"NCI-H1666 Thawing人肺支氣管癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
NCI-H1666 Thawing人肺支氣管癌細胞系
細胞生長：貼壁
細胞接收操作說明：請仔細閱讀本操作說明及相應(yīng)的細胞說明書。本公司細胞發(fā)貨有四種形式：T２５培養(yǎng)瓶(一般是貼壁細胞使用，懸浮細胞也可以)、離心管(懸浮細胞使用多，當然，有些公司也會用這種離心管形式發(fā)貼壁細胞，但是，長期經(jīng)驗來說，貼壁細胞容易發(fā)生形態(tài)變化，估計是細胞培養(yǎng)空間狹小，血清不足導致(最主要是怕運輸延誤導致這些情況發(fā)生)，個人不建議用離心管形式發(fā)貼壁細胞)及干冰(凍存細胞用，主要是冬天天氣冷，溫度低于４℃的地方，都要考慮凍存細胞)。T２５培養(yǎng)瓶：是用T２５細胞培養(yǎng)瓶直接發(fā)貨的形式。收到細胞后，拆開包裝T２５培養(yǎng)瓶的自封袋，不拆封口膜，表面噴７５%酒精消毒后顯微鏡觀察細胞狀態(tài)(有條件可以拍下此時細胞照片)。將細胞放入３７度培養(yǎng)箱平衡兩小時以上，再處理細胞。首先將T２５中培養(yǎng)基取出裝好備用，如細胞密度高于８０%，可以直接消化傳代，相反則加入５-６ml培養(yǎng)基放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)即可。離心管：是用１５ml離心管發(fā)貨的形式，只用于懸浮細胞發(fā)貨。收到細胞后消毒處理及將細胞放入３７度培養(yǎng)箱平衡兩小時以上，再處理細胞。首先將T２５中培養(yǎng)基取出裝好備用(如果實驗室沒有T２５培養(yǎng)瓶，可以暫時T７５培養(yǎng)瓶，加入１０-１５ml培養(yǎng)基，建議１０ml培養(yǎng)基，也可以使用T１７５培養(yǎng)瓶，加入５０-６０ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)瓶越大，需要的培養(yǎng)基越多。當然如果剛接收到細胞密度不夠的話，不用大瓶子，先用小瓶子養(yǎng)起來再換大的，不然會長得很慢，嚴重的，會導致細胞死亡等危險)，平衡完成后，離心(１０００rpm，３min)收集細胞，棄上清，用新的培養(yǎng)基重懸細胞并接種至培養(yǎng)瓶或皿中，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。干冰：是用本公司凍存液凍存細胞后，直接用干冰將凍存的細胞冷凍發(fā)貨的形式。收到細胞后按照細胞復蘇的步驟操作即可。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：４傳代；每周換液２次。
懸浮細胞不容易轉(zhuǎn)染：懸浮細胞是指細胞生長不依賴支持物表面，在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長，如淋巴細胞。在實驗室經(jīng)常會遇到懸浮細胞的轉(zhuǎn)染，其和貼壁細胞轉(zhuǎn)染還是有很大不同的。目前大多數(shù)實驗室用的是脂質(zhì)體類的轉(zhuǎn)染試劑，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染是基于電荷吸引原理，先形成脂質(zhì)體-DNA復合物，散布在細胞周圍，然后通過細胞的內(nèi)吞作用，將目的基因?qū)爰毎麅?nèi)，而脂質(zhì)體復合物與貼壁細胞的接觸機會比懸浮細胞高出很多倍，所以，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染時懸浮細胞的轉(zhuǎn)染效率要明顯低于貼壁細胞。其次，脂質(zhì)體試劑的毒性較大，這就使得懸浮細胞的轉(zhuǎn)染更為困難了。另外，懸浮細胞不易培養(yǎng)，易死亡，也給細胞轉(zhuǎn)染造成了一定的困難。為了提高懸浮細胞的轉(zhuǎn)染效率，可以使用非脂質(zhì)體的轉(zhuǎn)染試劑，如納米材料的。也可以使用電轉(zhuǎn)染方法，針對懸浮細胞等難轉(zhuǎn)染細胞還是挺不錯的，電擊對細胞有一定的損傷，選用具有細胞膜修復功能的電轉(zhuǎn)染試劑，可以將電擊對細胞的傷害降到最低，懸浮細胞不易轉(zhuǎn)染，選對試劑及良好的細胞培養(yǎng)環(huán)境才是關(guān)鍵。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
NCI-H1666 Thawing人肺支氣管癌細胞系
細胞生長特性：貼壁生長，松散
【胰蛋白酶消化操作】１)加入消化液：小心吸出舊培養(yǎng)液，用PBS清洗(沖洗)，加入適量消化液(胰蛋白酶液)，注意消化液的量以蓋住細胞，消化溫度是３７℃；２)顯微鏡下觀察細胞：倒置顯微鏡下觀察消化細胞，若胞質(zhì)回縮，細胞之間不再連接成片，表明此時細胞消化適度；(３)吸棄消化液加入培養(yǎng)液：棄去胰蛋白酶液，注意更換吸管，加入新鮮的培養(yǎng)液?！敬荡蚍稚⒓毎僮鳌浚?吹打制懸：用滴管將已經(jīng)消化細胞吹打成細胞懸液；２)吸細胞懸液入離心管：將細胞懸液吸入１０ml離心管中；３)平衡離心：平衡后將離心管放入臺式離心機中，以１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心６-８分鐘；４)棄上清液，加入新培養(yǎng)液：棄去上清液，加入２ml培養(yǎng)液，用滴管輕輕吹打細胞制成細胞懸液。【分裝稀釋細胞操作】１)顯微鏡下觀察細胞：倒置顯微鏡下觀察細胞量，必要是計數(shù)。注意密度過小會影響傳代細胞的生長，傳代細胞的密度應(yīng)該不低于５×１０５/ml。最后要做好標記；２)分裝：將細胞懸液吸出分裝至２～３個培養(yǎng)瓶中，加入適量培養(yǎng)基旋緊瓶蓋；３)繼續(xù)培養(yǎng)：用酒精棉球擦拭培養(yǎng)瓶，適當旋松瓶蓋，放入CO２培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。傳代細胞２小時后開始貼附在瓶壁上。
細胞形態(tài)特性：上皮細胞
SKM-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HGMC細胞、GM00637H細胞、L cells細胞
TEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BNL.CL2細胞、SK Mel 2細胞、LM3細胞
MBdSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH810細胞、MC3T3-E細胞、HCT.116細胞
NUGC-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-735細胞、MOLT 16細胞、HTR-8/SV neo細胞
LX-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-435S細胞、OVCA433_Bast細胞、GM04678細胞
ECC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC3T3-E1 Subclone 24細胞、GM-3573細胞、DKMG細胞
H-838細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCLP-1細胞、ACC3細胞、IMR 90細胞
NTera2/D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PK13細胞、LOUNH91細胞、HEK293A細胞
KU812-F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：639V細胞、B35細胞、Pro-5 Lec1.3c細胞
GM00346細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-3細胞、BT474細胞、HFL-1細胞
NSC34細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTera 2/cl.D1細胞、H.Ep. #2細胞、LC1-Sq細胞
VCaP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs274T細胞、LNCaP-C4-2細胞、SKOV-3細胞
PANC0813細胞系相關(guān)產(chǎn)品：293c18細胞、P3/ag細胞、BRL-3A細胞
HCC-94細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPE D407細胞、8226/S細胞、H2081細胞
IFRS1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-423細胞、MDA 231-LM2-4175細胞、OVCAR 4細胞
FCCH1018細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VP 229細胞、McA-RH 7777細胞、HeLa 229細胞
H.Ep.-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-886細胞、PLA802細胞、BT-B細胞
RL95-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Clone 166細胞、GM03570細胞、Molm 13細胞
A-431細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RL95-2細胞、Raji細胞、SKBR-3細胞
624 MEL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNUC1細胞、CCD-841CoN細胞、COLO-684細胞
MOLM-16細胞系相關(guān)產(chǎn)品：McA-RH8994細胞、Hs 766T細胞、L-428細胞
MOLM-16細胞系相關(guān)產(chǎn)品：McA-RH8994細胞、Hs 766T細胞、L-428細胞
NIH:OVCAR-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：X63-Ag8.653細胞、QBI-HEK 293A細胞、IEC-6細胞
BT549細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEC1-A細胞、U343MG細胞、DMS79細胞
AX-Mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TCMK-1細胞、OCUM-1細胞、AE 1201細胞
HCC0366細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF/Adr細胞、RN-c細胞、NTC200細胞
NCI-H1666 Thawing人肺支氣管癌細胞系
BLO11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H508細胞、H522細胞、C918細胞
REC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JROECL21細胞、SUD6細胞、C4-2B細胞
SCC VII細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AN3-CA細胞、Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2細胞、MFE296細胞
FT-293細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B104 [Rat neuroblastoma]細胞、ARH-77細胞、NPA87-1細胞
KG1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BE2M17細胞、U-87MG ATCC細胞、Hs 766T細胞
IMR90細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Natural Killer-92細胞、Line 522細胞、COLO684細胞
HuPT3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LU165細胞、624-mel細胞、COLO-738細胞
CMT-93細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Bac1 2F5細胞、D341MD細胞、H1105細胞
Ramos (RA 1)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：hESC細胞、K7M2 wt細胞、SW-1990細胞
BMDC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KGN細胞、AHH-1細胞、MDA MB 231細胞
H2081細胞系相關(guān)產(chǎn)品：hFOB細胞、NCI-H2171細胞、CP70細胞
SU-86-86細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCA 7細胞、NCIH820細胞、OVCA8細胞
LK-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RAEC細胞、COLO 829細胞、A1847細胞
MC3T3, E1 subgroup-4 clone細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ketr-3細胞、HAPI細胞、C-6細胞
C-4I細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BMF細胞、YH-13細胞、Pa18C細胞
PCI-4M細胞系相關(guān)產(chǎn)品：hTERT RPE1細胞、52PE細胞、WM451Lu細胞
BpRcl細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTR-8/SV neo細胞、NCI-H508細胞、ARH 77細胞
NG108-15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MRAEC細胞、Centre Antoine Lacassagne-78細胞、AA-Mel細胞
NCI-H28細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Nittby-Salford 1細胞、L929(NCTC)細胞、H774細胞
ROS 17/28細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-427細胞、BpRcl細胞、Ly19細胞
GP5d細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKES-1細胞、OCI-AML2細胞、Vero細胞
Granta519細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE15細胞、Balb/c 3T3細胞、Ishikawa細胞
GM06141B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MGH-U1 (EJ)細胞、SN12-PM6細胞、H-719細胞
343MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Fox/NY細胞、ECC-12細胞、BCP-1細胞
H-2126細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A253細胞、VCaP細胞、Be Wo細胞
GA-10 clone 4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P388.D1細胞、Hs 636 T細胞、SNU-869細胞
SU4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NW38細胞、MCA-38細胞、CAL-39細胞
COR-L23/P細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RKO-E6細胞、AtT 20細胞、NALM-6細胞
NTERA-2 clone D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H226細胞、H-226細胞、C81-61細胞
766T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EnCa1細胞、ABC-1細胞、RS4-11細胞
SF-763細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF SB細胞、RH8994細胞、L cell line細胞
SNK6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BJA-B1細胞、H69C細胞、CCC-HPF-1細胞
D341MD細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SHI-1細胞、Verda reno細胞、COLO-320-HSR細胞
NCI-H1666 Thawing人肺支氣管癌細胞系
MHCC 97細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LL2細胞、EL-4細胞、MDA-kb2細胞
Co-115細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RIN Cl-5F細胞、HCT-FET細胞、MDAMB415細胞
BC-009細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF-7細胞、L-540細胞、Pt-K1細胞
SW-756細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CD-18細胞、H250細胞、PTK2細胞
MA-782細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NKT細胞、AR41P細胞、UCLA SO M14細胞
CAL 33細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HO1-N1細胞、HOP 92細胞、KM932細胞
HARAB細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EA. hy 926細胞、Jurkat FHCRC細胞、FUOV1細胞
SUM52PE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AtT-20細胞、451Lu細胞、JM1細胞
KPL4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GT1-1細胞、WML2細胞、ABC1細胞
SKMEL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Walker256細胞、ST 486細胞、MC3T3-E1細胞
H-1954細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OV 1063細胞、ZR75_1細胞、C-Lu65細胞
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