"V79 Thawing倉鼠肺細胞系
細胞背景資料：肺；自發(fā)永生；雄性
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
V79 Thawing倉鼠肺細胞系
細胞生長：貼壁
細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結：１)一般客戶拿到細胞后，應該注意什么？客戶收到細胞后先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細胞１００X，２００X各一張)，排除細胞本身污染的情況；收到細胞未開封，出現污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過８０%匯合度時，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下１０ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過８０%匯合度時，請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞，吸出培養(yǎng)液、１０００轉/分鐘離心２分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快遞細胞多久能到，是寄凍存的細胞還是復蘇好的細胞？我們采用快遞發(fā)貨，一般外地２--３天，寄細胞前請確認當地溫度，如果氣溫低于４度的，則采用郵寄凍存細胞；３)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應之細胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基，細胞大都無法立即適應，造成細胞無法存活；４)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的種類和品質對于細胞的生長會產生極大的影響。來自不同物種的血清，在一些物質或分子的量或內容物上都有所不同，血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞復蘇后貼壁細胞較少的問題分析：總結１：復蘇過程沒有問題，是否是從液氮拿出直接放入溫水，還有培養(yǎng)箱，二氧化碳濃度，培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS １５-２０%，看看能否幫助貼壁，當然也需要考慮血清問題，還有確信拿來的細胞沒問題?？偨Y２：首先應該懷疑凍存，實際上復蘇出問題的可能非常小，因為操作簡單，而且死板。１、你凍存的時候是不是消化的時間過長，這是一般人所注意不到的，即使書上也不講這個問題，太長的消化時間會讓細胞復蘇時失去貼壁能力，表現為先貼后死，原因是在你復蘇的時候細胞已進入凋亡程序，不可逆轉的死亡。２、你的凍存液好不好，是什么，甘油還是DMSO，質量非常重要，否則也會死亡。３、你的凍存液的量加的是不是太多，ATCC推薦是不超過７%，大于５%，太多也不好。４、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻，這個有一些影響，但不算太大。５、你的凍存是否按部就班，就是所溫度梯度是不是把握嚴格，很多人容易忘卻這個事情，因為這個東西流程長。６、如果你細胞污染，你是否能很快看到，我比我的導師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。７、你的細胞在凍存前是否過密。還有，不贊成孵箱污染這個概念的，所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話，這個細菌是源于孵箱的，但這不代表孵箱污染，因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌，問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找，以后就不犯同樣的問題，這個很重要，不能靠猜，否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題，這個見得太多了，別不當會事。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數國外著名大學建系
V79 Thawing倉鼠肺細胞系
細胞生長特性：貼壁
最近在培養(yǎng)細胞時，發(fā)現其狀態(tài)不是很好，很容易扎堆生長，用胰酶消化的時候也是一團一團地被消化下來，很難把它們吹散成一個一個細胞。而且長得也挺快也挺不均勻的，傳代的第二天，有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢？你好，我養(yǎng)的細胞和你一樣，消化下來也是一團的，但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻，分皿后在鏡下看一看，移動培養(yǎng)皿的時候盡量動作輕，避免晃動。細胞生長挺快，那么細胞的增殖能力應該較強。胰酶消化成團的問題我覺得有以下幾種可能：一、細胞消化后吹打不均勻，造成細胞成團生長：二、細胞細化太過，細胞成片脫落，吹打時沒有受力點，細胞聚團生長。解決辦法：根據細胞生長的情況進行多次消化，將同次消化下來的細胞放在一個細胞培養(yǎng)瓶內。貼壁細胞傳代培養(yǎng)：一般步驟為：真空泵吸走培養(yǎng)基，１XPBS漂洗兩次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿為例），３７度放置數分鐘，輕拍培養(yǎng)瓶使細胞自瓶壁脫落，加入適量血清，以吸管上下吸放數次以打散細胞團塊，離心后加入新鮮培養(yǎng)基，按比例轉移至新皿。細胞的傳代最重要的是胰酶處理時間，若胰酶處理太久，容易造成細胞貼壁不緊，顯微鏡下觀察立體感不強，嚴重的時候甚至會造成細胞死亡。我談談個人經驗：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１幾種癌細胞處理時間可適當放長，一般處理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比較容易脫落，２min足矣，P１９Cl６和２９３細胞貼壁不緊，可在PBS漂洗后，直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
HPAEpiC細胞系相關產品：Colon-38細胞、IMR-90細胞、hRPTC細胞
Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS細胞系相關產品：OCLY8細胞、HCC-15細胞、HPAF細胞
DU_145細胞系相關產品：ETCC-007細胞、FT-293細胞、RCC 7860細胞
SACCLM細胞系相關產品：HEK 293細胞、HCT/Taxo1細胞、Det. 562細胞
RWPE-2細胞系相關產品：C 643細胞、SF-539細胞、NT2D1細胞
GRSL細胞系相關產品：Granta519細胞、DBTRG-05MG細胞、NCI-H1836細胞
MV-522細胞系相關產品：SUM 102細胞、451-LU細胞、Caki2細胞
N9細胞系相關產品：KB細胞、KU-812-F細胞、HT144mel細胞
KRC Y細胞系相關產品：L540細胞、B-95-8細胞、McG-1細胞
NCI-H647細胞系相關產品：HCCLM6細胞、SPC-A-1細胞、Intestinal Epithelioid Cell line No. 6細胞
Earle's L cells細胞系相關產品：MGECs細胞、NCI-SNU-620細胞、JHH7細胞
ABC1細胞系相關產品：Hs-852-T細胞、Sci-1細胞、R1800[RA]細胞
HCV 29細胞系相關產品：Ly19細胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5細胞、OSRC2細胞
Jurkat clone A3細胞系相關產品：LL/2 (LLC1)細胞、RTMC細胞、RIN m5F細胞
HFSF細胞系相關產品：526-mel細胞、LLC-MK-2細胞、KMS26細胞
HEY-A8細胞系相關產品：H1395細胞、D10細胞、VMRC-RCZ細胞
B5537SKIN細胞系相關產品：MLTC-1細胞、HT 29細胞、OVCAR-3細胞
OVCAR432細胞系相關產品：LU-65M細胞、Malme-3M細胞、H-2030細胞
Vx-2細胞系相關產品：HuPT3細胞、GL-261細胞、Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50細胞
TE8細胞系相關產品：RASMC細胞、NKM-1細胞、PLA-801D細胞
C2-C12細胞系相關產品：AQ-Mel細胞、WEHI3細胞、KYSE-450細胞
C2-C12細胞系相關產品：AQ-Mel細胞、WEHI3細胞、KYSE-450細胞
3 LL細胞系相關產品：UM-UC14細胞、NCI-H1954細胞、GM03671細胞
NCI-H-82細胞系相關產品：BMDC細胞、HOS-TE85細胞、M619細胞
HuT-102細胞系相關產品：102PT細胞、SK-UT-1細胞、P3-X63Ag8細胞
CMT-93細胞系相關產品：Bac1 2F5細胞、D341MD細胞、H1105細胞
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253J-Bladder-V細胞系相關產品：LA 4細胞、KMST-6細胞、PAI細胞
MKN1細胞系相關產品：MDCK2細胞、KLN-205細胞、Ly3細胞
Metastatic Variant 522細胞系相關產品：ZR-75-30細胞、MV3細胞、MKN-74細胞
HPAF細胞系相關產品：Hs 729細胞、SKMEL-24細胞、SNK1細胞
HT115細胞系相關產品：OCI-AML-5細胞、SNU5細胞、SKMEL3細胞
WERI細胞系相關產品：OV3121細胞、AHH1細胞、HAC-84細胞
VM Cub 1細胞系相關產品：INS1E細胞、HLEpiC細胞、22Rv1細胞
MCA38細胞系相關產品：U-hth74細胞、DMS 273細胞、P3/NSI/1-AG4-1細胞
Wien-133細胞系相關產品：NCI-322細胞、NL20細胞、NCIH2030細胞
OVCA 433細胞系相關產品：Japanese Tissue Culture-28細胞、HPAF-II細胞、H-1944細胞
H727細胞系相關產品：OCM-1細胞、A2780/CP70細胞、NCI-H358細胞
HEM細胞系相關產品：SW 1116細胞、KASUMI6細胞、NCI-446細胞
HFT-8810細胞系相關產品：NCI-H1155細胞、TJ905細胞、Capan2細胞
H3255_DA細胞系相關產品：HCS2/8細胞、KPL-4細胞、OCI Ly3細胞
143 B細胞系相關產品：NCI-SNU-407細胞、ARO-81細胞、SKM-1細胞
C2-C12細胞系相關產品：AQ-Mel細胞、WEHI3細胞、KYSE-450細胞
HCC1143細胞系相關產品：Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3細胞、NL-20細胞、MDCK-II細胞
R.K.13細胞系相關產品：MDA-MB-134-VI細胞、Microbiological Associates-104細胞、OCI AML5細胞
NCIH1650細胞系相關產品：MUTZ1細胞、Anip973細胞、32Dc3細胞
DU 4475細胞系相關產品：WRL68細胞、32D.cl3細胞、K562/ADR細胞
H-2141細胞系相關產品：67NR細胞、TK10細胞、bEND.3細胞
MHH-CALL-2細胞系相關產品：HIEC細胞、KYSE 270細胞、OCI/AML-3細胞
WERI-Rb 1細胞系相關產品：C4-2細胞、RK13細胞、Y3-Ag1,2,3細胞
MH-S細胞系相關產品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1細胞、PC12(高分化)細胞、KE39細胞
16HBE14o-細胞系相關產品：Panc 3.27細胞、SGC7901細胞、HeLa/S3細胞
UK Pan-1細胞系相關產品：HPMEC細胞、DAN-G細胞、RBE4細胞
H520細胞系相關產品：EoL-1 cell細胞、NCIH660細胞、MLA-144細胞
RS4:11細胞系相關產品：PC-3/M細胞、Ramos (RA 1)細胞、COLO-394細胞
MDA-MB-175細胞系相關產品：293T/17細胞、MDA-MB-453細胞、UCH-1細胞
MB-49細胞系相關產品：HT29細胞、KOPN-8細胞、UC-3細胞
HCV-29細胞系相關產品：E.L.4細胞、NCI-H-295細胞、Hmy.2 CIR細胞
Tn 5B1-4細胞系相關產品：H2029細胞、OV1/P細胞、Centre Antoine Lacassagne-78細胞
IPLB-SF 21細胞系相關產品：HITT15細胞、RIN Cl-5F細胞、CLL-CII細胞
V79 Thawing倉鼠肺細胞系
HEK-293-EBNA細胞系相關產品：32Dcl3細胞、Bac 1.2F5細胞、BALB/3T3 clone A31細胞
CFPAC1細胞系相關產品：PJ34細胞、143B TK-細胞、G-402細胞
CFPAC1細胞系相關產品：PJ34細胞、143B TK-細胞、G-402細胞
SW-480細胞系相關產品：NCI-H78細胞、MSB-1細胞、BALL-1細胞
LS-411細胞系相關產品：H1693細胞、MC3T3-E1 Subclone 14細胞、OVCA433_Bast細胞
NCI-H1105細胞系相關產品：NCI-H1694細胞、RKO-E6細胞、Sup T-1細胞
RT4-D6P2T細胞系相關產品：Jiyoye(P-2003)細胞、IAR 20細胞、QSG-7701細胞
MDA MB 134VI細胞系相關產品：KYSE410細胞、DHL-4細胞、PK-136細胞
Psi2-DAP細胞系相關產品：Ca759細胞、UACC812細胞、TC-1[JHU-1]細胞
Pa14C細胞系相關產品：DLD 1細胞、HL7702細胞、RPMI no. 8226細胞
OCILY10細胞系相關產品：HLF-a細胞、RSMC細胞、C3H10T1/2 clone8細胞
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