"DH82 Thawing狗腎惡性組織細(xì)胞增生癥細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：腎；Golden Retrieve
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
DH82 Thawing狗腎惡性組織細(xì)胞增生癥細(xì)胞系
細(xì)胞生長：貼壁
細(xì)胞接收后的操作流程與注意事項(xiàng)：１)如果細(xì)胞為貼壁細(xì)胞，而收到時(shí)呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài)，請將懸浮的細(xì)胞即時(shí)離心，加１５%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)３天；同時(shí)原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細(xì)胞更換為１５%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)３天。３天后若原瓶或者新瓶中的細(xì)胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡，請及時(shí)聯(lián)系實(shí)驗(yàn)室技術(shù)人員會跟進(jìn)解決；２)貼壁細(xì)胞生長緩慢；適當(dāng)提高血清濃度(最高不能超過２０%)，或可根據(jù)該細(xì)胞生長密度，考慮胰酶消化后，轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng)；３)生長不均：貼壁細(xì)胞若出現(xiàn)分布不均，成島狀生長，可將細(xì)胞進(jìn)行消化，重懸打散細(xì)胞，加入新鮮培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
貼壁消化難題：１，先用PBS 把細(xì)胞洗兩遍，使瓶內(nèi)沒有血清了，減少對胰酶的中和，然后用新配的０.２５%的胰酶加入３ml左右，放在３７度，然后可以在細(xì)胞有些消化下來時(shí)，拿著瓶口，運(yùn)用手腕的力量輕輕震蕩瓶內(nèi)液體，這樣細(xì)胞很快就下來了，還不需要吹打，分散也均勻；２，成團(tuán)、絮狀：消化液里加入edta可以減少細(xì)胞成團(tuán)的現(xiàn)象，血清可以終止胰酶的作用，如果是進(jìn)口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉，也可以不倒，直接加血清終止，如果消化液中加入了edta的話，就要將消化液倒干凈，如果細(xì)胞貼壁要求不是很嚴(yán)格的話，一般不需要進(jìn)行離心。鼻咽癌細(xì)胞的貼壁能力很強(qiáng)，用０.５%胰酶(含０.１%EDTA)一般要消化１２~１５min。用PBS洗滌時(shí)要洗凈殘余的培養(yǎng)基，加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細(xì)胞室溫下受損以及在此溫度時(shí)胰酶活性最強(qiáng))至細(xì)胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細(xì)胞脫落(有流下來的趨勢)，隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細(xì)胞很多且需要大量細(xì)胞實(shí)驗(yàn)，則不能棄去胰酶)，加入培養(yǎng)基仔細(xì)吹打(不能用無血清培養(yǎng)基或者PBS替代，否則細(xì)胞聚集成團(tuán)塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細(xì)胞或細(xì)胞碎片)；消化過度：馬上用培養(yǎng)基中和，用吸管吹打細(xì)胞，收集全部的細(xì)胞到以無菌的離心管中８００RPM ３分鐘。棄上清，用全培重懸，換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng)，狀態(tài)不好的細(xì)胞在培養(yǎng)的過程中會死亡脫落，在換液的時(shí)候可以清除掉！
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
DH82 Thawing狗腎惡性組織細(xì)胞增生癥細(xì)胞系
細(xì)胞生長特性：貼壁
細(xì)胞的凍存：為避免污染造成的損失，最小化連續(xù)細(xì)胞系的遺傳改變和避免有限細(xì)胞系的老化和轉(zhuǎn)化，需要凍存哺乳細(xì)胞。凍存細(xì)胞前，細(xì)胞應(yīng)該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來凍存細(xì)胞。對于包含有血清的培養(yǎng)基，成分可能如下：包含１０%甘油的完全培養(yǎng)基；包含１０%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基；５０%細(xì)胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%甘油的新鮮培養(yǎng)基或５０%細(xì)胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對于無血清培養(yǎng)基，一些普通的培養(yǎng)基成分可能是：５０%細(xì)胞條件無血清培養(yǎng)基和５０%包含有７.５%二甲基亞砜的新鮮的無血清培養(yǎng)基或包含有７.５%二甲基亞砜和１０%細(xì)胞培養(yǎng)級BSA的新鮮無血清培養(yǎng)基。懸浮細(xì)胞凍存：計(jì)數(shù)將要凍存的活細(xì)胞。細(xì)胞應(yīng)該處于對數(shù)生長期。以大約２００～４００g離心５分鐘沉淀細(xì)胞，使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細(xì)胞。以１×１０(７)到５×１０(７)細(xì)胞/ml密度，在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細(xì)胞，或者以０.５×１０(７)到１×１０(７)在無血清培養(yǎng)基中，再次懸浮細(xì)胞。分裝進(jìn)凍存管，將凍存管置于濕冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細(xì)胞以１℃/分鐘進(jìn)行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進(jìn)行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。貼壁細(xì)胞凍存：使用分離試劑從基層分離細(xì)胞，分離時(shí)盡可能溫和，使對細(xì)胞的損傷減少到最小。在完全生長培養(yǎng)基中，再次懸浮分離細(xì)胞，確定有活力細(xì)胞數(shù)。以大約２００g離心５分鐘沉淀細(xì)胞。使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細(xì)胞。以５×１０(６)到１×１０(６)細(xì)胞/ml密度，在凍存液中懸浮細(xì)胞。分裝進(jìn)凍存管，將凍存管置于濕的冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細(xì)胞以１℃/分鐘進(jìn)行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進(jìn)行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書
CoCL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]細(xì)胞、143BTK-細(xì)胞、J774A.1細(xì)胞
CHL-CL-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AE1201細(xì)胞、H-2228細(xì)胞、H125細(xì)胞
H-2342細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT116/L細(xì)胞、LoVo細(xì)胞、H1563細(xì)胞
SUPB-15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD-841-CoN細(xì)胞、HCT-8細(xì)胞、NCI-H446細(xì)胞
SBC-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SACC-LM細(xì)胞、Soleus clone 8細(xì)胞、253J-Bladder-V細(xì)胞
ROS17/2.8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WERI細(xì)胞、HOS TE 85細(xì)胞、SKNAS細(xì)胞
MC3T3, E1 subgroup-4 clone細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ketr-3細(xì)胞、HAPI細(xì)胞、C-6細(xì)胞
Hs 636 T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNG-M細(xì)胞、Hs.27細(xì)胞、A-101D細(xì)胞
RPMI6666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF/CEM-C7細(xì)胞、MPP89細(xì)胞、DH 82細(xì)胞
Sup T-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTERA-2 cl.D1細(xì)胞、MC116細(xì)胞、SK-MEL-MeWo細(xì)胞
M-NFS-60細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ACC-2細(xì)胞、EOL1細(xì)胞、Caco-2 BBe細(xì)胞
MCF 7B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：J-111細(xì)胞、CCD 1112SK細(xì)胞、Hep 2細(xì)胞
HLE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLC細(xì)胞、D10G41細(xì)胞、NB4細(xì)胞
TALL-1 [Human adult T-ALL]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-1155細(xì)胞、H-2052細(xì)胞、Panc05.04細(xì)胞
SCL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-175-VII細(xì)胞、T-ALL-1細(xì)胞、RH30SJ細(xì)胞
PC-14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 982細(xì)胞、8226細(xì)胞、SK-MES1細(xì)胞
624 MEL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNUC1細(xì)胞、CCD-841CoN細(xì)胞、COLO-684細(xì)胞
MKN 45細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：hRPTC細(xì)胞、SK-MEL-2-LUC細(xì)胞、T2細(xì)胞
NT2-D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lewis Lung細(xì)胞、SK-MES細(xì)胞、A253細(xì)胞
Hs 604.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2073細(xì)胞、L(TK-)細(xì)胞、U266-B1細(xì)胞
Wien 133細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1404細(xì)胞、KLM-1細(xì)胞、MNNG細(xì)胞
Wien 133細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1404細(xì)胞、KLM-1細(xì)胞、MNNG細(xì)胞
Medical Research Council cell strain-9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH441細(xì)胞、T24(ECV304)細(xì)胞、H4-II-E-C3細(xì)胞
MHCC97L細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MESSADX5細(xì)胞、COLO 741細(xì)胞、CEM-C7細(xì)胞
MLMEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-266細(xì)胞、GDM-1細(xì)胞、HuT-78細(xì)胞
HS 445T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA.MB.435細(xì)胞、PK15細(xì)胞、L-cells細(xì)胞
DH82 Thawing狗腎惡性組織細(xì)胞增生癥細(xì)胞系
H-1930細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PaCa2細(xì)胞、HS-294-T細(xì)胞、253J-BV細(xì)胞
U-251_MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKGT4細(xì)胞、MDA-MB-134VI細(xì)胞、A673細(xì)胞
Alexander cells細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK 293 c18細(xì)胞、M2-10B4細(xì)胞、CAL 85-1細(xì)胞
H-1793細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ECC-10細(xì)胞、Swiss 3T6細(xì)胞、SCC-25細(xì)胞
KYSE 510細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1105細(xì)胞、RK 13細(xì)胞、Hs737T細(xì)胞
C8D1A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1930細(xì)胞、HELA-GFP細(xì)胞、Dunn LM8細(xì)胞
Normal Rat, August 3, 1983細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HL-60 clone15細(xì)胞、Rat 1細(xì)胞、HOK細(xì)胞
SW839細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RC-2細(xì)胞、Kit 225 K6細(xì)胞、SNU182細(xì)胞
AtT20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U138MG細(xì)胞、HS-766T細(xì)胞、PA12細(xì)胞
WM115F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WIL2S細(xì)胞、KPL-1細(xì)胞、LLC PK1細(xì)胞
PAI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UPCISCC090細(xì)胞、MS751細(xì)胞、H1404細(xì)胞
H-157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U266 B1細(xì)胞、NCI-H1876細(xì)胞、Panc10.05細(xì)胞
Panc-1-P細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H460細(xì)胞、GM03570E細(xì)胞、PLA801-95D細(xì)胞
NCI-H2591細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AML 12細(xì)胞、MC38細(xì)胞、Tu 212細(xì)胞
JC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI H157細(xì)胞、THEECs細(xì)胞、MDCKII-WT細(xì)胞
LS513細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI Ly1細(xì)胞、A-10細(xì)胞、NCI-H102細(xì)胞
U118MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2141細(xì)胞、TCCSUP細(xì)胞、SNU-878細(xì)胞
Ej138細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hi5細(xì)胞、MB-49細(xì)胞、G422細(xì)胞
LS513細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI Ly1細(xì)胞、A-10細(xì)胞、NCI-H102細(xì)胞
MM1.S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TKB1細(xì)胞、LM8細(xì)胞、V-79細(xì)胞
M3 Clone M-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HMy2.CIR細(xì)胞、HN-6細(xì)胞、T/G HA-VSMC細(xì)胞
NS20Y細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MA-782細(xì)胞、bEnd.3[BEND3]細(xì)胞、Mc Coy細(xì)胞
Madin Darby Canine Kidney細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：M20 [Human melanoma]細(xì)胞、SK-MEL5細(xì)胞、TM-4細(xì)胞
BEL 7402細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTR-8/SVneo細(xì)胞、SW403細(xì)胞、NT-2細(xì)胞
WM239細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03320D細(xì)胞、SNU-423細(xì)胞、TU 686細(xì)胞
H35細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OV 2008細(xì)胞、6T-CEM細(xì)胞、OVCAR8細(xì)胞
Chang liver細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COS-7細(xì)胞、IB-RS2細(xì)胞、L-6TG細(xì)胞
NTERA-2cl.D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DHBE細(xì)胞、MDA PCa 2b細(xì)胞、KCL22S細(xì)胞
MCF7-CTRL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK HEP-1細(xì)胞、RS411細(xì)胞、Caco-2細(xì)胞
SJ-Rh 30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LLC PK1細(xì)胞、H716細(xì)胞、RKN細(xì)胞
SUSM1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 527細(xì)胞、KNS-42細(xì)胞、Eca109細(xì)胞
SUDHL4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3-Swiss albino細(xì)胞、MPC-11細(xì)胞、GM0637細(xì)胞
GC-1spg細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK.MEL.2細(xì)胞、NCI-H1299細(xì)胞、YES 2細(xì)胞
DH82 Thawing狗腎惡性組織細(xì)胞增生癥細(xì)胞系
Hep2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-660細(xì)胞、hFOB1.19細(xì)胞、LICR-LON-HN6-R細(xì)胞
MCA205細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JB-6細(xì)胞、COLO 320DM細(xì)胞、293c18細(xì)胞
MCA205細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JB-6細(xì)胞、COLO 320DM細(xì)胞、293c18細(xì)胞
NCI-H526細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3-X63-Ag8.653細(xì)胞、HS-940-T細(xì)胞、MCMEC細(xì)胞
CAL33細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI-1846細(xì)胞、Menschliche Und Tierische Zellkulture-1細(xì)胞、F-81細(xì)胞
WiDrTC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-251細(xì)胞、H-1954細(xì)胞、CHO-K1細(xì)胞
BEND細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SJ-Rh 30細(xì)胞、HBMEC細(xì)胞、MOLP-2細(xì)胞
NS1-Ag 4/1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Meat Animal Research Center-145細(xì)胞、AMO-1細(xì)胞、ESC細(xì)胞
Swiss 3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JROECL 19細(xì)胞、624細(xì)胞、HNE2細(xì)胞
H-2009細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTera 2細(xì)胞、SJSA-1細(xì)胞、Caco2-BBE細(xì)胞
SW-837細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3HR-1細(xì)胞、WM451Lu細(xì)胞、TCam-2細(xì)胞
"