"HCCLM3 cell line高轉(zhuǎn)移人肝癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
貼壁細胞傳代：去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基，T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次；棄PBS，再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細胞，顯微鏡下觀察，待細胞變圓，細胞間隙明顯，部分細胞剛開始脫離瓶壁，加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化，將細胞小心吹打下來，1000rpm/min室溫離心5min；棄上清，細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細胞密度而定1:2-1:3，1:3-1:6，1:6-1:8），每T25瓶補足培養(yǎng)基至5-6ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細胞傳代：一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中，稀釋細胞濃度即可，若培養(yǎng)液太多時，將細胞懸液移入離心管中，1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清，細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細胞密度而定1:4-1:8），每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細胞趨于成團生長，此時細胞生長狀態(tài)良好，當補液時，需避免反復(fù)吹打。
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
HCCLM3 cell line高轉(zhuǎn)移人肝癌細胞系
細胞傳代培養(yǎng)的胰酶消化法：傳代培養(yǎng)：是指細胞從一個培養(yǎng)瓶以１：２或１：２以上的比例轉(zhuǎn)移，接種到另一培養(yǎng)瓶的培養(yǎng)。傳代細胞，可根據(jù)不同細胞采取不同的方法進行細胞傳代。貼壁生長的細胞用消化法傳代，部分貼壁的細胞用直接吹打或用硅膠軟刮的刮除法傳代。懸浮細胞可采用加入等量新鮮培養(yǎng)基后直接吹打分散進行傳代，或用自然沉降法加入新培養(yǎng)基后再吹打分散進行傳代。實驗步驟：①入無菌室之前用肥皂洗手，再用７５% 的酒精擦拭消毒雙手；②倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài)，確定細胞是否傳代及細胞需要稀釋的倍數(shù)。將培養(yǎng)用液３７℃下預(yù)熱；③超凈臺臺面應(yīng)整潔，用７５%酒精棉球擦拭清潔；④打開超凈工作臺的紫外燈照射臺面２０min左右，關(guān)閉紫外燈，打開風機清潔空氣除去臭氧；⑤點燃酒精燈;取出無菌試管，巴士德吸管和刻度吸管;安上橡皮頭;過酒精燈火焰略燒后插在無菌試管內(nèi)；⑥將培養(yǎng)用液瓶口用７５%酒精消毒，過酒精燈火焰后斜置于酒精燈旁的架子上；⑦倒掉培養(yǎng)細胞的舊培養(yǎng)基。酌情可用２-３ml Hanks液洗去殘留的就培養(yǎng)基，或用少量胰酶涮洗一下；⑧每個大培養(yǎng)瓶加入１ml胰酶，小培養(yǎng)瓶用量酌減，蓋好瓶蓋后在倒置顯微鏡下觀察。當細胞收回突起變圓時立即翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶，使細胞脫離胰酶，然后將胰酶倒掉。注意勿使細胞提早脫落入消化液中；⑨加入少量的含血清的新鮮培養(yǎng)基，反復(fù)吹打消化好的細胞使其脫壁并分散，再根據(jù)分傳瓶數(shù)補加一定量的含血清的新鮮培養(yǎng)基(７-１０ml/大瓶;３-５ml/小瓶)制成細胞懸液，然后分裝到新培養(yǎng)瓶中。蓋好瓶蓋，適度擰緊后稍回轉(zhuǎn)，以利于CO２的進入，將培養(yǎng)瓶放回CO２培養(yǎng)箱；⑩對懸浮培養(yǎng)細胞，步驟７-９不做。直接將細胞懸液進行離心去除舊培養(yǎng)基上清，加入新鮮培養(yǎng)基，然后分裝到各瓶中。
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２傳代
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
細胞生長特性：貼壁生長
凍存和復(fù)蘇的原則：慢凍快融》當細胞冷到零度以下，可以產(chǎn)生以下變化：細胞器脫水，細胞中可溶性物質(zhì)濃度升高，并在細胞內(nèi)形成冰晶。如果緩慢冷凍，可使細胞逐步脫水，細胞內(nèi)不致產(chǎn)生大的冰晶；相反，結(jié)晶就大，大結(jié)晶會造成細胞膜、綱胞器的損傷和破裂。復(fù)蘇過程應(yīng)快融，目的是防止小冰晶形成大冰晶，即冰晶的重結(jié)晶。慢凍程序》1.標準程序：采用細胞凍存器》當溫度在-25℃以上時，1~2℃/min；當溫度達-25℃以下時，5~10℃/min；當溫度達-100℃時，可迅速放入液氮中。2.簡易程序：將冷凍管（管口要朝上）放入紗布袋內(nèi)，紗布袋系以線繩，通過線繩將紗布袋固定于液氮罐罐口，按每分鐘溫度下降1~2℃的速度，在40min內(nèi)降至液氮表面過夜，次晨投人液氮中。3.傳統(tǒng)程序：冷凍管置于4℃10分鐘→-20℃30分鐘→-80℃16~18小時（或隔夜）→液氮槽長期儲存。細胞凍存方法：1.預(yù)先配制凍存液》（1）8%DMSO+細胞生長液（92%血清）2.取對數(shù)生長期細胞，經(jīng)胰酶消化后，加入適量凍存液，用吸管吹打制成細胞懸液（1×10(6)~5×10(6)細胞/ml）。3.加入1ml細胞于凍存管中，密封后標記冷凍細胞名稱和冷凍日期。液氮長期保存。保存細胞的復(fù)蘇方法：1.快速解凍》凍存細胞從液氮中取出后，立即放入37℃水浴中，輕輕搖動冷凍管，使其在1分鐘內(nèi)全部融化（不要超過3分鐘）。2.解凍后的細胞可直接接種到含完全生長培養(yǎng)液的細胞培養(yǎng)瓶中直接進行培養(yǎng)，24小時后再用新鮮完全培養(yǎng)液替換舊培養(yǎng)液，以去除DMSO。3.如果細胞對冷凍保護劑特別敏感解凍后的細胞應(yīng)先通過離心去除冷凍保護劑，然后再接種到含完全生長培養(yǎng)液的培養(yǎng)瓶中。
HCCLM3 cell line高轉(zhuǎn)移人肝癌細胞系
細胞形態(tài)特性：上皮樣
GM03573A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc 5.04細胞、NOMO1細胞、LLC-PK1細胞
VM Cub 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：INS1E細胞、HLEpiC細胞、22Rv1細胞
Walker-256細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AR4-IP細胞、HCC0366細胞、HEL-92_1_7細胞
SDBMSC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：hSCC-25細胞、HSAS4細胞、VMM39細胞
PCI-4M細胞系相關(guān)產(chǎn)品：hTERT RPE1細胞、52PE細胞、WM451Lu細胞
Mv1.Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-361細胞、H1975細胞、P3X63細胞
DH 82細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A549/DDP細胞、MEG01細胞、IMR 32細胞
MEG01細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR4細胞、Hs706T細胞、Murine Long bone Osteocyte-Y4細胞
Tu 177細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KP-4細胞、NCI-SNU-1細胞、H-82細胞
253JB-V細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OV2008細胞、HSC-6細胞、NCI-HUT-520細胞
GBCSD細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vx2細胞、IGROV細胞、Hs 274.T細胞
NCI-H64細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HepaRG細胞、D-324 Med細胞、McA-RH7777細胞
AAV293細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COS1細胞、MLE12細胞、NCIH2171細胞
HCCLM3 cell line高轉(zhuǎn)移人肝癌細胞系
NHRF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：D-341 Med細胞、MB 157細胞、IOSE 29細胞
MCA205細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JB-6細胞、COLO 320DM細胞、293c18細胞
Hs870T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JG細胞、NCI-H748細胞、SK-MEL-1細胞
Hs870T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JG細胞、NCI-H748細胞、SK-MEL-1細胞
PANC1005細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2198細胞、N-87細胞、MOLM-16細胞
TE5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MN-9D細胞、NCI-H2066細胞、TE-5細胞
Sp2/O細胞系相關(guān)產(chǎn)品：X63-AG 8.653細胞、OUMS-23細胞、SCC4細胞
NL20細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RIN m5F細胞、MLFC細胞、LTEP-sm 1細胞
MNNG/HOS Clone F-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SJSA1細胞、DHL-16細胞、GM02131A細胞
ARO細胞系相關(guān)產(chǎn)品：2PK3細胞、MOLM-14細胞、A375.S2細胞
NOR-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ROS-17/2.8細胞、H146細胞、SKNFI細胞
He-La細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1703細胞、J 82細胞、THP1細胞
BTI-Tn-5B1-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RMC細胞、H1581細胞、OKT 3細胞
Fetal Human Lens-124細胞系相關(guān)產(chǎn)品：bEnd.3[BEND3]細胞、A375-S2細胞、A-431細胞
LM-TK-細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPTC細胞、ID8細胞、GC-2spd(ts)細胞
SW 1573細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sp 2817細胞、CBRH7919細胞、MDA231細胞
WB-F344細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H211細胞、Kit225/K6細胞、WM239A細胞
UMR-106細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NK 10a細胞、T8細胞、HOS-TE85細胞
MGH-UI細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ASH3細胞、Bovine Turbinate細胞、SK-MEL3細胞
CAKI1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Anip 973細胞、159 PT細胞、HTR8svn細胞
Hs 840.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUIT-2細胞、HCC-2279細胞、Human Liver-7702細胞
NCIH244細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LIPF155C細胞、MF2059細胞、EJ細胞
Hela-mock細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS-123細胞、HCV 29細胞、Hs 578.Bst細胞
MFE 296細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK UT 1細胞、RPMI-7666細胞、NCI-SNU-1040細胞
HEK/EBNA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：K 562細胞、HT3細胞、NCI-H1693細胞
Adeno-293細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VMRC-LCD細胞、TSCC1細胞、8402細胞
YT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LLC細胞、HCEpiC細胞、SKNMC細胞
1E8-H細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI 7666細胞、RBSMC細胞、LNCaP細胞
BHK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TEC細胞、I90細胞、H2085細胞
H-2227細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT1197細胞、HUT 125細胞、J.E6-1細胞
H-650細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LCLC103H細胞、ARO 81-1細胞、AtT 20細胞
Vero E6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HL-60細胞、OCIAML3細胞、HOS TE 85細胞
RAOEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KNS62細胞、WSU-HN13細胞、H-1355細胞
JeKo-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UM2細胞、BCP-1細胞、H1734細胞
Psi-2 DAP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFT 8810細胞、SJRH 30細胞、HCC1954 BL細胞
CNLMG-B5537SKIN細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UPCI:SCC90細胞、L 540細胞、SK-N-BE2細胞
NCI-HUT-125細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ramos.2G6.4C10細胞、Jurkat E6細胞、C33細胞
H-1581細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H841細胞、HLE細胞、YH細胞
TPC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-4細胞、Mono Mac 1細胞、U-373MG細胞
ONS76細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TCam 2細胞、He-La細胞、MG63細胞
He La細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C81-61細胞、EST50細胞、M210B4細胞
WM239細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03320D細胞、SNU-423細胞、TU 686細胞
Rat 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HMrSV5細胞、NCI-H1792細胞、ACT-1細胞
HCCLM3 cell line高轉(zhuǎn)移人肝癌細胞系
Hs606T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FL-83B細胞、H322細胞、HCC2935細胞
HT144mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB435細胞、HPAF細胞、CHL1細胞
LIM 1215細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-87細胞、DF1細胞、H1573細胞
Line 522細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H4IIEC3細胞、F442-A細胞、hMSC-BM細胞
HTR8/SVneo細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COS7細胞、PANC0327細胞、OVCAR-5細胞
Granta519細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE15細胞、Hs870T細胞、NCIH211細胞
Walker-256細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AR4-IP細胞、GC1-SPG細胞、Y-79細胞
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