"SHP-77 Thawing人肺癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
SHP-77 Thawing人肺癌細胞系
細胞生長：貼壁
接收細胞相關(guān)問題：如不能在收到細胞后及時操作細胞，T２５及離心管發(fā)貨的細胞將可以消毒后在３７度過夜，血清發(fā)貨的細胞在室溫下靜置１-２天(注意不要放冰箱)，干冰發(fā)貨的可以在確認干冰未完全升華時將細胞直接放回液氮或者-８０度冰箱，若干冰完全升華，請即刻復(fù)蘇細胞。T２５瓶及離心管在培養(yǎng)箱平衡是為了讓細胞盡快適應(yīng)培養(yǎng)箱環(huán)境，同時使部分因運輸導(dǎo)致脫落的細胞貼壁，此步驟非常必要。T２５瓶如果在顯微鏡下可以看到部分不貼壁的細胞，可以收集上清后離心(１２００rpm，５min)后，將沉淀用新的培養(yǎng)基重懸后接種至新的培養(yǎng)瓶或皿中。部分細胞在運輸過程中，由于不斷震蕩及環(huán)境不適，可能導(dǎo)致細胞破碎死亡，從而使培養(yǎng)基中漂浮很多細胞碎片及顆粒狀物質(zhì)。這種情況下，平衡后，貼壁細胞用PBS洗兩遍再加新的培養(yǎng)基培養(yǎng)或者傳代至新瓶中培養(yǎng)即可；懸浮細胞可以離心(１０００rpm，３min)收集細胞，并用PBS重懸后再離心一次，再用新的培養(yǎng)基重懸并接種細胞。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：３-４天換液１次。
細胞培養(yǎng)時分布不均勻，通常操作步驟：做細胞生物學(xué)實驗，細胞鋪板大概是我們最常見的一個實驗。但有時候鋪得不是很均勻：要么中間密周圍稀，要么周圍密中間禿頂。下面為大家分享幾點經(jīng)驗。盡量消化細胞分散成單細胞懸液。對于易于消化的細胞，我一般DPBS清洗一遍，加0.5ml胰酶潤洗一遍（25cm2培養(yǎng)瓶或6孔板），棄掉胰酶，37度消化2-3分鐘或室溫消化5min左右，鏡下觀察是否細胞消化較為分散。如果不夠，延長消化時間。96孔板一般以100微升每孔接種，直接用100微升移液器吸取細胞懸液，沿孔壁（稍離開一點孔底即可，不要離底太高）直接接入，移液器不需完全打到，輕輕按下即可，每鋪完一行換一次槍頭同時輕輕混勻細胞懸液。都加完后蓋上蓋子，左手輕輕扶住板的左邊，右手輕輕敲擊板的右邊緣，注意把握力度（我一般輕巧敲三下），太強或次數(shù)太多會導(dǎo)致細胞集中成堆，將板順時針旋轉(zhuǎn)（逆時針效果不好），依次敲擊剩余三個邊，靜置約5分鐘，放入37度培養(yǎng)箱。6孔板、12孔板或24孔板，可采用將每個孔加入少量無血清培養(yǎng)基，晃動浸潤整個孔底，然后用移液槍吸至第二孔，同樣方法浸潤孔底，其它孔依此類推，這樣整個孔底都是濕潤的，細胞懸液會平鋪在整個孔底，注意加完細胞懸液后要放工作臺靜置一下。這個方法就是有點慢，但操作熟練了也不慢。也可以采用輕拍的方式，但力度沒有96孔板好掌握，效果沒有96孔板好。培養(yǎng)瓶里面加好細胞以后(比如傳代好/分好細胞以后)，先順時針搖晃3次，馬上逆時針搖晃3次。然后延X軸Y軸分別水平搖動3次。放入CO2培養(yǎng)箱后,平放著培養(yǎng)瓶重復(fù)延X軸Y軸分別水平搖動3次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
SHP-77 Thawing人肺癌細胞系
細胞生長特性：懸浮生長，少量貼壁
我常看到一個比較復(fù)雜的四步消化法，這個挺有意思，我也是次聽說，應(yīng)該是網(wǎng)友自己發(fā)展出來的方法，很有參考價值。但我估計這個方法可能對付少數(shù)非常怪異的細胞才需要這么復(fù)雜的程序。我目前養(yǎng)過的近３００株細胞里面，還沒遇到這么怪異的。比如Caco２其實是很好消化的細胞，不需要胰酶孵育即可，只是有點成片分布。不要以為成片分布是自己沒養(yǎng)好，這個視細胞而定。如果和標準形態(tài)不一致，那可能是自己沒消化好導(dǎo)致的，但如果消化方法正確，仍然成片分布，甚至完全吹打成單細胞懸液，貼壁后仍然成片分布，這是細胞的特性，是因為貼壁過程中重新聚集了。這個時候你拼了命要去讓它均勻分布，你的細胞之后會對你越來越不好；比較難消化的細胞(潤洗方法５min還不能消化)，就以colon cancer為例，比如HCT１５, LS４１１和KM１２，這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００ mm dish，一次最多加入５００ul，就足夠了，一般我加３００ul。即使這樣難消化的細胞，一般不超過５min，即可見細胞成片移動，就應(yīng)該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候，比如tsDC細胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙狀移動。
細胞形態(tài)特性：上皮細胞
Colo699細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2330細胞、H-661細胞、HCT116/L細胞
TM-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OAC-P4C細胞、HEC-1-B細胞、CCD966SK細胞
SUM 159PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM02132細胞、TE-5細胞、P3-X63Ag8.653細胞
CAL 12T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOS-TE85細胞、SW-1990細胞、MES-SA/Dx-5細胞
HCT 116細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1694細胞、MOLT-16細胞、Metastatic Variant-522細胞
HTh 74細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-415細胞、GM00637細胞、IOSE-Mar細胞
NK-10A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：X63細胞、EFO 27細胞、LL/2(LLc1)細胞
H520細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EoL-1 cell細胞、NCIH660細胞、MLA-144細胞
NCIN87細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1876細胞、NCIH841細胞、NCI-H2405細胞
NCI.H226細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEC1-B細胞、5-8F細胞、NCI H508細胞
COLO320/DM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pro-Lec1.3C細胞、Jurkat-FHCRC細胞、GOTO細胞
J774A1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H676細胞、OVCAR 432細胞、CaEs17細胞
PATU-S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SHZ-88細胞、NCI-460細胞、SW620細胞
PLA-802細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC-025細胞、H1930細胞、SK-ChA1細胞
Hs 600.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B 95.8細胞、RINm-5F細胞、Ej138細胞
Chinese Hamster Ovary細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs934T細胞、JROECL19細胞、Rat Basophilic Leukemia-1細胞
H295細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T173細胞、CMK細胞、KRCY細胞
HEK 293-EBNA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HIT clone T15細胞、NCIH211細胞、SUM-52-PE細胞
LS 1034細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)細胞、LY細胞、OVCA 433細胞
BT-325細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU601細胞、Merwin Plasma Cell tumor-11細胞、NCI-H87細胞
639V細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs695T細胞、OPM2細胞、SUDHL-4細胞
639V細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs695T細胞、OPM2細胞、SUDHL-4細胞
Calu-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-378細胞、OP-9細胞、Hs 611.T細胞
USMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UT7細胞、Hs 840.T細胞、HEK-293-F細胞
SW1088細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3X63NS1細胞、SUDHL-2細胞、SW-1573細胞
Colo-201細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NK-92 MI細胞、BEL 7404細胞、Ha Fe細胞
SHP-77 Thawing人肺癌細胞系
Hs 274.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KU.812細胞、HECV細胞、NCIH23細胞
End1/E6E7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vero E6細胞、HECCL-1細胞、H1869細胞
LS123細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS-68細胞、A-172 MG細胞、HSMC細胞
SV40-HCEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IOSE-Mar細胞、Capan 2細胞、Nthy ori 3.1細胞
SCC-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1048細胞、TE7細胞、SUM-149PT細胞
NCI-H196細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIE-115細胞、Centre Antoine Lacassagne-12T細胞、L615細胞
CCC-HIE-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293EBNA細胞、293 H細胞、Gejiu Lung Carcinoma-82細胞
MOVAS-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Liver-7702細胞、NCI-H460細胞、WM266細胞
CL-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1細胞、MGH-U3 (RN)細胞、RC13細胞
WM 239-A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BCP1細胞、H-2106細胞、TE353.SK細胞
QBC-939細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RC13細胞、TSUpr1細胞、P31/Fujioka細胞
RBE4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B95-8細胞、MCF-12F細胞、NCIH522細胞
ssMCF-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-C1細胞、NCI.H522細胞、AZ 521細胞
PC615.3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC827細胞、LIM1215細胞、BEL7402細胞
H82sclc細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Y 1細胞、SCC-4細胞、Pro-5WgaRI3C細胞
3T3 Swiss Albino細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVTOKO細胞、BNL CL2細胞、CCK81細胞
LAN1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCE細胞、SKG-IIIa細胞、Mac-1細胞
AAV-293細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P19細胞、A1847細胞、HECV細胞
NCIH1838細胞系相關(guān)產(chǎn)品：High Five細胞、A-20細胞、RMS 1598細胞
SW403細胞系相關(guān)產(chǎn)品：V-79細胞、no-11細胞、6T-CEM細胞
Tregs細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Epstein-Barr-3細胞、SCC9細胞、SKNBE2細胞
NCIH23細胞系相關(guān)產(chǎn)品：mIMCD-3細胞、SUPM2細胞、U-118-MG細胞
SMMC-7721細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD841CoN細胞、NCIH1651細胞、L Wnt-3A細胞
N1E115細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ST-2細胞、Calu-6細胞、Kit225 K6細胞
SPCA1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hep-G2細胞、DHL-5細胞、CCD 966 SK細胞
Centre Antoine Lacassagne-78細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-548細胞、LNT-229細胞、NTERA2-cloneD1細胞
HONE1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T2 (174 x CEM.T2)細胞、TR-146細胞、Rin-M-5F細胞
JKT-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEYA8細胞、NCI-SNU-449細胞、HCC0366細胞
NCI-H1417細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KTCTL-140細胞、SNU-620細胞、HuT78細胞
MKN 7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCAEC細胞、COR-L279細胞、JEG-3細胞
H-2405細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lu-99A細胞、WiDr細胞、WM115F細胞
SN12CPM6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SV40-HCEC細胞、COLO 320HSR細胞、Hs-274-T細胞
Li-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCTC clone 929細胞、Balb/3T3-4-Cl31細胞、VM-CUB-I細胞
SHP-77 Thawing人肺癌細胞系
TF-1a細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Karpas299細胞、KYSE-140細胞、S37細胞
HOP62細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UM-RC-2細胞、SK-OV-3細胞、Ku812F細胞
SW-1990細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2342細胞、NB19-RIKEN細胞、SKNEP細胞
H-7721細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TSU-Pr1細胞、TGBC-11-TKB細胞、HEp-2細胞
HuH28細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IHH4細胞、LS 513細胞、PTK-2細胞
IGR-OV1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1734細胞、EMT6細胞、MFD-1細胞
ECV 304細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL24細胞、NCI-H596細胞、THLE-2細胞
H-28細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2126細胞、NCI-H2228細胞、UACC-812細胞
SNU5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-C2B細胞、Hela-Ap-1細胞、HEK 293-EBNA細胞
HuP-T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-CO-1細胞、SMMC-7721細胞、HCT-116細胞
LM2-4175細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Spodoptera frugiperda clone 9細胞、MHCC97細胞、T-98G細胞
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