"HCC95 Thawing人肺鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
HCC95 Thawing人肺鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長：貼壁
造成實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞污染常見情況總結(jié)：細(xì)胞培養(yǎng)中最常見污染的是細(xì)菌、真菌和支原體污染。細(xì)胞一旦污染，大多數(shù)較難處理。那么，哪些情況我們不注意的話就會造成細(xì)胞污染呢？我們根據(jù)常見細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)分析總結(jié)下。【違規(guī)操作】１)為節(jié)省時(shí)間，有人已經(jīng)用超凈臺四個(gè)多小時(shí)，不開紫外滅菌３０min,酒精擦拭后直接開始試驗(yàn)；２)器材或者溶液很久沒用，未檢測是否污染而直接使用；離心管多次使用，槍頭為了方便交叉使用；３)超凈臺不點(diǎn)酒精燈；點(diǎn)了酒精燈放在右上角，而你在左下角做試驗(yàn)；４)不帶手套，徒手操作；５)細(xì)胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術(shù)器械、離心機(jī)、冰箱等專用儀器設(shè)備以及專用的實(shí)驗(yàn)服和拖鞋，未定期消毒。專用物品被帶出傳代細(xì)胞使用。培養(yǎng)細(xì)胞過程中使用的所有實(shí)驗(yàn)用具，如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需１２１°C高壓滅菌２０分鐘后３７％烤干備用)。超凈臺和桌面，東西太多太亂：超凈臺不是儲物箱，什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺！這樣就會有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細(xì)胞其他的桌面，切忌東西堆積如山，不要將酒精棉球、標(biāo)簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細(xì)胞！一不小心“飄”進(jìn)你的細(xì)胞培養(yǎng)板里，細(xì)胞就會養(yǎng)的不好，啥時(shí)候死了都不知道！【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細(xì)胞污染了，并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了，首先你還得看看這個(gè)恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細(xì)胞是否污染，如果有而且好幾個(gè)板子都有類似的污染塊，那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了，得給培養(yǎng)箱做個(gè)大掃除，重新酒精消毒，照紫外；孵箱里的水，水沒了要記得加，還得記得十天半個(gè)月的就用酒精擦擦托盤。【傳代細(xì)胞人多口雜，難管理】在傳代細(xì)胞這種衛(wèi)生要求高，人多了，不確定因素多了，難以保證試驗(yàn)在無菌條件下操作。出入試驗(yàn)室，實(shí)驗(yàn)服當(dāng)風(fēng)衣穿，不扣紐扣，不戴，就容易造成細(xì)胞污染；超凈臺做實(shí)驗(yàn)時(shí)，喜歡說話聊著做試驗(yàn)，要是還不帶口罩，里面就有很多細(xì)菌等著去攻擊你的細(xì)胞呢！
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
貼壁細(xì)胞的消化方法介紹：１、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在０.２５-０.５%。作用時(shí)間根據(jù)細(xì)胞種類、作用溫度等因素而變化很大，從幾分鐘到幾十分鐘不等。０.２５%的胰酶作用于單層貼壁的細(xì)胞，在３７度條件下，一般消化１-５分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細(xì)胞間。配制時(shí)不能用含、鎂的平衡液，否則影響活性。保存于-２０度。２、膠原酶。這種方法比較少，一般是用原代培養(yǎng)時(shí)，從組織消化下細(xì)胞。這種方法作用溫和，對細(xì)胞損傷較小，但是，價(jià)格也較貴。中止同樣是用血清。３、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在０.０２%左右。作用于細(xì)胞與間質(zhì)，對細(xì)胞間也有一定作用。注意，它能顯著影響pH值，而且在弱堿性條件下才易溶。因此，配制時(shí)應(yīng)調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此，消化下來的細(xì)胞要洗一遍。４、商品化的無酶消化液。個(gè)人的使用經(jīng)常覺得對細(xì)胞的損傷比較大，但是分離成單細(xì)胞懸液的能力確實(shí)比較強(qiáng)。５、物理法。直接吹打或用細(xì)胞刮子將細(xì)胞刮下來。６、冷凍法。此方法僅能用于細(xì)胞傳代時(shí)。無法使組織上的細(xì)胞脫落下來。本方法的原理，我想是因細(xì)胞冷凍后收縮，從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點(diǎn)是：對細(xì)胞損傷小，不需要中止或洗細(xì)胞，方便，不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊，又特別嬌氣的細(xì)胞。不足是細(xì)胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導(dǎo)致大量細(xì)胞死亡操作的間充質(zhì)干細(xì)胞、DC細(xì)胞的培養(yǎng)，效果非常滿意。具體過程是：１、用較多的４度的PBS 洗滌一遍細(xì)胞(以６孔板為例，加１.５ml/孔)，２、再加０.５毫升４度的PBS，靜置操作臺上，很快細(xì)胞就小片脫落，３、輕輕吹打，細(xì)胞即完全脫落，４、按一定比例傳代。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
HCC95 Thawing人肺鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細(xì)胞說明書部分
最近在培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)，發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好，很容易扎堆生長，用胰酶消化的時(shí)候也是一團(tuán)一團(tuán)地被消化下來，很難把它們吹散成一個(gè)一個(gè)細(xì)胞。而且長得也挺快也挺不均勻的，傳代的第二天，有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢？你好，我養(yǎng)的細(xì)胞和你一樣，消化下來也是一團(tuán)的，但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻，分皿后在鏡下看一看，移動(dòng)培養(yǎng)皿的時(shí)候盡量動(dòng)作輕，避免晃動(dòng)。細(xì)胞生長挺快，那么細(xì)胞的增殖能力應(yīng)該較強(qiáng)。胰酶消化成團(tuán)的問題我覺得有以下幾種可能：一、細(xì)胞消化后吹打不均勻，造成細(xì)胞成團(tuán)生長：二、細(xì)胞細(xì)化太過，細(xì)胞成片脫落，吹打時(shí)沒有受力點(diǎn)，細(xì)胞聚團(tuán)生長。解決辦法：根據(jù)細(xì)胞生長的情況進(jìn)行多次消化，將同次消化下來的細(xì)胞放在一個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)。貼壁細(xì)胞傳代培養(yǎng)：一般步驟為：真空泵吸走培養(yǎng)基，１XPBS漂洗兩次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿為例），３７度放置數(shù)分鐘，輕拍培養(yǎng)瓶使細(xì)胞自瓶壁脫落，加入適量血清，以吸管上下吸放數(shù)次以打散細(xì)胞團(tuán)塊，離心后加入新鮮培養(yǎng)基，按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細(xì)胞的傳代最重要的是胰酶處理時(shí)間，若胰酶處理太久，容易造成細(xì)胞貼壁不緊，顯微鏡下觀察立體感不強(qiáng)，嚴(yán)重的時(shí)候甚至?xí)斐杉?xì)胞死亡。我談?wù)剛€(gè)人經(jīng)驗(yàn)：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１幾種癌細(xì)胞處理時(shí)間可適當(dāng)放長，一般處理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比較容易脫落，２min足矣，P１９Cl６和２９３細(xì)胞貼壁不緊，可在PBS漂洗后，直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書
NCI-Hut 125細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：R1800[RA]細(xì)胞、NMCG-1細(xì)胞、Strain V細(xì)胞
PTK 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 699細(xì)胞、NS1-Ag4/1細(xì)胞、hCMEC/D3細(xì)胞
2780細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：aTC1 Clone 6細(xì)胞、T-47D細(xì)胞、HCC-1428細(xì)胞
HLE-SRA-01/04細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc2.03細(xì)胞、CEMC7細(xì)胞、NTera 2細(xì)胞
R.K.13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-134-VI細(xì)胞、Microbiological Associates-104細(xì)胞、OCI AML5細(xì)胞
AM38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI8226/S細(xì)胞、VMRCLCD細(xì)胞、Co 205細(xì)胞
CAMA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL 51細(xì)胞、TSU-Pr1細(xì)胞、H929細(xì)胞
HT29細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 962細(xì)胞、OVCA-432細(xì)胞、HCT_116細(xì)胞
SKMEL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Walker256細(xì)胞、ST 486細(xì)胞、MC3T3-E1細(xì)胞
Karpas 299細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HNE-1細(xì)胞、AML-12細(xì)胞、RINm5F細(xì)胞
PG-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SuDHL 5細(xì)胞、786-O細(xì)胞、Karpas299細(xì)胞
H64細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EC109細(xì)胞、NCI H82細(xì)胞、PLC PRF 5細(xì)胞
OV3121細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BCP-1細(xì)胞、NCI-BL1339細(xì)胞、Hs294細(xì)胞
SW982細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-436細(xì)胞、HEI-193細(xì)胞、HS 1.Tes細(xì)胞
AD293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T-T細(xì)胞、B16/BL6細(xì)胞、COLO 829細(xì)胞
293H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SMC-1細(xì)胞、NPA87細(xì)胞、H-1373細(xì)胞
HCC2218細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 819.T細(xì)胞、rHSC-99細(xì)胞、HCC-78細(xì)胞
LS-411細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1693細(xì)胞、MC3T3-E1 Subclone 14細(xì)胞、OVCA433_Bast細(xì)胞
HEK-293-EBNA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：32Dcl3細(xì)胞、Bac 1.2F5細(xì)胞、BALB/3T3 clone A31細(xì)胞
RCSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR.8細(xì)胞、H-2073細(xì)胞、LAN-5細(xì)胞
Porcine Kidney-13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1048細(xì)胞、P3HRI細(xì)胞、HPAF II細(xì)胞
Porcine Kidney-13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1048細(xì)胞、P3HRI細(xì)胞、HPAF II細(xì)胞
Hs895.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BMU-S1細(xì)胞、D10細(xì)胞、H1395細(xì)胞
RERFLCMS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DI TNC-1細(xì)胞、Murine Leydig Tumor Cell line-1細(xì)胞、CV-1 in Origin Simian-1細(xì)胞
Ha Fe細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1008細(xì)胞、AN3CA細(xì)胞、OVCAR.8細(xì)胞
KPNRTBM1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：32D clone3細(xì)胞、H 9細(xì)胞、CP-70細(xì)胞
HCC95 Thawing人肺鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞系
C666-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AM細(xì)胞、WI-38細(xì)胞、AU-Mel細(xì)胞
HEY-A8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1395細(xì)胞、SNU520細(xì)胞、CHO cell clone K1細(xì)胞
UO-31細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Kidney-2細(xì)胞、PC2細(xì)胞、MC-3T3細(xì)胞
Hs 729.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-820細(xì)胞、KYSE-50細(xì)胞、WM115mel細(xì)胞
SHSY5Y細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1666細(xì)胞、MEF細(xì)胞、FL-83B細(xì)胞
CMT64細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LN382細(xì)胞、Ramos(RA1)細(xì)胞、LMH細(xì)胞
SU-DHL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCoEpiC細(xì)胞、Oka-C1細(xì)胞、TMD8細(xì)胞
NUGC3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VMRC-RCZ細(xì)胞、SU-DHL6細(xì)胞、16-HBEo細(xì)胞
SKBR-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI 1846細(xì)胞、NCIH2085細(xì)胞、RT-BM-1細(xì)胞
COLO 320DM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：4T1.2細(xì)胞、R2C細(xì)胞、C3H/10T1/2 CL8細(xì)胞
RC92A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1648細(xì)胞、CCC-HEH-2細(xì)胞、HUT 125細(xì)胞
RT-BM 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B95.8細(xì)胞、SK MEL-28細(xì)胞、CemT4細(xì)胞
FL83B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H847細(xì)胞、SW 837細(xì)胞、WM266-4細(xì)胞
746T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MNNG-HOS (Cl#5)細(xì)胞、PC3M-2B4細(xì)胞、VM-CUB1細(xì)胞
SW579細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human ErythroLeukemia細(xì)胞、HS766T細(xì)胞、Ej138細(xì)胞
ME180細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PNT1-a細(xì)胞、L78細(xì)胞、Fetal Human Colon細(xì)胞
SW527細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：R3/1細(xì)胞、P3/NS-1細(xì)胞、RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma]細(xì)胞
MES13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FTC-133細(xì)胞、COLO201細(xì)胞、A-2780細(xì)胞
F36P細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MiaPaCa-2細(xì)胞、WM-266-4細(xì)胞、373MG細(xì)胞
WEHI-164細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC 3細(xì)胞、3T3(A31)細(xì)胞、PC-3M-1E8細(xì)胞
TE-13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat clone A3細(xì)胞、HOS (TE85)細(xì)胞、NRK細(xì)胞
CAL 39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MM1S細(xì)胞、NCI-H1522細(xì)胞、MMAc.SF細(xì)胞
MDA-MB 231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT 116細(xì)胞、UM-UC-1細(xì)胞、HCC1806細(xì)胞
H209細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HN6細(xì)胞、SKHEP1細(xì)胞、SPCA1細(xì)胞
SHG-44細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H4細(xì)胞、A253細(xì)胞、SF295細(xì)胞
CAL 85-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Intestinal Epithelioid Cell line No. 18細(xì)胞、HIBEpiC細(xì)胞、SCC-7細(xì)胞
RGC5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HeLa.S3細(xì)胞、L- cell細(xì)胞、SW839細(xì)胞
870細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1650細(xì)胞、BTI-Tn5B14細(xì)胞、EFO 27細(xì)胞
GS-9L細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC-028細(xì)胞、Neukoplast細(xì)胞、OAW42細(xì)胞
H929細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：639 V細(xì)胞、VK-2/E6E7細(xì)胞、NOK細(xì)胞
ARPE19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Balb/3T3-4-Cl31細(xì)胞、U 937細(xì)胞、IM 9細(xì)胞
NCIH69細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RD 2細(xì)胞、H-1963細(xì)胞、ASPC1細(xì)胞
3T3-Swiss albino細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPTEC/TERT1細(xì)胞、SVG(P12)細(xì)胞、ANA-1細(xì)胞
HCC95 Thawing人肺鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞系
HEK/293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VMM5A細(xì)胞、Human Corneal Epithelial cells-Transformed細(xì)胞、L-M[TK-]細(xì)胞
A-101D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI/AML-3細(xì)胞、FRTL-5 Cl 2細(xì)胞、TE-15細(xì)胞
H441細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HHL5細(xì)胞、H748細(xì)胞、MNNG/HOS Clone F-5細(xì)胞
MBMEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CNLMG-B5537SKIN細(xì)胞、alphaTC1 Clone 6細(xì)胞、UPCI:SCC90細(xì)胞
PLA801-95D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SJSA細(xì)胞、Panc05.04細(xì)胞、MPC 11細(xì)胞
L-540細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FRO 81-2細(xì)胞、NCI-H2405細(xì)胞、RL-95-2細(xì)胞
RK13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCLP1細(xì)胞、AMJ2C8細(xì)胞、H-2444細(xì)胞
NCI-H1417細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KTCTL-140細(xì)胞、SNU-620細(xì)胞、HuT78細(xì)胞
Roswell Park Memorial Institute 6666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC-019細(xì)胞、UM2細(xì)胞、LU-65M細(xì)胞
CAL120細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IMR90細(xì)胞、OCILY-19細(xì)胞、RK-13細(xì)胞
L23/P細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ETCC007細(xì)胞、Mink細(xì)胞、Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5細(xì)胞
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