"FRhK-4 Thawing恒河猴胚腎細胞系
細胞背景資料:胚胎;腎;自發(fā)永生;雌性
細胞形態(tài):上皮細胞樣
FRhK-4 Thawing恒河猴胚腎細胞系
細胞生長:貼壁
購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,原因比較復雜,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質不佳;血清使用錯誤或血清的品質不佳;解凍過程錯誤;冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心;懸渾細胞誤認為死細胞;培養(yǎng)溫度使用錯誤;細胞置于-80℃太久等。建議嚴格參照ATCC的標準操作規(guī)程進行細胞復蘇、凍存等工作。欲將一般動物細胞離心下來,其離心速率應為多少轉速?欲回收動物細胞,其離心速率一般為300×g(約1O(jiān)OOrpm),5-10分鐘,轉速過高或離心時間過長都將造成細胞死亡。合適的離心轉速是根據(jù)相對離心力決定。RCF=1.119×105×r×(rpm)2,其中r為離心機轉軸中心與離心套管底部內壁的距離;rpm為離心機每分鐘的轉數(shù);RCF(relative centrifugal force)為相對離心力,以重力加速度g(980.66cm/s2)的倍數(shù)來表示單位。
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞株(系)的使用,為醫(yī)學研究和測試工作帶來了極大的方便。但細胞的傳代是有限制的,長期連續(xù)傳代的細胞,不僅消耗大量的人力和物力,而且細胞的生長與形態(tài)等會有一定退變或轉化,因而細胞失去原有的遺傳特性,有時還會由于細胞污染而造成傳代中斷,種子丟失。因此,在實際工作中常需凍存一定數(shù)量的細胞,以備替換使用。細胞冷凍與復蘇是細胞培養(yǎng) 室的常規(guī)工作和通用技術。目前,細胞凍存最常用的技術是液氮冷凍保存法,主要采用加適量保護劑的緩慢冷凍法凍存細胞。細胞在不加任何保護劑的情況下直接冷凍,細胞內外的水分會很快形成冰晶,從而引起一系列不良反應。如細胞脫水使局部電解質濃度增高,pH值改變,部分蛋白質由于上述原因而變性,引起細胞內部空間結構紊亂,溶酶體膜由此遭到損傷而釋放出溶酶體酶,使細胞內結構成分造成破壞,線粒體腫脹,功能丟失,并造成能量代謝障礙。胞膜上的類脂蛋白復合體也易破壞引起細胞膜通透性的改變,使細胞內容物丟失。如果細胞內冰晶形成較多,隨冷凍溫度的降低,冰晶體積膨脹造成細胞核DNA空間構型發(fā)生不可逆的損傷,而致細胞死亡。因此,細胞冷凍技術的關鍵是盡可能地減少細胞內水分,減少細胞內冰晶的形成。采用甘油或二甲基亞砜作保護劑,這兩種物質分子量小,溶解度大,易穿透細胞,可以使冰點下降,提高細胞膜對水的通透性,且對細胞無明顯毒性。慢速冷凍方法又可使細胞內的水分滲出細胞外,減少胞內形成冰結晶的機會,從而減少冰晶對細胞的損傷。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
FRhK-4 Thawing恒河猴胚腎細胞系
細胞生長特性:貼壁
細胞的凍存:為避免污染造成的損失,最小化連續(xù)細胞系的遺傳改變和避免有限細胞系的老化和轉化,需要凍存哺乳細胞。凍存細胞前,細胞應該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來凍存細胞。對于包含有血清的培養(yǎng)基,成分可能如下:包含10%甘油的完全培養(yǎng)基;包含10%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基;50%細胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%甘油的新鮮培養(yǎng)基或50%細胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對于無血清培養(yǎng)基,一些普通的培養(yǎng)基成分可能是:50%細胞條件無血清培養(yǎng)基和50%包含有7.5%二甲基亞砜的新鮮的無血清培養(yǎng)基或包含有7.5%二甲基亞砜和10%細胞培養(yǎng)級BSA的新鮮無血清培養(yǎng)基。懸浮細胞凍存:計數(shù)將要凍存的活細胞。細胞應該處于對數(shù)生長期。以大約200~400g離心5分鐘沉淀細胞,使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細胞。以1×10(7)到5×10(7)細胞/ml密度,在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細胞,或者以0.5×10(7)到1×10(7)在無血清培養(yǎng)基中,再次懸浮細胞。分裝進凍存管,將凍存管置于濕冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內開始冷凍步驟。細胞以1℃/分鐘進行冷凍,可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉移到液氮中貯存。貼壁細胞凍存:使用分離試劑從基層分離細胞,分離時盡可能溫和,使對細胞的損傷減少到最小。在完全生長培養(yǎng)基中,再次懸浮分離細胞,確定有活力細胞數(shù)。以大約200g離心5分鐘沉淀細胞。使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細胞。以5×10(6)到1×10(6)細胞/ml密度,在凍存液中懸浮細胞。分裝進凍存管,將凍存管置于濕的冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內開始冷凍步驟。細胞以1℃/分鐘進行冷凍,可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉移到液氮中貯存。
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
HCC2218細胞系相關產品:Hs 819.T細胞、rHSC-99細胞、HCC-78細胞
NCI-H889細胞系相關產品:P3 88 D1細胞、MCF.10A細胞、BCAP37細胞
KMM-1細胞系相關產品:MCF12F細胞、RPMI 2650細胞、CCRFCEM細胞
Hs840T細胞系相關產品:BTI-Tn5B14細胞、NCI H548細胞、HT-55細胞
MiaPaca.2細胞系相關產品:MGHU1細胞、L-428細胞、MDA-MB-330細胞
Anip973細胞系相關產品:WI-38細胞、COLO-320-DM細胞、MDCKII細胞
K-1735細胞系相關產品:786.O細胞、Calu 6細胞、HSAS3細胞
TE15細胞系相關產品:N-Tera-2細胞、PAEC細胞、4T1-LUC細胞
38C-13細胞系相關產品:MAVER細胞、HT-3細胞、U343細胞
LC-1Sq細胞系相關產品:NCIH2172細胞、Hs 281.T細胞、Ramos G6.C10細胞
NCI-H2107細胞系相關產品:MCF-7/ADR-RES細胞、COLO206F細胞、K422細胞
D407細胞系相關產品:NIH:OVCAR-3細胞、IB-RS-2細胞、Panc5.04細胞
SNU423細胞系相關產品:OCILY-10細胞、GOTO細胞、EFM192A細胞
Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2細胞系相關產品:HFB細胞、PL-5細胞、MCF 7B細胞
PANC 327細胞系相關產品:HepG2/C3A細胞、LS174細胞、RCC-4細胞
NCI-H2066細胞系相關產品:Panc_08_13細胞、EFM192C細胞、TGBC-11-TKB細胞
IMCD-3細胞系相關產品:NCI-H2009細胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2細胞、LIM 1215細胞
IPAM-WT細胞系相關產品:Mink細胞、Hs 822.T細胞、BEND細胞
LMH細胞系相關產品:SAOS 2細胞、Madin-Darby Canine Kidney細胞、NCI-H920細胞
MPC-11細胞系相關產品:U2OS細胞、SJSA細胞、HIT.T15細胞
CAL 85-1細胞系相關產品:Intestinal Epithelioid Cell line No. 18細胞、HIBEpiC細胞、SCC-7細胞
CAL 85-1細胞系相關產品:Intestinal Epithelioid Cell line No. 18細胞、HIBEpiC細胞、SCC-7細胞
NCI-H102細胞系相關產品:KHYG1細胞、B/C3T3細胞、WIL2 S細胞
PSN-1細胞系相關產品:BJ1細胞、NB-19細胞、293E細胞
MKN 45細胞系相關產品:hRPTC細胞、SK-MEL-2-LUC細胞、T2細胞
NCI-H2342細胞系相關產品:174xCEM.T2細胞、NCIH889細胞、hEEC細胞
FRhK-4 Thawing恒河猴胚腎細胞系
WRL-68細胞系相關產品:LS411細胞、MeT-5A細胞、SUDHL-5細胞
OC-3-VGH細胞系相關產品:SUDHL-6細胞、PJ34細胞、SUD-4細胞
T47-D細胞系相關產品:L 1210細胞、EFM-19細胞、CAL 33細胞
SW480細胞系相關產品:HPAEpiC細胞、SK-LMS-1細胞、TK-1細胞
H-226細胞系相關產品:RSC96細胞、CAL 62細胞、NCI-H28細胞
CAL 39細胞系相關產品:MM1S細胞、NCI-H1522細胞、MMAc.SF細胞
TF-1a細胞系相關產品:Karpas299細胞、KYSE-140細胞、S37細胞
KYSE 450細胞系相關產品:Med 283細胞、WM239細胞、SNU354細胞
NCIH1694細胞系相關產品:GC1-SPG細胞、S3-HeLa細胞、Hs 636 T細胞
IR983F細胞系相關產品:NK-92細胞、32D clone 3細胞、EL-4細胞
32Dc3細胞系相關產品:L-M(TK-)細胞、BMSCs(mBMSCs)細胞、BE(2)M-17細胞
Duck embryo細胞系相關產品:ECC12細胞、SCLC21H細胞、Sp 2817細胞
HET-1A細胞系相關產品:GM3190細胞、Caco2-BBE細胞、LX-2細胞
ND7/23細胞系相關產品:BA/F3細胞、LN229細胞、P3X63 Ag8細胞
Hs839T細胞系相關產品:U-87MG ATCC細胞、PANC0203細胞、SK-Hep1細胞
H19-7細胞系相關產品:GM07404細胞、OCI AML2細胞、SCL-II細胞
B16BL6細胞系相關產品:HEI193細胞、Rat Basophilic Leukemia-1細胞、MSF細胞
NCIH1793細胞系相關產品:D-324 Med細胞、GM04154B細胞、NCIH82細胞
NCI-H2591細胞系相關產品:AML 12細胞、MC38細胞、Tu 212細胞
KAT-5細胞系相關產品:NCIH2030細胞、NCIH1993細胞、CMT93細胞
MV4II細胞系相關產品:Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8細胞、KYSE520細胞、HFLS-RA細胞
TE7細胞系相關產品:NCI-H1417細胞、CPA 47細胞、UM-UC-14細胞
NS-1-Ag4-1細胞系相關產品:H661細胞、Tb1Lu細胞、OUMS27細胞
SK-MES細胞系相關產品:624-mel細胞、BBE細胞、MPP 89細胞
VMRCRCZ細胞系相關產品:BE(2)-C細胞、SL1細胞、NU-GC-3細胞
P-19細胞系相關產品:HPAF/CD18細胞、184A1細胞、Spodoptera frugiperda clone 9細胞
MDA231細胞系相關產品:JURKAT E-61細胞、Panc813細胞、KU-812細胞
OV 1063細胞系相關產品:Pt K2 (NBL-5)細胞、B6Tert-1細胞、RL細胞
HCC0202細胞系相關產品:B-CPAP細胞、HT-29/CX-1細胞、OV-1063細胞
NCI-H1869細胞系相關產品:LS-1034細胞、ssMCF7細胞、TGHAVSMC細胞
ROS17/28細胞系相關產品:Immortalized Human Hepatocytes細胞、MC57G細胞、IGROV-1細胞
AR4IP細胞系相關產品:D341 Med細胞、IEC 6細胞、SUDHL-16細胞
PLB-985細胞系相關產品:NCI-H676細胞、CAL 12細胞、KMH2細胞
FRhK-4 Thawing恒河猴胚腎細胞系
NCI-H1666細胞系相關產品:Mouse Bladder Tumor line-2細胞、MDA-MB-435 S細胞、GM02131細胞
HELA-GFP細胞系相關產品:251MG細胞、NCI-128細胞、HuPT4細胞
A498細胞系相關產品:H-196細胞、C2-C12細胞、OSC19細胞
Hs343T細胞系相關產品:Colon 26細胞、HPDLF細胞、FAO-1細胞
NCI-H524細胞系相關產品:DHL8細胞、IMR32細胞、UPCI-SCC090細胞
Co 115細胞系相關產品:COLO829細胞、JHH7細胞、NCIH1688細胞
PASMCS細胞系相關產品:138MG細胞、P3 88 D1細胞、DLD1細胞
D-324MED細胞系相關產品:SF 539細胞、A-875細胞、OE-33細胞
3D4/21細胞系相關產品:32D CL3細胞、MNNG/HOS Cl #5細胞、TFH細胞
A-427細胞系相關產品:D407細胞、Centre Antoine Lacassagne-62細胞、SL-1細胞
SKMES細胞系相關產品:THLE2細胞、HcerEpic細胞、hFOB1.19細胞
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