"BT-549 cell line人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：該細(xì)胞１９７８年由W.G.Coutinho和E.Y.Lasfargues建系，源自一位７２歲患有乳腺導(dǎo)管癌的白人女性，來(lái)源組織包括乳頭及浸潤(rùn)導(dǎo)管。該細(xì)胞形態(tài)包括上皮樣細(xì)胞及多核巨細(xì)胞，可分泌一種粘性物質(zhì)。
貼壁細(xì)胞傳代：去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基，T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次；棄PBS，再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細(xì)胞，顯微鏡下觀察，待細(xì)胞變圓，細(xì)胞間隙明顯，部分細(xì)胞剛開(kāi)始脫離瓶壁，加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化，將細(xì)胞小心吹打下來(lái)，1000rpm/min室溫離心5min；棄上清，細(xì)胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細(xì)胞密度而定1:2-1:3，1:3-1:6，1:6-1:8），每T25瓶補(bǔ)足培養(yǎng)基至5-6ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細(xì)胞傳代：一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中，稀釋細(xì)胞濃度即可，若培養(yǎng)液太多時(shí)，將細(xì)胞懸液移入離心管中，1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清，細(xì)胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細(xì)胞密度而定1:4-1:8），每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細(xì)胞趨于成團(tuán)生長(zhǎng)，此時(shí)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好，當(dāng)補(bǔ)液時(shí)，需避免反復(fù)吹打。
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
BT-549 cell line人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞系
細(xì)胞傳代培養(yǎng)的胰酶消化法：傳代培養(yǎng)：是指細(xì)胞從一個(gè)培養(yǎng)瓶以１：２或１：２以上的比例轉(zhuǎn)移，接種到另一培養(yǎng)瓶的培養(yǎng)。傳代細(xì)胞，可根據(jù)不同細(xì)胞采取不同的方法進(jìn)行細(xì)胞傳代。貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞用消化法傳代，部分貼壁的細(xì)胞用直接吹打或用硅膠軟刮的刮除法傳代。懸浮細(xì)胞可采用加入等量新鮮培養(yǎng)基后直接吹打分散進(jìn)行傳代，或用自然沉降法加入新培養(yǎng)基后再吹打分散進(jìn)行傳代。實(shí)驗(yàn)步驟：①入無(wú)菌室之前用肥皂洗手，再用７５% 的酒精擦拭消毒雙手；②倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)，確定細(xì)胞是否傳代及細(xì)胞需要稀釋的倍數(shù)。將培養(yǎng)用液３７℃下預(yù)熱；③超凈臺(tái)臺(tái)面應(yīng)整潔，用７５%酒精棉球擦拭清潔；④打開(kāi)超凈工作臺(tái)的紫外燈照射臺(tái)面２０min左右，關(guān)閉紫外燈，打開(kāi)風(fēng)機(jī)清潔空氣除去臭氧；⑤點(diǎn)燃酒精燈;取出無(wú)菌試管，巴士德吸管和刻度吸管;安上橡皮頭;過(guò)酒精燈火焰略燒后插在無(wú)菌試管內(nèi)；⑥將培養(yǎng)用液瓶口用７５%酒精消毒，過(guò)酒精燈火焰后斜置于酒精燈旁的架子上；⑦倒掉培養(yǎng)細(xì)胞的舊培養(yǎng)基。酌情可用２-３ml Hanks液洗去殘留的就培養(yǎng)基，或用少量胰酶涮洗一下；⑧每個(gè)大培養(yǎng)瓶加入１ml胰酶，小培養(yǎng)瓶用量酌減，蓋好瓶蓋后在倒置顯微鏡下觀察。當(dāng)細(xì)胞收回突起變圓時(shí)立即翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶，使細(xì)胞脫離胰酶，然后將胰酶倒掉。注意勿使細(xì)胞提早脫落入消化液中；⑨加入少量的含血清的新鮮培養(yǎng)基，反復(fù)吹打消化好的細(xì)胞使其脫壁并分散，再根據(jù)分傳瓶數(shù)補(bǔ)加一定量的含血清的新鮮培養(yǎng)基(７-１０ml/大瓶;３-５ml/小瓶)制成細(xì)胞懸液，然后分裝到新培養(yǎng)瓶中。蓋好瓶蓋，適度擰緊后稍回轉(zhuǎn)，以利于CO２的進(jìn)入，將培養(yǎng)瓶放回CO２培養(yǎng)箱；⑩對(duì)懸浮培養(yǎng)細(xì)胞，步驟７-９不做。直接將細(xì)胞懸液進(jìn)行離心去除舊培養(yǎng)基上清，加入新鮮培養(yǎng)基，然后分裝到各瓶中。
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２傳代
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)
有一些細(xì)胞是數(shù)量多一點(diǎn)比較好生長(zhǎng)，生長(zhǎng)狀態(tài)也比較好。這種一般是屬于生長(zhǎng)速度慢的細(xì)胞。譬如內(nèi)皮細(xì)胞。而有一些是細(xì)胞是數(shù)量少一點(diǎn)細(xì)胞狀態(tài)會(huì)生長(zhǎng)的比較好，譬如巨噬細(xì)胞和某些腫瘤細(xì)胞。尤其是巨噬細(xì)胞，生長(zhǎng)速度非常得快，貼壁速度很快，所以傳代時(shí)就應(yīng)該留很少量的細(xì)胞，這樣細(xì)胞狀態(tài)會(huì)比較好。并且巨噬細(xì)胞比較喜歡扎堆生長(zhǎng)，而堆與堆之間是有空間的。如果長(zhǎng)成相連在一起的一滿(mǎn)片的時(shí)候，細(xì)胞形態(tài)基本上就會(huì)差了，老化的會(huì)比較多，對(duì)后期實(shí)驗(yàn)結(jié)果是不好的。所以在養(yǎng)細(xì)胞的時(shí)候應(yīng)該摸索該細(xì)胞喜歡的生長(zhǎng)空間密度問(wèn)題。這個(gè)其實(shí)是有一個(gè)方法可以改善的。對(duì)于貼壁細(xì)胞，如果細(xì)胞形態(tài)不好，（或者細(xì)胞形態(tài)不清晰，表面似有異物等）可以在傳代的時(shí)候進(jìn)行如下操作：首先，倒掉舊的培養(yǎng)基，加入3ml新的培養(yǎng)基（有無(wú)血清的都可）洗滌一次，用滴管吸走，然后再加入3ml的培養(yǎng)基，進(jìn)行預(yù)吹打，控制吹打力度，輕輕地大概沿著瓶底過(guò)一遍，然后吸走。這時(shí)侯再開(kāi)始正式的消化、吹打。（巨噬細(xì)胞建議只吹打，不消化）其次，把吹打下來(lái)的細(xì)胞懸液加入到新的培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，培養(yǎng)瓶事先加入培養(yǎng)基，放入培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)，按時(shí)間點(diǎn)觀察細(xì)胞貼壁情況。10分鐘觀察一次，20分鐘，30分鐘觀察一次。選擇一個(gè)時(shí)間點(diǎn)，已經(jīng)有部分細(xì)胞貼壁的情況下，重新置于潔凈臺(tái)，底面朝上迅速倒出其中的培養(yǎng)基，加入3ml新培養(yǎng)基再輕輕洗一次。然后加入完全培養(yǎng)基培養(yǎng)。后續(xù)觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況以及形態(tài)。通常稱(chēng)之為“二傳”。如果一次效果還不理想，可重復(fù)多次。直到找到細(xì)胞上乘形態(tài)。其中要注意，結(jié)合細(xì)胞喜歡的生長(zhǎng)情況。喜歡多一點(diǎn)數(shù)量長(zhǎng)得好的細(xì)胞你就等貼壁細(xì)胞比較多點(diǎn)的時(shí)候再傳。反之亦然。
BT-549 cell line人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性：上皮樣
SCL-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BNCL-2細(xì)胞、LNCaP subline C4-2細(xì)胞、PIG3細(xì)胞
P3-X63-Ag8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colo-678細(xì)胞、Sp2/mIL-6細(xì)胞、HEY A8細(xì)胞
KU1919細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC9細(xì)胞、NMC-G1細(xì)胞、Panc 04.03細(xì)胞
HR1K細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JB6 Cl 30-7b細(xì)胞、TM-4細(xì)胞、IB-RS2細(xì)胞
OE19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc-10.05細(xì)胞、BT 20細(xì)胞、DH82細(xì)胞
SW 780細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-695-T細(xì)胞、H82sclc細(xì)胞、H-1734細(xì)胞
Kit225-K6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H358細(xì)胞、Okayama University Medical School-27細(xì)胞、HeLa.S3細(xì)胞
OAW 42細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RMG-I細(xì)胞、ME-180細(xì)胞、RPMI no 8226細(xì)胞
hRPTC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC0504細(xì)胞、Medical Research Council cell strain-9細(xì)胞、KCL-22細(xì)胞
NCIH441細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ASH-3細(xì)胞、HA細(xì)胞、A-204細(xì)胞
CAL12T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L6細(xì)胞、SEG1細(xì)胞、NCI H747細(xì)胞
SJSA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL 12T細(xì)胞、MHCC-LM3細(xì)胞、Th17細(xì)胞
ECC-12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCC10細(xì)胞、SCL1細(xì)胞、Lec1細(xì)胞
BT-549 cell line人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞系
DLD 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-3細(xì)胞、MCF-12A細(xì)胞、NK-92 transfected with MFG-hIL2細(xì)胞
MDAMB361細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuH-6細(xì)胞、SW1783細(xì)胞、HT1080細(xì)胞
D283MED細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lu99A細(xì)胞、HEK293S細(xì)胞、DoTc2細(xì)胞
D283MED細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lu99A細(xì)胞、HEK293S細(xì)胞、DoTc2細(xì)胞
HOS/MNNG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2347細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-51細(xì)胞、JROECL19細(xì)胞
GM05887A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCK Type II細(xì)胞、H2196細(xì)胞、CORL51細(xì)胞
Caco-2 BBe細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI 6666細(xì)胞、Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a細(xì)胞、Colo-678細(xì)胞
BC-024細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MGH-UI細(xì)胞、SUM 159細(xì)胞、MV-1-Lu細(xì)胞
GC-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR 4細(xì)胞、C57/B6-L細(xì)胞、TSCC1細(xì)胞
NCI-SNU-761細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：293細(xì)胞、KM12細(xì)胞、SNU-182細(xì)胞
OCI-LY-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKO007細(xì)胞、NCI-H2591細(xì)胞、HOP-62細(xì)胞
343 MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUD6細(xì)胞、alpha-TC1.6細(xì)胞、H-747細(xì)胞
HRPEpiC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HDQ-P1細(xì)胞、RSC-364細(xì)胞、QBI-HEK 293A細(xì)胞
Potorous tridactylus Kidney 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE30細(xì)胞、RCC 7860細(xì)胞、Farage細(xì)胞
SCH細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUP T1細(xì)胞、Metastatic Variant 522細(xì)胞、DoHH-2細(xì)胞
HeLa-229細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK 293T/17細(xì)胞、HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]細(xì)胞、SP2/0 Ag-14細(xì)胞
P3 88 D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UM-UC-14細(xì)胞、SF-539 BT細(xì)胞、MES13細(xì)胞
H-28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2126細(xì)胞、NCI-H2228細(xì)胞、UACC-812細(xì)胞
293 c18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-668細(xì)胞、HPAF-I細(xì)胞、A431/P細(xì)胞
M-14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW626細(xì)胞、NIH 3T6細(xì)胞、BNL-CL.2細(xì)胞
THP1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBVP細(xì)胞、WM115-mel細(xì)胞、MUTZ3細(xì)胞
COLO320DM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GC-1spg細(xì)胞、HFF細(xì)胞、HEL 92.1.7細(xì)胞
Human Fetal Thymocyte-8810細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1569細(xì)胞、H-69細(xì)胞、KATO III細(xì)胞
EC109細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ra No. 1細(xì)胞、Institute for Medical Research-90細(xì)胞、COLO678細(xì)胞
hTERTHME1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL-3細(xì)胞、PaCa2細(xì)胞、LY-R細(xì)胞
JTC-39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H460細(xì)胞、OS-RC-2細(xì)胞、MOLT-4細(xì)胞
COS1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pa14C細(xì)胞、H-1373細(xì)胞、YT細(xì)胞
H-35細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KP 4細(xì)胞、SUDHL2細(xì)胞、BSC1細(xì)胞
HCC-95細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kit-225細(xì)胞、HDQ-P1細(xì)胞、DMS-273細(xì)胞
SK-CO-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1734細(xì)胞、NCI-H1437細(xì)胞、CV 1細(xì)胞
NTERA-2cl.D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DHBE細(xì)胞、MDA PCa 2b細(xì)胞、KCL22S細(xì)胞
NCI/ADRRES細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：118 MG細(xì)胞、WiDr/S細(xì)胞、ACCM細(xì)胞
Calf Pulmonary Artery Endothelial細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GTL16細(xì)胞、T47-D細(xì)胞、MDA-468細(xì)胞
NCIH69細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RD 2細(xì)胞、H-1963細(xì)胞、ASPC1細(xì)胞
RK13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCLP1細(xì)胞、AMJ2C8細(xì)胞、H-2444細(xì)胞
EFO-27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLA-802細(xì)胞、NCIH1092細(xì)胞、PNT1A細(xì)胞
IHH細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS5細(xì)胞、Jurkat-E6細(xì)胞、LPC-H12細(xì)胞
T-ALL 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ZR75-30細(xì)胞、NUGC-3細(xì)胞、OCI-Ly 19細(xì)胞
SCL-I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM-266-4細(xì)胞、UCLA-SO-M20細(xì)胞、NCI-H647細(xì)胞
COLO-680N細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-293FT細(xì)胞、KP 4細(xì)胞、HGSMC細(xì)胞
RGM1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C1R細(xì)胞、HT-29細(xì)胞、SKMel-28細(xì)胞
Hs 821.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RH-35細(xì)胞、SK Mel 24細(xì)胞、Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1細(xì)胞
L78細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L929(NCTC)細(xì)胞、HEC-151細(xì)胞、MCF-12F細(xì)胞
BT-549 cell line人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞系
U251n細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IM-9細(xì)胞、NCIH748細(xì)胞、H-1672細(xì)胞
KCL-22細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Central Adrenergic TH-expressing a細(xì)胞、MKN28細(xì)胞、SaOS細(xì)胞
MLE12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KATO 3細(xì)胞、Hs 606.T細(xì)胞、SK-ES1細(xì)胞
Hs 766細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM52PE細(xì)胞、A172細(xì)胞、HF-91細(xì)胞
PK-13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PG-BE1細(xì)胞、CCRF-SB細(xì)胞、Psi-2 DAP細(xì)胞
P3X63 Ag8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2291細(xì)胞、KYSE 180細(xì)胞、FRH-0201細(xì)胞
KU19-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LTEPa2細(xì)胞、CHP-126細(xì)胞、SW 1116細(xì)胞
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