細(xì)胞 
NCIH847細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUPM2細(xì)胞、Pa16C細(xì)胞、H23細(xì)胞 
Pt K1 (NBL-3)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat 77細(xì)胞、Hs-281-T細(xì)胞、Huh-7.5.1細(xì)胞 
Nb2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-4I細(xì)胞、C32-mel細(xì)胞、U-251MG細(xì)胞 
NCIH810細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2126細(xì)胞、NFHIOSE-29細(xì)胞、LS513細(xì)胞 
NCI-H920細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HLEC-B3細(xì)胞、Gingival carcinoma Neck Metastasis細(xì)胞、CORL279細(xì)胞 
HM06.A1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H847細(xì)胞、H2029細(xì)胞、Calf Pulmonary Artery Endothelial細(xì)胞 
NCI-SNU-398細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC-9細(xì)胞、MDA 231-LM2-4175細(xì)胞、SNU423細(xì)胞 
PaTu 8988 S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc 02細(xì)胞、PLC細(xì)胞、NCTC clone 929細(xì)胞 
HCC366細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-363細(xì)胞、KYSE70細(xì)胞、GM00637H細(xì)胞 
MDCKII-WT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MMAc-SF細(xì)胞、HRGEC細(xì)胞、JVM2細(xì)胞 
SK-Hep1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hepatoma 22細(xì)胞、YH細(xì)胞、Mink Lung細(xì)胞 
Vero 76 clone E-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK HEP 01細(xì)胞、JEKO細(xì)胞、SKNSH細(xì)胞 
NCIH508細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UACC893細(xì)胞、SUM-52PE細(xì)胞、Evsa T細(xì)胞 
HUVEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：QG-56細(xì)胞、HCC0078細(xì)胞、CL1-5細(xì)胞 
HuTu-80細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Alpha Mouse Liver 12細(xì)胞、3T3-L1 ad細(xì)胞、Vero from pool #76細(xì)胞 
A 172細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A427細(xì)胞、BEAS2B細(xì)胞、Tissue Culture-1細(xì)胞 
SKRC 39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JM1細(xì)胞、HOCF細(xì)胞、NCI H69細(xì)胞 
WEHI-3B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Okayama University Medical School-23細(xì)胞、H1385細(xì)胞、GA-10-Clone-4細(xì)胞 
CAL 12T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOS-TE85細(xì)胞、SW-1990細(xì)胞、MES-SA/Dx-5細(xì)胞 
SV40-HCEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IOSE-Mar細(xì)胞、Capan 2細(xì)胞、Nthy ori 3.1細(xì)胞 
Roswell Park Memorial Institute 8402細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Centre Antoine Lacassagne-39細(xì)胞、NCI-H378細(xì)胞、CAL-33細(xì)胞 
RC-4B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RIN-14B細(xì)胞、MDA468細(xì)胞、MonoMac1細(xì)胞 
SuDHL 8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ACC-M細(xì)胞、Duck embryo細(xì)胞、SK-MEL-28細(xì)胞 
Hs 274細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CFPAC-1細(xì)胞、TK-10細(xì)胞、AML 12細(xì)胞 
Hs742T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colo741細(xì)胞、CEM-C7細(xì)胞、SUM190PT細(xì)胞 
CCD-1112sk細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Renal Carcinoma細(xì)胞、Vertebral Cancer of the Prostate細(xì)胞、H727細(xì)胞 
H6c7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Y-1細(xì)胞、253JB-V細(xì)胞、LL/2細(xì)胞 
hA549細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLT16細(xì)胞、OVCA420細(xì)胞、Hs863T細(xì)胞 
RPE1-hTERT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1993細(xì)胞、FRTL 5細(xì)胞、A2780S細(xì)胞 
MNNG/HOS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2195細(xì)胞、Hs-852-T細(xì)胞、OCI-LY-3細(xì)胞 
UMNSAH-DF 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EOL1細(xì)胞、SK.MEL.2細(xì)胞、H2052_MM細(xì)胞 
PaTu 8988 S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc 02細(xì)胞、PLC細(xì)胞、NCTC clone 929細(xì)胞 
ARO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：2PK3細(xì)胞、MOLM-14細(xì)胞、A375.S2細(xì)胞 
B16/BL6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ketr 3細(xì)胞、Huh-7.5細(xì)胞、RWPE2細(xì)胞 
CCC-HEH-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-GT-4細(xì)胞、Tn5 B1-4細(xì)胞、MESSADX5細(xì)胞 
HCC-38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KLM1細(xì)胞、KE39細(xì)胞、SW-756細(xì)胞 
Balb/c 3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ACCM細(xì)胞、NRK細(xì)胞、TOV-21G細(xì)胞 
HuO9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW1990細(xì)胞、MDA-436細(xì)胞、BT.549細(xì)胞 
J774 A.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-1040細(xì)胞、F-81細(xì)胞、MCA205細(xì)胞 
VK2 (E6/E7)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-320細(xì)胞、GM0637細(xì)胞、CNE1-LUC細(xì)胞 
143B 人骨肉瘤細(xì)胞系
H2023細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUPT-1細(xì)胞、Hmy.2 CIR細(xì)胞、H1651細(xì)胞 
SKG-IIIa細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IOSE80細(xì)胞、BC-019細(xì)胞、H-2196細(xì)胞 
IR983F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NK-92細(xì)胞、32D clone 3細(xì)胞、EL-4細(xì)胞 
SKCO1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC3M-1E8細(xì)胞、NG108-15細(xì)胞、RBVEC細(xì)胞 
MV-4:11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM-159-PT細(xì)胞、FHs74 Int細(xì)胞、H-1755細(xì)胞 
National Medical Center-Glioma 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBE 135-E6E7細(xì)胞、HSCT6細(xì)胞、KYSE 410細(xì)胞 
H-69細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VK2 (E6/E7)細(xì)胞、E304細(xì)胞、NCI-H1048細(xì)胞 
Hs940-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2228細(xì)胞、SNU-886細(xì)胞、DMS 79細(xì)胞 
NCI-ADR-RES細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Wayne State University-Head and Neck 13細(xì)胞、RPMI1846細(xì)胞、WEHI164細(xì)胞 
Vero細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H3255細(xì)胞、Colo205細(xì)胞、IAR-20細(xì)胞 
0V-1063細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A2780S細(xì)胞、FRTL 5細(xì)胞、Kelly細(xì)胞 
ZR75_1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AML193細(xì)胞、MDA-MB-175-VII細(xì)胞、SNB.19細(xì)胞 
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