"MDA-MB-415 cell line人乳腺腺癌細胞系
細胞背景資料:這株細胞表達WNT7B癌基因。8168088].帶瘤患者來自巴拉圭,雖然填報的是白人,但細胞表型存在G6PDA型,顯示其屬于混血。細胞株形成平展延伸的上皮細胞樣,在電鏡下呈現(xiàn)結(jié)節(jié),伴隨著延伸的微管和微板。不容易用胰酶消化。
貼壁細胞傳代:去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基,T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次;棄PBS,再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細胞,顯微鏡下觀察,待細胞變圓,細胞間隙明顯,部分細胞剛開始脫離瓶壁,加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化,將細胞小心吹打下來,1000rpm/min室溫離心5min;棄上清,細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸,按要求分瓶(視細胞密度而定1:2-1:3,1:3-1:6,1:6-1:8),每T25瓶補足培養(yǎng)基至5-6ml,37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細胞傳代:一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中,稀釋細胞濃度即可,若培養(yǎng)液太多時,將細胞懸液移入離心管中,1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清,細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸,按要求分瓶(視細胞密度而定1:4-1:8),每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml,37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細胞趨于成團生長,此時細胞生長狀態(tài)良好,當補液時,需避免反復(fù)吹打。
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
MDA-MB-415 cell line人乳腺腺癌細胞系
細胞培養(yǎng)方面注意的幾點:無菌意識要強:實驗進行前,超凈臺以紫外燈照射30分鐘滅菌,以70%ethanol擦拭無菌操作抬面,并開啟超凈工作臺風(fēng)扇運轉(zhuǎn)數(shù)分鐘后,才開始實驗操作。每次操作只處理一株細胞株,以避免失誤混淆或細胞間污染。實驗完畢后,將實驗物品帶出工作臺,以70%ethanol擦拭無菌操作抬面。無菌操作工作區(qū)域應(yīng)保持清潔及寬敞,必要物品,例如支架、吸管等公用物品可以暫時放置,其它個人實驗用品用完應(yīng)立即拿出。實驗用品以70%乙醇擦拭后才帶入無菌操作臺內(nèi)。實驗操作應(yīng)在中央無菌區(qū)域,一般勿在邊緣區(qū)域操作。小心取用無菌之實驗物品,避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或是容器瓶口,亦不要在打開之容器正上方操作實驗。容器打開后,以手夾住瓶蓋并握住瓶身,傾斜約45°角取用,盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。選擇正確的培養(yǎng)基:不同的細胞可能培養(yǎng)基不同,甚至不同的文獻可能對相同的細胞培養(yǎng)基成分也是可能不同的。如我當時培養(yǎng)神經(jīng)干細胞,有文獻就選用neurobase培養(yǎng)基,而我的實驗?zāi)康闹饕亲隹寡趸脱趸矫娴模@種培養(yǎng)基中含有抗氧化劑成分,此時,我就不得不選擇另外一種不含抗氧化劑的培養(yǎng)基。瓶裝血清一定要逐步解凍:4℃冰箱全溶后再分裝,在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沉淀的發(fā)生。勿直接由–20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀。熱滅活是指56℃,30分鐘加熱已完全解凍之血清。水浴鍋升到56℃后,將血清放入,待溫度升高到56℃后計時,一般5分鐘左右規(guī)則搖晃均勻一次。此熱處理之目的是使血清中之補體成份去活化。除非必須,一般不要作此熱處理,因為會造成沉淀物之顯著增多,且會影響血清之品質(zhì)。注意更換新血清(包括不同批次)對細胞的影響。
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:消化5-10分鐘。1:2。4-5天長滿。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
細胞生長特性:貼壁生長
凍存和復(fù)蘇的原則:慢凍快融》當細胞冷到零度以下,可以產(chǎn)生以下變化:細胞器脫水,細胞中可溶性物質(zhì)濃度升高,并在細胞內(nèi)形成冰晶。如果緩慢冷凍,可使細胞逐步脫水,細胞內(nèi)不致產(chǎn)生大的冰晶;相反,結(jié)晶就大,大結(jié)晶會造成細胞膜、綱胞器的損傷和破裂。復(fù)蘇過程應(yīng)快融,目的是防止小冰晶形成大冰晶,即冰晶的重結(jié)晶。慢凍程序》1.標準程序:采用細胞凍存器》當溫度在-25℃以上時,1~2℃/min;當溫度達-25℃以下時,5~10℃/min;當溫度達-100℃時,可迅速放入液氮中。2.簡易程序:將冷凍管(管口要朝上)放入紗布袋內(nèi),紗布袋系以線繩,通過線繩將紗布袋固定于液氮罐罐口,按每分鐘溫度下降1~2℃的速度,在40min內(nèi)降至液氮表面過夜,次晨投人液氮中。3.傳統(tǒng)程序:冷凍管置于4℃10分鐘→-20℃30分鐘→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽長期儲存。細胞凍存方法:1.預(yù)先配制凍存液》(1)8%DMSO+細胞生長液(92%血清)2.取對數(shù)生長期細胞,經(jīng)胰酶消化后,加入適量凍存液,用吸管吹打制成細胞懸液(1×10(6)~5×10(6)細胞/ml)。3.加入1ml細胞于凍存管中,密封后標記冷凍細胞名稱和冷凍日期。液氮長期保存。保存細胞的復(fù)蘇方法:1.快速解凍》凍存細胞從液氮中取出后,立即放入37℃水浴中,輕輕搖動冷凍管,使其在1分鐘內(nèi)全部融化(不要超過3分鐘)。2.解凍后的細胞可直接接種到含完全生長培養(yǎng)液的細胞培養(yǎng)瓶中直接進行培養(yǎng),24小時后再用新鮮完全培養(yǎng)液替換舊培養(yǎng)液,以去除DMSO。3.如果細胞對冷凍保護劑特別敏感解凍后的細胞應(yīng)先通過離心去除冷凍保護劑,然后再接種到含完全生長培養(yǎng)液的培養(yǎng)瓶中。
MDA-MB-415 cell line人乳腺腺癌細胞系
細胞形態(tài)特性:上皮細胞
Hs746-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DU 4475細胞、NCI-H2126細胞、KY-270細胞
SNU-182細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B-104細胞、Hep 3B細胞、MDA-MB-175細胞
CL-40細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HNE-3細胞、HIBEC細胞、NG108-15細胞
Swiss-3T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1688細胞、Capan2細胞、HCC1395細胞
Hep-3B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs445細胞、T24細胞、HOS/MNNG細胞
ASH-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1703細胞、SW756細胞、NCI-H2342細胞
SKNO1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-175VII細胞、HCC-1937細胞、CT26細胞
TEV-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:4175細胞、Pan02細胞、Normal fibroblast-10細胞
AU565細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BV2細胞、COLO-741細胞、RL-952細胞
P3HRI細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCL I細胞、CCF-STTG1細胞、MDST8細胞
RH-35細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2452細胞、Psi2-DAP細胞、H498細胞
BALL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HepG2細胞、SACC-LM細胞、LCLC-103H細胞
SKLU1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BTI-Tn-5B1-4細胞、H2085細胞、CNE2細胞
MDA-MB-415 cell line人乳腺腺癌細胞系
NCI522細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-kb2細胞、Epithelioma Papulosum Cyprini細胞、OCI-LY-19細胞
Scott and White No. 13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H735細胞、MCF-7ADR細胞、NCIH740細胞
Tu212細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FOX-NY細胞、RT4P細胞、H-1436細胞
Tu212細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FOX-NY細胞、RT4P細胞、H-1436細胞
EOMA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3/NSI/1-AG4-1細胞、OB2細胞、H-548細胞
DF1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MD Anderson-Metastatic Breast-468細胞、H838細胞、MC3T3-E1 Subclone 14細胞
U87MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OE-19細胞、EFM-192C細胞、BHK 21細胞
High Five細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KLN-205細胞、SW-48細胞、D-341細胞
LAC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SGC 7901細胞、CFSC-8B細胞、Panc 5.04細胞
BEND細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SJ-Rh 30細胞、HBMEC細胞、MOLP-2細胞
MDA-MB157細胞系相關(guān)產(chǎn)品:hUC-MSC細胞、CZ-1細胞、SUM-102細胞
RSC-96細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKRC-52細胞、769-P細胞、SUM 52PE細胞
NCI-H1672細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BL2141細胞、Turbot Embryonic Cell line細胞、OVCA432_Bast細胞
SK-SH-SY5Y細胞系相關(guān)產(chǎn)品:QGY-7701細胞、SKO007細胞、RS4;11細胞
L- cell細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMR 106細胞、32D CL3細胞、SK MEL-28細胞
SKMEL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HL-60 Clone 15細胞、HCC1954BL細胞、CHO-Lec1細胞
SMMC 7721細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EBNA293細胞、NCIH1792細胞、H2347細胞
SK-ChA-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHL細胞、PC-3細胞、TOV-112D細胞
HCS-2/8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:293 c18細胞、PVEC細胞、GM03570細胞
VB細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H526細胞、H-2452細胞、CCC-HEH-2細胞
Hs683T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1836細胞、PBL細胞、HTori3細胞
Y3-Ag1,2,3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HO-8910細胞、CD18/HPAF細胞、LLC-MK2細胞
Ramos細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL51細胞、PC-9細胞、C32 mel細胞
A7r5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKCol1細胞、HuH6細胞、NCI-H64細胞
H2108細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MES-13細胞、H-2405細胞、NCIH69細胞
HEK 293-EBNA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HIT clone T15細胞、NCIH211細胞、SUM-52-PE細胞
NCC-IT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2198細胞、MGHU1細胞、SUP-T1細胞
B95.8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BC-3-H-I細胞、HT29細胞、Kit-225-K6細胞
H-3255細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT 1080細胞、RL95細胞、B16-F10--RED細胞
Madin Darby Canine Kidney細胞系相關(guān)產(chǎn)品:M20 [Human melanoma]細胞、SK-MEL5細胞、TM-4細胞
10T1/2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BGC-823細胞、MT2細胞、NTERA2細胞
QGP 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-35細胞、LTEPsm細胞、CATH.a細胞
Hep II細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1581細胞、Anglne細胞、MHCCLM3細胞
Clone Y-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C-Lu65細胞、H1666_DA細胞、CCLP1細胞
8505C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BGC823細胞、NCI-H1930細胞、Danio rerio Gill細胞
NCI/ADR-RES細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FM-88細胞、DC 2.4細胞、L-cell細胞
MonoMac6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS53細胞、SUM190細胞、NCI-H810細胞
BCaP 37細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LA-N-1細胞、PC615.3細胞、AG06814-N細胞
NCIH1930細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs888Lu細胞、LLC1細胞、NCI-H676細胞
D407細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIH:OVCAR-3細胞、IB-RS-2細胞、Panc5.04細胞
JeKo-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UM2細胞、BCP-1細胞、H1734細胞
MOLP2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA231細胞、Panc2.03細胞、PTK1細胞
MDCK Type II細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LMH細胞、Michigan Cancer Foundation-12F細胞、HEC-1A細胞
MDA-MB-415 cell line人乳腺腺癌細胞系
251 MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:2BS細胞、NCIH1618細胞、Hep G2/C3A細胞
SW-620細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COR-L51細胞、CHO/dhFr-細胞、SW1088細胞
HCC1599細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ARO 81-1細胞、ChaGo-K-1細胞、HCC95細胞
M 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:32D.cl3細胞、NCIH187細胞、639 V細胞
Bat lung細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LTEP-sm細胞、SW 1271細胞、rRMECs細胞
Nittby-Salford 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FAK+/+細胞、GEO細胞、MESSA-DX5細胞
CL-40細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HNE-3細胞、BL-6細胞、TYKnu細胞
"