"PT67 Thawing小鼠逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝細(xì)胞；雄性；NIH Swiss
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
PT67 Thawing小鼠逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝細(xì)胞系
細(xì)胞生長：貼壁
細(xì)胞凍存的步驟：１)選擇處于對(duì)數(shù)生長期的細(xì)胞，在凍存前一天換液。將多個(gè)培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng)液去掉，用０.２５% 胰蛋白酶消化。適時(shí)去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞，使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)；２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預(yù)冷１５分鐘后，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻，細(xì)胞濃度為５×１０６～１×１０７/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢？答案是不一定的，具體要看培養(yǎng)的細(xì)胞類型來選擇；３)將分裝上述細(xì)胞懸液于２ml凍存管中，每管０.２５ml。凍存管要將蓋子蓋緊，并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期，同時(shí)作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù))；４)將裝好細(xì)胞的凍存管放到凍存盒中，-８０℃冰箱過夜。；如果有程序降溫器(放在-８０℃冰箱過夜，放入液氮罐);或者可以在４℃，２h;然后轉(zhuǎn)到-２０℃，２h;-８０℃，２h;放入液氮罐；５)細(xì)胞凍存在液氮中可以長期保存，但為妥善起見，凍存半年后，取出一只凍存管細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng)，觀察生長情況，然后再繼續(xù)凍存。
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細(xì)胞傳代培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)：體外培養(yǎng)的原代細(xì)胞或細(xì)胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代，以便獲得穩(wěn)定的細(xì)胞株或得到大量的同種細(xì)胞，并維持細(xì)胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細(xì)胞形成單層匯合以后，由于密度過大生存空間不足而引起營養(yǎng)枯竭，將培養(yǎng)的細(xì)胞分散，從容器中取出，以１:２或１:３以上的比率轉(zhuǎn)移到另外的容器中進(jìn)行培養(yǎng)，即為傳代培養(yǎng)；細(xì)胞“一代”指從細(xì)胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間，與細(xì)胞世代或倍增不同。在一代中，細(xì)胞培增３～６次。細(xì)胞傳代后，一般經(jīng)過三個(gè)階段：游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細(xì)胞分裂指數(shù)表示細(xì)胞增殖的旺盛程度，即細(xì)胞群的分裂相數(shù)/１００個(gè)細(xì)胞。一般細(xì)胞分裂指數(shù)介于０.２％～０.５％，腫瘤細(xì)胞可達(dá)３～５％；細(xì)胞接種２～３天分裂增殖旺盛，是活力時(shí)期，稱指數(shù)增生期(對(duì)數(shù)生長期)，適宜進(jìn)行各種試驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)步驟：１.將長成的培養(yǎng)細(xì)胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出，在超凈工作臺(tái)中倒掉瓶內(nèi)的培養(yǎng)液，加入少許消化液。(以液面蓋住細(xì)胞為宜)，靜置５～１０分鐘。２.在倒置鏡下觀察被消化的細(xì)胞，如果細(xì)胞變圓，相互之間不再連接成片，這時(shí)應(yīng)立即在超凈臺(tái)中將消化液倒掉，加入３～５ml新鮮培養(yǎng)液，吹打，制成細(xì)胞懸液。３.將細(xì)胞懸液吸出２ml左右，加到另一個(gè)培養(yǎng)瓶中并向每個(gè)瓶中分別加３ml左右培養(yǎng)液，蓋好瓶塞，送回二氧化碳培養(yǎng)箱中，繼續(xù)進(jìn)行培養(yǎng)。一般情況，傳代后的細(xì)胞在２小時(shí)左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上，２～４天就可在瓶內(nèi)形成單層，需要再次進(jìn)行傳代。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
PT67 Thawing小鼠逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝細(xì)胞系
細(xì)胞生長特性：貼壁
細(xì)胞的衰老:體外細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)證明：成纖維細(xì)胞：來自胎兒傳代５０次后衰老死亡，來自成人傳代２０次后衰老死亡(與具體年齡有關(guān)；來自小鼠傳代１４--２８次后衰老死亡，來自烏龜傳代９０--１２５次后衰老死亡。細(xì)胞衰老過程中會(huì)發(fā)生一系列的變化，包括：蛋白質(zhì)合成速度降低，已有蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)變化，特異蛋白質(zhì)成份出現(xiàn);同時(shí)，細(xì)胞核，線粒體，膜系統(tǒng)、骨架系統(tǒng)等都有結(jié)構(gòu)、功能的改變。細(xì)胞衰老原因，尚無定論，出現(xiàn)過好幾種理論與假說，其中得到較廣泛認(rèn)可的是“自由基損傷假說”。細(xì)胞凋亡:細(xì)胞的死亡是個(gè)體存活的正常現(xiàn)象，常見的細(xì)胞死亡形式有３種：壞死、凋亡和細(xì)胞毒性。多細(xì)胞生物的生命活動(dòng)中，因?yàn)榄h(huán)境因素的突然變化或病原物的入侵，導(dǎo)致一部分細(xì)胞死去，稱為細(xì)胞的病理死亡，或細(xì)胞壞死。壞死是細(xì)胞暴露于嚴(yán)重的物理或化學(xué)刺激時(shí)導(dǎo)致的細(xì)胞死亡；細(xì)胞毒性是由細(xì)胞或者化學(xué)物質(zhì)引起的單純的細(xì)胞殺傷事件，不依賴于其它兩種細(xì)胞死亡機(jī)理，如殺傷T細(xì)胞的細(xì)胞毒性作用。還有一種情況，一部分細(xì)胞的死亡是生物個(gè)體正常生命活動(dòng)(代謝、生長、發(fā)育、分化)的一個(gè)必要部分；似乎帶有“犧牲局部，保全整體”的意味。這種情況下的細(xì)胞死亡，明顯地受遺傳控制，稱為細(xì)胞凋亡。凋亡(Apoptosis)則是程序性的、正常的細(xì)胞死亡，是機(jī)體清除無用的或者不想要的細(xì)胞的手段。它與細(xì)胞壞死是兩個(gè)截然不同的過程，無論從形態(tài)學(xué)、生物學(xué)還是生化的特征來說，都有明顯的區(qū)別。細(xì)胞凋亡現(xiàn)象普遍存在于生物界。細(xì)胞凋亡與細(xì)胞增殖、分化和衰老起著互補(bǔ)與平衡的作用，在多細(xì)胞動(dòng)物的發(fā)育、形態(tài)建成與維持中扮演至關(guān)重要的角色。作為細(xì)胞的一種基本生命現(xiàn)象，凋亡失控的結(jié)果將是可怕的：凋亡不足時(shí)，易發(fā)生癌變、病毒性疾病和自身免疫疾病;而凋亡過量則可能產(chǎn)生獲得性免疫缺陷綜合征(HIV)、重癥肝炎與退行性神經(jīng)疾病，如老年性癡呆癥(Alzheimer""s disease)、帕金森氏癥(Parkinson""s disease)。因此研究細(xì)胞凋亡及其機(jī)理具有重要的理論和實(shí)踐意義。
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書
BCP1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：M4e細(xì)胞、SK-CO-1細(xì)胞、IOSE29細(xì)胞
Ramos 2G6.4C10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NSI/1-Ag4-1細(xì)胞、Hx147細(xì)胞、no.11細(xì)胞
P3J.HR1K細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-510A細(xì)胞、B16BL6細(xì)胞、SUSM1細(xì)胞
MM134細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H526細(xì)胞、SKOV-433細(xì)胞、KFB細(xì)胞
Potorous tridactylus Kidney 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE30細(xì)胞、RCC 7860細(xì)胞、Farage細(xì)胞
RPPVEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H209細(xì)胞、HCT FET細(xì)胞、UACC893細(xì)胞
Cloudman M3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Dami細(xì)胞、Hs600T細(xì)胞、H1650細(xì)胞
KLN 205細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-175細(xì)胞、COLO357細(xì)胞、Hep3B細(xì)胞
HTSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LIM-1215細(xì)胞、Ej138細(xì)胞、HTori-3細(xì)胞
H-2170細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WILL-2細(xì)胞、Y-79細(xì)胞、RN-c細(xì)胞
HNE-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KOPN-8細(xì)胞、CL1.0細(xì)胞、Hepa 1-6細(xì)胞
EFM192細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL8細(xì)胞、Hs 578.Bst細(xì)胞、G-292, clone A141B1細(xì)胞
Swiss3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T6-Swiss albino細(xì)胞、NCI-BL6細(xì)胞、NCIH661細(xì)胞
SNG-M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKMEL5細(xì)胞、OVCA432細(xì)胞、CCC-HIE-2細(xì)胞
JURKAT E-61細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MT-4細(xì)胞、SCC-1395細(xì)胞、SHIN-3細(xì)胞
P3X63 Ag8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Factor Dependent Cell-Paterson 1細(xì)胞、RFL 6細(xì)胞、MDAMB175VII細(xì)胞
SK.OV.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HME1細(xì)胞、NUGC2細(xì)胞、Emory University-2細(xì)胞
DC2.4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Psi-2-DAP細(xì)胞、PK136細(xì)胞、HNSC細(xì)胞
3T3-Swiss albino細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPTEC/TERT1細(xì)胞、SVG(P12)細(xì)胞、ANA-1細(xì)胞
H1666_DA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RK13細(xì)胞、NCI-SNU-387細(xì)胞、ARO細(xì)胞
HuTu 80細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT483細(xì)胞、MPC-83細(xì)胞、Nakata-1細(xì)胞
Colo205細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KBM-7細(xì)胞、RAG細(xì)胞、MHCC 97細(xì)胞
COLO 320DM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：4T1.2細(xì)胞、R2C細(xì)胞、C3H/10T1/2 CL8細(xì)胞
SUDHL8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI Ly19細(xì)胞、N1E115細(xì)胞、GM05887細(xì)胞
TE-14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-20細(xì)胞、C33A細(xì)胞、HEC1A細(xì)胞
End1/E6E7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vero E6細(xì)胞、HECCL-1細(xì)胞、H1869細(xì)胞
PT67 Thawing小鼠逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝細(xì)胞系
HSAS1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：hEM15A細(xì)胞、NSH細(xì)胞、rHSC-99細(xì)胞
MNNGHOS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BIC1細(xì)胞、V 79細(xì)胞、H28細(xì)胞
SK BR 03細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3NIH細(xì)胞、KTC1細(xì)胞、Hs 739.T細(xì)胞
SPCA1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hep-G2細(xì)胞、DHL-5細(xì)胞、CCD 966 SK細(xì)胞
Lu99A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16-F1細(xì)胞、Renal Carcinoma細(xì)胞、MBT2細(xì)胞
MFE-280細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSAS3細(xì)胞、JB6Cl30細(xì)胞、L- cell細(xì)胞
NCI-H865細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU-DHL-6細(xì)胞、AZ-521細(xì)胞、SU-DHL-2細(xì)胞
E6-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FRhK-4細(xì)胞、293 c18細(xì)胞、143 B細(xì)胞
HUCEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RKO細(xì)胞、SUD-4細(xì)胞、HT-29/CX-1細(xì)胞
BT-325細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU601細(xì)胞、Merwin Plasma Cell tumor-11細(xì)胞、NCI-H87細(xì)胞
TYKnu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1915細(xì)胞、OVSAHO細(xì)胞、Fortner's melanotic melanoma #3細(xì)胞
QGP 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-35細(xì)胞、LTEPsm細(xì)胞、CATH.a細(xì)胞
NCI-H441細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-366細(xì)胞、MN 60細(xì)胞、DITNC1細(xì)胞
X63-AG 8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAN-5細(xì)胞、OVCAR433細(xì)胞、H-157細(xì)胞
RCC4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KM933細(xì)胞、NCI-SNU-423細(xì)胞、HEK 293-F細(xì)胞
NBLAN5T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KFB細(xì)胞、HEL-299細(xì)胞、CEK細(xì)胞
MCF-7/AdrR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI no 8226細(xì)胞、NCIH28細(xì)胞、HBE135-E6E7細(xì)胞
Hepa-RG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF 763細(xì)胞、DHL4細(xì)胞、NCIH1373細(xì)胞
MUTZ-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1915細(xì)胞、NCIH1734細(xì)胞、DV-90細(xì)胞
COLO.205細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC3細(xì)胞、RCM1細(xì)胞、NCI-1155細(xì)胞
H-1650細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IPLB-SF 21細(xì)胞、DAKIKI Clone 1細(xì)胞、U 266細(xì)胞
Kelly細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OSC19細(xì)胞、CHL-IU細(xì)胞、CCD-1095Sk細(xì)胞
Jurkat Clone E6-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CNE2Z細(xì)胞、D-324MED細(xì)胞、RIN-m細(xì)胞
KAT-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2030細(xì)胞、NCIH1993細(xì)胞、CMT93細(xì)胞
A375.S2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS-153細(xì)胞、NH6細(xì)胞、NOZAWA細(xì)胞
NOZC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：F442A細(xì)胞、MFE-280細(xì)胞、Hs 636.T細(xì)胞
H-841細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM 102PT細(xì)胞、MES-SA細(xì)胞、CEM/0細(xì)胞
SKLMS-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTERA2D1細(xì)胞、ASPC1細(xì)胞、16-HBE14o細(xì)胞
HSC-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC3M-2B4細(xì)胞、OVCAR.8細(xì)胞、Ca Ski細(xì)胞
IM95細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CORL279細(xì)胞、Nakata-1細(xì)胞、Panc_04_03細(xì)胞
MDA-415細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUVEC細(xì)胞、Mouse INsulinoma 6細(xì)胞、C22 (Clara)細(xì)胞
U118細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HNE-2細(xì)胞、GM17346細(xì)胞、MRAEC細(xì)胞
MC-3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CESS細(xì)胞、A-172MG細(xì)胞、RFL 6細(xì)胞
PT67 Thawing小鼠逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝細(xì)胞系
Hs839.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC154細(xì)胞、VMM39細(xì)胞、Becker細(xì)胞
H-524細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SRA01/04細(xì)胞、FC33細(xì)胞、Rat Glomerular Endothelial細(xì)胞
MD Anderson-Metastatic Breast-436細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GLRK 13細(xì)胞、EJ1細(xì)胞、HTR-8/SVneo細(xì)胞
Roswell Park Memorial Institute 8402細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Centre Antoine Lacassagne-39細(xì)胞、NCI-H378細(xì)胞、CAL-33細(xì)胞
D341Med細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2405細(xì)胞、U20S細(xì)胞、MDA-MB-157細(xì)胞
NFHIOSE-29細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCM356細(xì)胞、NCI-H2029細(xì)胞、NCIH1341細(xì)胞
GBC-SD細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Alexander細(xì)胞、Hx-147細(xì)胞、PL5細(xì)胞
A10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL2細(xì)胞、alphaTC clone 6細(xì)胞、OV90細(xì)胞
KATOIII細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-841細(xì)胞、Z310細(xì)胞、NIH:OVCAR-4細(xì)胞
Anip973細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WI-38細(xì)胞、COLO-320-DM細(xì)胞、MDCKII細(xì)胞
F9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Roswell Park Memorial Institute 8402細(xì)胞、NCI-H2052細(xì)胞、A-1847細(xì)胞
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