"CMK Thawing人原始巨核細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：淋巴母細胞樣
CMK Thawing人原始巨核細胞系
細胞生長：懸浮
細胞培養(yǎng)無菌操作的演示：凡是帶入超凈工作臺內(nèi)的酒精、PBS、培養(yǎng)基、胰蛋白酶的瓶子均要用７５％酒精擦拭瓶子的外表面；靠近酒精燈火焰操作。器皿使用前必須過火滅菌，繼續(xù)使用的器皿(如瓶蓋、滴管)要放在高處，使用時仍要過火。各種操作要靠近酒精燈，動作要輕、準確，不能亂碰。如吸管不能碰到廢液缸。吸取兩種以上的使用液時要注意更換吸管，防止交叉污染。玻璃器械洗消：一、新的玻璃器皿的洗消：自來水刷洗，除去灰塵。烘干、泡：烤箱中烘干，然后再浸入５％稀中１２小時以除去臟物、鉛、等物。刷洗、烘干：１２小時后立即用自來水沖洗，再用洗滌劑刷洗，自來水沖干凈后用烤箱烘干；泡酸、清洗：用清潔液浸泡１２小時，然后從酸缸內(nèi)撈出器皿用自來水沖洗１５次，最后蒸餾水沖洗３-５次和用雙蒸水過３次。烘干、包裝：洗干凈后先烘干，然后用牛皮紙(油光紙)包裝。高壓消毒：包裝好的器皿裝入高壓鍋內(nèi)蓋好蓋子，打開開關(guān)和安全閥，當蒸氣成直線上升時，關(guān)閉安全閥，當指針指向１５磅時，維持２０-３０分鐘。高壓消毒后烘干。二、舊的玻璃器皿的洗消：刷洗、烘干：使用過的玻璃器皿可直接泡入來蘇爾液或洗滌劑溶液中，泡過來蘇爾溶液(洗滌劑)的器皿要用清水刷洗干凈，然后烘干。泡酸、清洗：烘干后泡入清潔液(酸液)，１２小時后從酸缸內(nèi)撈出器皿立即用自來水沖洗(避免蛋白質(zhì)干涸后粘附于玻璃上難以清洗)，再用蒸餾水沖洗３次。烘干、包裝：洗干凈的器皿烘干后取出用牛皮紙(油光紙)等包裝。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可。吸去胰酶后，殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在37℃一般不到2min足夠消化細胞。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞，連續(xù)這樣傳代，對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去，胰酶潤洗吸去，然后37℃消化。比較難消化的細胞（潤洗方法5min還不能消化），這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育。不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了，一般你肉眼觀察貼壁細胞層，只要能移動了，多半呈沙壯移動，其實已經(jīng)可以了，很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞，這是沒有必要的。一般能移動了，說明細胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了，細胞之間的附著也已經(jīng)消失了，細胞已經(jīng)獨立分布了（雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布）。這個時候應(yīng)該停止消化，不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好，間隙很大，才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液，之后在貼壁的過程中仍然會聚集，這個是貼壁培養(yǎng)的細胞，尤其是腫瘤細胞的一個特性。如果和標準形態(tài)不一致，那可能是自己沒消化好導致的，但如果消化方法正確，仍然成片分布，甚至完全吹打成單細胞懸液，貼壁后仍然成片分布，這是細胞的特性，是因為貼壁過程中重新聚集了。這個時候你拼了命要去讓它均勻分布，你的細胞之后會對你越來越不好。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
CMK Thawing人原始巨核細胞系
細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分
因為細胞生長的時候肯定是要相互聯(lián)系，大部分的細胞都是要成片生長的，尤其是對于貼壁細胞，單個細胞貼壁之后長著長著就長到一片去了。但是如果是成片的細胞抱團的話，傳代后細胞是不能貼壁的，這樣抱團的細胞就會死亡。所以，消化傳代的時候一定要將細胞消化成單個單個的獨立狀態(tài)，這個啊是非?？季磕愕墓Ψ虻?！細胞一旦脫落入懸液里你很難再將他吹打成單個，因為他沒有受力點了。很難找到受力點讓你對他吹打的力分散開細胞。所以必須要在細胞未脫落之前將其吹打開，受力點就是細胞貼壁的地方。這樣你就必須要嚴格控制好消化的程度啊，這和大師做飯掌握好火候是一樣的道理啊。既要消化到容易吹打下來，又不能太過，一吹就整片脫落，要單個單個地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是為了保證不同生長狀態(tài)貼壁程度的細胞能夠都維持在好的受力點分散開。這個是很重要的一點。尤其是對于某些細胞這一點就是他活去死的致命點。像Caco-２細胞就是如此。另外關(guān)于傳代很重要一點就是一定不能等到細胞長滿的時候才去消化傳代。要在細胞長到７０%左右的時候就要傳代了，一旦發(fā)現(xiàn)細胞生長中已經(jīng)有疊層生長的時候就要立即進行消化傳代。不能再拖了。關(guān)于換液傳代時候洗瓶的問題。對于用DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)的細胞，你在洗的時候如果是用無血清１６４０去洗細胞在隨即后的幾次中會比用DMEM洗的長的要好。同樣，用１６４０培養(yǎng)的也有這個現(xiàn)象。如果不嫌麻煩的話，可以用PBS來洗，洗的效果和用無血清培養(yǎng)基洗的效果基本上是一樣的，對于有些細胞會更勝一籌。洗的目的主要是洗去培養(yǎng)瓶里殘留的血清，防止它對胰酶的影響。這樣能夠保證胰酶的消化能力優(yōu)先，是很關(guān)鍵的一點。先補充這么多，還會后續(xù)更新。再補充一點：傳代時PBS洗是很重要的一步，最近發(fā)現(xiàn)，用PBS就可以把細胞消化開來。加入PBS放置１０-１５分鐘，有些需要更長的時間，等到細胞一個個分離開來的時候，就可以直接吹打下來，但是和胰酶消化一樣，要控制好時間，不能時間太過了，要不然損傷細胞，細胞不容易成活，狀態(tài)容易不好。這個方法對于某些細胞是很管用的。有些細胞用胰酶消化不容易消化成單個的時候，或者臨時沒有胰酶了，可以選用此方法。不過一定要試試，看是否適合你的細胞。
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
Okayama University Medical School-23細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OC-316細胞、H-2108細胞、ELD-1細胞
Melanoma 14細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T. T細胞、NSC-34細胞、OVCAR5細胞
FU-97細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCl-H157細胞、MAD109細胞、Hs819T細胞
OCI-AML3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC0078細胞、UPCI:SCC90細胞、P3X63Ag8.653細胞
Tb 1 Lu (NBL-12)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VMM-5A細胞、SU-DHL-2細胞、RASMCs細胞
T47-D細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L 1210細胞、EFM-19細胞、CAL 33細胞
HCC-78細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H358細胞、RPMC細胞、L-Wnt-3A細胞
HUVSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1436細胞、H2081細胞、SKMEL-1細胞
HCASMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NR-8383細胞、J-774細胞、MA-104細胞
SUM-159細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1341細胞、HS5細胞、JurkatE6-1細胞
NCI-N87細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NRK細胞、NCI-H2196細胞、Fetal Bovine Heart Endothelial細胞
GC-2spd(ts)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2細胞、TMD8細胞、SKNBE-1細胞
NTera 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：N1E115細胞、NK62a細胞、NCI-H295細胞
Walker/LLC-WRC 256細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM05384細胞、Panc8.13細胞、HCT 8細胞
JB6 Cl 30細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-435細胞、HSC2細胞、Hs604T細胞
Hs600T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNK1細胞、COLO 320 DM細胞、HCT-116細胞
WIL2S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TGW細胞、HOC細胞、SF-539細胞
hMSC-BM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：YT細胞、FAO-1細胞、NCIH1755細胞
SF 126細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16/BL6細胞、BSC-1細胞、SUM102細胞
CRFK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TCC-PAN2細胞、JVM3細胞、NCI.H522細胞
MCA-205細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-293 c18細胞、NCI-SNU-1040細胞、Nb2a細胞
MDA-MB-435細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H28細胞、3T3 L1細胞、HEK 293FT細胞
Sci-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Anip-973細胞、EC-9706細胞、ECC 10細胞
TC7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMBC細胞、LC2/Ad細胞、A-72細胞
Hep2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-660細胞、hFOB1.19細胞、LICR-LON-HN6-R細胞
P3X63Ag8.653細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 48細胞、CMT-167細胞、Beta-TC-6細胞
CMK Thawing人原始巨核細胞系
SK.OV.3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HME1細胞、NUGC2細胞、Emory University-2細胞
NCI-H2009細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHP 212細胞、LS 174T細胞、WEHI3細胞
MC-38細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OE-21細胞、SUDHL8細胞、HeLa S3細胞
MCF7-CTRL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK HEP-1細胞、RS411細胞、Caco-2細胞
Hs 578.Bst細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2107細胞、MPC-5細胞、HL-60細胞
H548細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat, Clone E6-1細胞、CCD18Co細胞、TSCCa細胞
MAVER細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuH 6細胞、FL-83B細胞、P3.NS-1/1.Ag4.1細胞
MC3T3-E1 Subclone 4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCF細胞、H184A1細胞、CAL 148細胞
8305C_1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2087細胞、P-815細胞、H345細胞
IAR-20細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LM1細胞、VA-ES-BJ細胞、BE(2)-M17細胞
CP70細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUTU80細胞、HEL-92-1-7細胞、NCI-N87細胞
H-711細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03570細胞、SNK1細胞、NIT-1細胞
RCC-10RGB細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Caco-2細胞、HCC0038細胞、NHLF細胞
HCC-95細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kit-225細胞、HDQ-P1細胞、DMS-273細胞
WEHI3B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OS-732細胞、HepG2/C3A細胞、Madison細胞
PMVEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC3H1細胞、FM-88細胞、RMS1598細胞
VSC4.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UCH-1細胞、KE-37細胞、118 MG細胞
H-226細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RSC96細胞、CAL 62細胞、NCI-H28細胞
HCC38細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2171細胞、Hs 766.T細胞、MGC803細胞
YH-13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEp-2細胞、NT2細胞、SHEE細胞
DoTc2-4510細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MS-751細胞、RPMI no. 8226細胞、SG231細胞
HPAF II細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI細胞、Caki-1細胞、NUGC2細胞
FDCP-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：M21細胞、HCC1599細胞、GT1-1細胞
TE14細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C3H/10T1/2 clone 8細胞、OVCAR10細胞、7404細胞
H2195細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-449細胞、COLO679細胞、NCI H716細胞
AM-38細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NRK52E細胞、EBNA-293細胞、HN-6細胞
H35 Reuber細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CV-1 in Origin Simian-1細胞、RN細胞、MMAc-SF細胞
G361mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VP 267細胞、HCC-202細胞、HPB/ALL細胞
NCI-H740細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LA-N-6細胞、AM細胞、Panc_08_13細胞
HCC-1954BL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Walker256-TC細胞、WSUDLCL2細胞、MEF細胞
Tregs細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Epstein-Barr-3細胞、SCC9細胞、SKNBE2細胞
EOMA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3/NSI/1-AG4-1細胞、OB2細胞、H-548細胞
H-2108細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK;293細胞、KM932細胞、HS578細胞
CMK Thawing人原始巨核細胞系
KMY1022細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCILY-19細胞、CT26.CL25細胞、HCC0095細胞
HCC0202細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B-CPAP細胞、HT-29/CX-1細胞、OV-1063細胞
OV433細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HMO6細胞、SH-SY5Y細胞、RSC96細胞
H711細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IMCD-3細胞、SW 982細胞、MGHU3細胞
OUMS23細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LA795細胞、WEHI-164細胞、Panc 03.27細胞
OVTOKO細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RL-65細胞、Tn 5B1-4細胞、ketr 3細胞
P30-OHK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA468細胞、KU812-F細胞、H441細胞
Helacyton gartleri細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCGC細胞、VP229細胞、RBL.2H3細胞
NCIH2286細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IHH-4細胞、Roswell Park Memorial Institute 8402細胞、HCT/Taxo1細胞
HS688AT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OPM2細胞、COV 504細胞、Adeno 293細胞
Daudi細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 837細胞、SK-Mel 1細胞、NKM1細胞
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