"C32 [Human melanoma] Thawing人黑色素瘤細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
C32 [Human melanoma] Thawing人黑色素瘤細(xì)胞系
細(xì)胞生長：貼壁
為什么培養(yǎng)的細(xì)胞要及時傳代？體外培養(yǎng)的細(xì)胞大多具有生長接觸抑制的特性，也就是說當(dāng)一個細(xì)胞被其他細(xì)胞包圍的時候，它就會停止生長，及時傳代后，細(xì)胞的生長得以繼續(xù)。培養(yǎng)細(xì)胞生長減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些？可能的原因有：更換了不同的培養(yǎng)液或血清；培養(yǎng)液中一些細(xì)胞生長必需成分如谷眈肢或生長因子等耗盡或缺乏或己被破壞；培養(yǎng)物中有少量細(xì)菌或真菌污染；試劑保存不當(dāng)；比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分，比較新血清與舊血清等，找出其它可能的原因。解決辦法：增加起始培養(yǎng)細(xì)胞濃度；讓細(xì)胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液；換入新鮮配制培養(yǎng)液；補加谷酷肢或生長因子等；用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng)，如發(fā)現(xiàn)污染，去棄培養(yǎng)物，或用抗生素除菌；血清需保存在５℃到２０℃; 培養(yǎng)液需在２-８℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在２-８℃保存，并在２周內(nèi)用完;分離培養(yǎng)物，檢測支原體。冷凍管應(yīng)如何解凍？取出冷凍管后，須立即放入３７℃水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其在１-２分鐘內(nèi)大部分融化，特別注意，需殘留一小塊冰塊，就可拿到超凈工作臺操作細(xì)胞，用７５%酒精消毒凍存管，用新鮮培養(yǎng)基將細(xì)胞轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時，必須注意安全，預(yù)防冷凍管爆裂。
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：４傳代，２天換液１次。
細(xì)胞凍存復(fù)蘇材料與方法步驟：常用的細(xì)胞冷凍貯存器為液氮貯存器，規(guī)格有３５L和５０L兩種。使用時要注意以下幾點：(１)一般兩周需充液氮一次，至少一個月充氮一次。液氮溫度達(dá)-１９６℃，使用時注意勿讓液氮濺到皮膚上，以免引起凍傷。(２)液氮容器為雙層結(jié)構(gòu)，中間為真空層，瓶口有雙層焊接處，應(yīng)防止焊接部裂開。(３)在裝入液氮時，要注意緩慢小心，并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導(dǎo)，使液氮直達(dá)瓶底，如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用，加液氮時更要緩慢，以免溫度驟降而使容器損壞。細(xì)胞凍存時常備的材料有：０.２５%胰蛋白酶，含１０%～２０%的血清培養(yǎng)液，DMSO(分析純)或無色新鮮甘油(１２１°C蒸氣高壓消毒)，２mL安瓿(或?qū)Ｓ眉?xì)胞凍存管)、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為：(１)選擇處于對數(shù)生長期的細(xì)胞，在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng) 液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞，使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預(yù)冷１５分鐘后，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻，細(xì)胞濃度為３×１０６～１×１０７/mL之間。(３)將上述細(xì)胞分裝于安瓿或?qū)Ｓ美鋬鏊芰瞎苤校碴逞b１～１.５mL在火焰噴燈上封口，封口處要完全封閉，圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊，并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期，同時作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù))。(４)將裝好細(xì)胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜，次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟：先將安瓿置入４℃冰箱中２～３小時，再移至冰箱冷凍室內(nèi)３～４小時，再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放２小時，最后沉入液氮中。細(xì)胞凍存在液氮中可以長期保存，但為妥善起見，凍存半年后，取出一只安瓿細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng)，觀察生長情況，然后再繼續(xù)凍存。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
C32 [Human melanoma] Thawing人黑色素瘤細(xì)胞系
細(xì)胞生長特性：貼壁生長
細(xì)胞培養(yǎng)中支原體污染的經(jīng)驗分享：支原體是一類缺乏細(xì)胞壁的原核細(xì)胞型微生物，大小一般在０.３-０.５um之間，呈高度多形性，有球形、桿形、絲狀、分枝狀等多種形態(tài)。它不同于細(xì)胞，也不同于病毒。支原體用普通染色法不易著色，用姬姆薩染色很淺，革蘭染色為陰性。支原體可在雞胚絨毛尿囊膜上或細(xì)胞培養(yǎng)中生長，營養(yǎng)要求比細(xì)菌高。細(xì)胞培養(yǎng)(特別是傳代細(xì)胞)被支原體污染是個世界性問題。在細(xì)胞培養(yǎng)中支原體感染發(fā)生率達(dá)到６３%，支原體感染發(fā)生后能改變細(xì)胞的DNA,RNA及蛋白表達(dá)，又不能通過可視法對其進(jìn)行檢測，而且它對細(xì)胞的生長率影響較小，不易引起注意。國內(nèi)外研究表明，９５%以上是以下四種支原體：口腔支原體(M.orale)、精酸支原體(M.arginini)、豬鼻支原體(M.hyorhinis)和萊氏無膽甾原體(A.laidlawii)，為牛源性。以上是最常見的污染細(xì)胞培養(yǎng)的支原體菌群，但能夠污染細(xì)胞的支原體種類是很多的，國外調(diào)查證明，大約有二十多種支原體能污染細(xì)胞，有的細(xì)胞株可以同時污染兩種以上的支原體。支原體污染的來源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染(一些支原體在人體是正常菌群)、培養(yǎng)基的污染、污染支原體的細(xì)胞造成的交叉污染、實驗器材帶來的污染和用來制備細(xì)胞的原始組織或器官的污染。組織細(xì)胞培養(yǎng)工作中，主要從以下幾個方面來預(yù)防支原體的污染：控制環(huán)境污染;嚴(yán)格實驗操作；細(xì)胞培養(yǎng)基和器材要保證無菌；在細(xì)胞培養(yǎng)基中加入適量的抗生素。支原體污染細(xì)胞后，特別是重要的細(xì)胞株，有必要清除支原體，常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補體聯(lián)合處理。支原體最突出的結(jié)構(gòu)特征是沒有細(xì)胞壁，一般來講，對作用于細(xì)胞壁生物合成的抗生素，如萬古霉素等完全不敏感；對多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺藥物普遍耐藥。對支原體最有抑制活性及常用于支原體感染治療的抗生素是四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類及一些喹諾酮;其他類抗生素如基糖苷類、霉素對支原體有較小抑制作用，所以常不用來作為支原體感染的化學(xué)治療劑。
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書
PE CA PJ34細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-716細(xì)胞、H-2286細(xì)胞、U-hth74細(xì)胞
NB-9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LYR細(xì)胞、HEM細(xì)胞、HEK-AD 293細(xì)胞
HCEpiC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C2BBe1細(xì)胞、Meat Animal Research Center-145細(xì)胞、RFL-6細(xì)胞
PGBE1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Simpson細(xì)胞、Clone 15 HL-60細(xì)胞、C6661細(xì)胞
HHUA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U266BL細(xì)胞、Hs-578Bst細(xì)胞、NK92-MI細(xì)胞
NCI-H2591細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AML 12細(xì)胞、MC38細(xì)胞、Tu 212細(xì)胞
SNT8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD33Co細(xì)胞、OCI-LY-10細(xì)胞、HP615細(xì)胞
BT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly 19細(xì)胞、SHP-77細(xì)胞、SCC25細(xì)胞
C-Lu65細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLP-2細(xì)胞、RCC10細(xì)胞、NCIH2009細(xì)胞
NG-108-15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TC-1 [Mouse lung]細(xì)胞、CL11細(xì)胞、BNL CL.2細(xì)胞
Sp2/0細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1623細(xì)胞、LS180細(xì)胞、NCIH187細(xì)胞
OE-21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colon26細(xì)胞、Jurkat E6.1細(xì)胞、H250細(xì)胞
TC-1[JHU-1]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI/AML5細(xì)胞、BEL/FU細(xì)胞、MLA 144細(xì)胞
H2085細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Epstein-Barr-1細(xì)胞、MC3T3, E1 subgroup-4 clone細(xì)胞、H1618細(xì)胞
NK 10a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1734細(xì)胞、C42細(xì)胞、KNS-81細(xì)胞
G361細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EBNA-293細(xì)胞、NCI H747細(xì)胞、PLC8024細(xì)胞
253J B-V細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MNNG/HOS Cl #5細(xì)胞、HEC-1A細(xì)胞、H838細(xì)胞
CWR-22rv1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-929細(xì)胞、Hs 606細(xì)胞、DF-1細(xì)胞
BCaP 37細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LA-N-1細(xì)胞、PC615.3細(xì)胞、AG06814-N細(xì)胞
U-118MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PK-15細(xì)胞、293EBNA細(xì)胞、HPDEC細(xì)胞
NCI-BL1339細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Neuro-2a細(xì)胞、Tb 1-Lu細(xì)胞、NCTC1469細(xì)胞
NCI-BL1339細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Neuro-2a細(xì)胞、Tb 1-Lu細(xì)胞、NCTC1469細(xì)胞
NCI-SNU-668細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16-BL6細(xì)胞、PATU-S細(xì)胞、L2細(xì)胞
H-650細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LCLC103H細(xì)胞、ARO 81-1細(xì)胞、AtT 20細(xì)胞
CF Pac1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：bEND.3細(xì)胞、32D-Cl3細(xì)胞、HCC-1588細(xì)胞
HO1N1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Case 3細(xì)胞、Clone M-3細(xì)胞、VMM5A細(xì)胞
C32 [Human melanoma] Thawing人黑色素瘤細(xì)胞系
Leydig細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CTSC-3細(xì)胞、BPH-1細(xì)胞、MC3T3-L1細(xì)胞
OVCAR 432細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ME16C細(xì)胞、Sarcoma OSteogenic-2細(xì)胞、HEI193細(xì)胞
NUGC-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LNCaP C4-2細(xì)胞、HBE 135-E6/E7細(xì)胞、H1703細(xì)胞
HFL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HeLaS3細(xì)胞、hTERT RPE-1細(xì)胞、SKLU-1細(xì)胞
X63-Ag 8.6.5.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MX1細(xì)胞、FRH-0201細(xì)胞、H-1581細(xì)胞
TK 10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC-116細(xì)胞、AG06814-N細(xì)胞、CAL851細(xì)胞
SNU761細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1694細(xì)胞、H1755細(xì)胞、Bac 1.2F5細(xì)胞
GM-215細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2286細(xì)胞、KP-N-YN細(xì)胞、MonoMac 6細(xì)胞
GalK 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Homo sapiens No. 578, breast cells細(xì)胞、HEB細(xì)胞、WiDr細(xì)胞
JB-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H322細(xì)胞、NCIH740細(xì)胞、COLO 824細(xì)胞
LS411細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2195細(xì)胞、NCI-H1668細(xì)胞、HCC1954細(xì)胞
PLC-PRF-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH345細(xì)胞、DU 4475細(xì)胞、207細(xì)胞
C-Lu65細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLP-2細(xì)胞、RCC10細(xì)胞、NCIH2009細(xì)胞
B-95-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-cell細(xì)胞、CAMA細(xì)胞、KTC-1細(xì)胞
FDCP1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RT4P細(xì)胞、CCRF/CEM細(xì)胞、COR-L23細(xì)胞
PLA801-95D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SJSA細(xì)胞、Panc05.04細(xì)胞、MPC 11細(xì)胞
NCI-SNU-C2A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU 86.86細(xì)胞、TE4細(xì)胞、TE4細(xì)胞
hTERTHME1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL-3細(xì)胞、PaCa2細(xì)胞、LY-R細(xì)胞
H9c2 (2-1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT clone H9細(xì)胞、SKRC-52細(xì)胞、LIPF155C細(xì)胞
hUC-MSC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH378細(xì)胞、CHO-ori細(xì)胞、MXI細(xì)胞
UMR-106細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NK 10a細(xì)胞、T8細(xì)胞、HOS-TE85細(xì)胞
N1E-115細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：87MG細(xì)胞、MDA-MB-175-VII細(xì)胞、AML193細(xì)胞
SUM 102PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H660細(xì)胞、BC-009細(xì)胞、SK-LU-1細(xì)胞
PNT1/A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1599細(xì)胞、Hs729T細(xì)胞、NRK-49F細(xì)胞
TE 671細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC15細(xì)胞、RT4細(xì)胞、SACCLM細(xì)胞
KMB-17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE354T細(xì)胞、IOSE-80細(xì)胞、Med 283細(xì)胞
H-322細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LOU-NH91細(xì)胞、NCI-H125細(xì)胞、KLM1細(xì)胞
T173細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hep-G2/C3A細(xì)胞、GOS3細(xì)胞、SUNE-1細(xì)胞
NCIH146細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H64細(xì)胞、A375SM細(xì)胞、293-F細(xì)胞
786-0WT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PATU-S細(xì)胞、BXPC3細(xì)胞、TW 01細(xì)胞
EVSAT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MB49細(xì)胞、HCC0044細(xì)胞、PVEC細(xì)胞
SL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Cates-1B細(xì)胞、NCI-H2347細(xì)胞、TFK1細(xì)胞
NCI-H1944細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RBL2H3細(xì)胞、RA細(xì)胞、NCI-H596細(xì)胞
C32 [Human melanoma] Thawing人黑色素瘤細(xì)胞系
TC-1 [Mouse lung]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 274細(xì)胞、HuH-28細(xì)胞、NCIH2023細(xì)胞
Jurkat-E6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Baby Hamster Kidney-21細(xì)胞、WM-451Lu細(xì)胞、NIH 3T6細(xì)胞
Jurkat-E6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Baby Hamster Kidney-21細(xì)胞、WM-451Lu細(xì)胞、NIH 3T6細(xì)胞
SF-539細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCCVII細(xì)胞、HCC4006細(xì)胞、UMR 106細(xì)胞
REC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MKN-7細(xì)胞、HEMCSS細(xì)胞、CEM clone 7細(xì)胞
Becker細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WI38細(xì)胞、L cell line細(xì)胞、PCI:SG231細(xì)胞
WIL2S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TGW細(xì)胞、HOC細(xì)胞、SF-539細(xì)胞
NCIH2196細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT/Taxo1細(xì)胞、CAOV4細(xì)胞、RKO_AS45細(xì)胞
KASUMI6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1435細(xì)胞、OCI/AML-3細(xì)胞、RMG1細(xì)胞
HT55細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM 159PT細(xì)胞、UM-UC-14細(xì)胞、ML-2細(xì)胞
MeT-5A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-549細(xì)胞、SK-ES1細(xì)胞、PANC 327細(xì)胞
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