"NCI-H2066 Thawing人肺癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
NCI-H2066 Thawing人肺癌細胞系
細胞生長：貼壁
傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細胞培養(yǎng)成功以后，需要進行分離培養(yǎng)，否則細胞會因生存空間不足或密度過大，營養(yǎng)障礙，影響細胞生長。細胞由原培養(yǎng)瓶內(nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細胞允許培養(yǎng)的細胞擴增(形成細胞株)，可以進行細胞克隆，易于保存，但可能喪失一些特殊的細胞和分化特征。傳代細胞形成細胞株的利處在于提供了大量持久的實驗材料，便于實驗。【操作步驟】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進行觀察，當發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細胞間隙增大后，應(yīng)立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶內(nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶內(nèi)培養(yǎng)液，按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細胞，使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。吹打時動作要輕柔，以防用力過猛損傷細胞；６)用計數(shù)板計數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)；７)細胞培養(yǎng)換液時間應(yīng)根據(jù)細胞生長的狀態(tài)和實驗要求來確定。一般２～３d后應(yīng)換一次生長液。待細胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴大培養(yǎng)或換成維持液?！咀⒁馐马棥浚?掌握好細胞消化的時間，消化時間過短時，細胞不宜從瓶壁脫落，過長的消化會導(dǎo)致細胞脫落、損傷；２)掌握好消化濃度，當消化液濃度過高時，消化時間應(yīng)縮短，過低時細胞消化時間相對延長。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：每周換液２-３次
在細胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細胞生長角度來說，針對細胞培養(yǎng)過程中生長不好、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細胞生長不好》可能原因：細胞本身的狀態(tài)》1)細胞傳代次數(shù)多，細胞老化；2)細胞的接種量：接種量過低，細胞生長緩慢；3)細胞傳代時間過晚：細胞中毒，影響傳代后的細胞生長；4)胰酶消化時間過長或過短：時間過長，細胞死亡；時間過短，細胞未完全分離而成團，細胞死亡；5)細胞的凍存與復(fù)蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進行驗證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應(yīng)是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個方面的可能原因，做出針對性的解決方案》1)注意細胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，經(jīng)過驗證；4)注意實驗室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動太大；3)細胞凍存或復(fù)蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細胞種；4)檢測培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
NCI-H2066 Thawing人肺癌細胞系
細胞生長特性：懸浮生長
實驗室細胞培養(yǎng)基知識簡介：干粉培養(yǎng)基：以前大部分實驗室都是用干粉培養(yǎng)基，但配制過程就較為繁瑣，要溶解、調(diào)pH值，過濾，過程中可能會產(chǎn)生一些濃度誤差，而且有些實驗室的水質(zhì)并不理想，所以培養(yǎng)的效果會有差異。如果使用液體培養(yǎng)基，這種人為的誤差會減少，因為畢竟是大批量工業(yè)化生產(chǎn)的，批間差會很小。大家是不是感覺液體培養(yǎng)基會貴很多，以前是這樣，但現(xiàn)在大家都認同了；無血清培養(yǎng)基(Serum-Free Media)，通常以SFM表示，顧名思義，就是在細胞培養(yǎng)中不需要添加血清，但是在某些應(yīng)用中可能要添加生長因子或細胞因子。無血清培養(yǎng)基中添加了血清的主要成分：粘附因子、生長因子、必需的營養(yǎng)物質(zhì)和激素等，能減少上述血清帶來的不利因素，使細胞培養(yǎng)的條件更穩(wěn)定。但它也不是完美的，從有血清培養(yǎng)過渡到無血清培養(yǎng)的條件并不像想象中那么直截了當。處于發(fā)育的不同分化階段的細胞(例如干細胞與定向前體細胞相比)需要不同的配方，對生長因子和細胞因子的選擇尤為重要。而且在去除血清的同時，也去除了一些血清蛋白具有的保護、解毒作用，因此對試劑、水的純度和儀器清潔度的要求更高。另外，它的價格也比普通的培養(yǎng)基貴很多。
細胞形態(tài)特性：聚團懸浮
KYSE0410細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H929細胞、GTL-16細胞、SKG-IIIa細胞
TCCPAN2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HLEC細胞、QGP-1細胞、OP9細胞
LX-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-435S細胞、OVCA433_Bast細胞、GM04678細胞
293 c18細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-668細胞、HPAF-I細胞、A431/P細胞
OVISE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1954BL細胞、H2087細胞、HM細胞
I90細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MES 13細胞、SW1463細胞、INS-1細胞
SKNBE(2c)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Melan-a細胞、HCA 7細胞、NCI-H522細胞
SuDHL 10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Madin-Darby Canine Kidney細胞、CATHa細胞、SK-MEL 28細胞
H-676B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MHCCLM3細胞、MN-9D細胞、NT2-D1細胞
HCCC9810細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 840.T細胞、MEL細胞、Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a細胞
Caov-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IR983F細胞、Cor L51細胞、SW13細胞
COLO684細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GP5d細胞、MDA134細胞、SNUC1細胞
H1734細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-250細胞、211H細胞、BE2C細胞
SW-962細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2126細胞、Jiyoye (P-2003)細胞、CFPAC1細胞
SW1463細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H69細胞、NCI-H2030細胞、H-711細胞
KALS-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RA 1細胞、Kit225細胞、T HEECs細胞
K1735細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C3H 10T1/2細胞、Hs 742.T細胞、LI7細胞
CHP-100細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC9細胞、CAL-33細胞、HPDE6c7細胞
Me Wo細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB453細胞、SUM 159PT細胞、SW 1417細胞
TR146細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NK-92 transfected with MFG-hIL2細胞、T98 G細胞、TF-1細胞
WILL-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Baby Hamster Kidney from litter No. 21細胞、BMF細胞、NCIH2172細胞
WILL-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Baby Hamster Kidney from litter No. 21細胞、BMF細胞、NCIH2172細胞
Vero C1008細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 206F細胞、SU 86.86細胞、TW01細胞
HPAEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vero細胞、FBHE細胞、SK-SH-SY5Y細胞
HepG2-luc細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNO1細胞、TE 671細胞、NRK clone 49F細胞
CAL 12T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOS-TE85細胞、SW-1990細胞、MES-SA/Dx-5細胞
NCI-H2066 Thawing人肺癌細胞系
NCI-HUT-520細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3J HR-1細胞、RS(4;11)細胞、MF2059細胞
SACC-83細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LM-TK-細胞、SGC996細胞、HCC-38細胞
SMA560細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kit 225 K6細胞、CEM/0細胞、PECAPJ34細胞
Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-676B細胞、Centre Antoine Lacassagne-148細胞、RIN-m 14B細胞
RPMI1846細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE50細胞、RSC-96細胞、HASMC細胞
Menschliche Und Tierische Zellkulture-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1838細胞、H157細胞、SK 1細胞
SKNBE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PZ-HPV-7細胞、L-132細胞、H-446細胞
Centre Antoine Lacassagne-51細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LWnt-3A細胞、HT 1197.T細胞、SRA01/04細胞
VP 229細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-680N細胞、BTI-Tn-5B1-4細胞、UM-UC3細胞
CEM-C1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Reuber H35細胞、AG06814-J細胞、Hs 729細胞
N1E115細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ST-2細胞、Calu-6細胞、Kit225 K6細胞
ES-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI/AML-2細胞、GMK,BSC-1細胞、TOV-112細胞
OE21細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H508細胞、ECV304細胞、H64細胞
GM03569細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UCLA NPA-87-1細胞、NCIH3255細胞、BV2細胞
NCIH647細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kit 225-K6細胞、Tca-83細胞、CX1細胞
BEL7404細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Detroit562細胞、LNCaP FGC細胞、SACC83細胞
DU 145細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Fetal Human Lens-124細胞、McA-RH 8994細胞、U118-MG細胞
COLO.205細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC3細胞、RCM1細胞、NCI-1155細胞
BERH-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MM1-S細胞、HL-7702細胞、Roswell Park Memorial Institute 2650細胞
PTK2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JIII細胞、OVCAR3細胞、MDA-MB-435 S細胞
JB6 [Mouse]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NRK49F細胞、CL1-5細胞、ST-2細胞
THP1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBVP細胞、WM115-mel細胞、MUTZ3細胞
624mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO206細胞、K-562細胞、HUT-28細胞
95D細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCUM-1細胞、C4-2細胞、NTHY-ORI3.1細胞
NCIH647細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kit 225-K6細胞、Tca-83細胞、CX1細胞
CCRF/CEM/0細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H9c2(2-1)細胞、HCC-1419細胞、H661細胞
HTSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LIM-1215細胞、Ej138細胞、HTori-3細胞
NK10a細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuTu 80細胞、UMUC14細胞、SN12PM6細胞
KU-19-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MM1.S細胞、SK-NEP-1細胞、HT細胞
CTLL(2)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KU-19-19細胞、SLMT-1細胞、MC9細胞
PLCPRF5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCL-II細胞、QBC939細胞、L929(NCTC)細胞
HECV細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD 19Lu細胞、NCTC 3960細胞、PANC-28細胞
MuM-2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MNNG細胞、KYSE 70細胞、CL34細胞
NCI-H2066 Thawing人肺癌細胞系
HuP-T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-CO-1細胞、SMMC-7721細胞、HCT-116細胞
BEL7404細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Detroit562細胞、LNCaP FGC細胞、SACC83細胞
NCI-H865細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU-DHL-6細胞、AZ-521細胞、SU-DHL-2細胞
Hs-729-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI8226細胞、OCILY-10細胞、MM96L細胞
IMR-32細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BpRcl細胞、SKNF1細胞、Hs729T細胞
Strain L-929細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LED-WiDr細胞、H1915細胞、MT-4細胞
IPLB-SF 21AE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKO3細胞、Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2細胞、HCC-2108細胞
P 815細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SPCA1細胞、SNU354細胞、EU-3細胞
MC3T3-E1 Subclone 24細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1666_DA細胞、526mel細胞、Lung cancer-1/squamous細胞
DR2R1610細胞系相關(guān)產(chǎn)品：253J細胞、50.B1細胞、Tregs細胞
SU-DHL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs695細胞、HEC1B細胞、Mono-Mac-6細胞
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