"NCI-H441 cell line人肺腺癌細胞系
細胞背景資料：NCI-H４４１建系于１９８２年（A.F.Gazdar，etal.)。該細胞分離自一名肺腺癌患者的心包液。該細胞能在半固體瓊脂糖中形成克隆，并能表達肺泡表面活性蛋白A。該細胞在有血清培養(yǎng)基中倍增時間為５８小時，在無血清培養(yǎng)基中倍增時間為９９-１３８小時。
貼壁細胞傳代：去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基，T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次；棄PBS，再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細胞，顯微鏡下觀察，待細胞變圓，細胞間隙明顯，部分細胞剛開始脫離瓶壁，加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化，將細胞小心吹打下來，1000rpm/min室溫離心5min；棄上清，細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細胞密度而定1:2-1:3，1:3-1:6，1:6-1:8），每T25瓶補足培養(yǎng)基至5-6ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細胞傳代：一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中，稀釋細胞濃度即可，若培養(yǎng)液太多時，將細胞懸液移入離心管中，1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清，細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細胞密度而定1:4-1:8），每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細胞趨于成團生長，此時細胞生長狀態(tài)良好，當補液時，需避免反復吹打。
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
NCI-H441 cell line人肺腺癌細胞系
細胞培養(yǎng)方面注意的幾點：無菌意識要強：實驗進行前，超凈臺以紫外燈照射３０分鐘滅菌，以７０%ethanol擦拭無菌操作抬面，并開啟超凈工作臺風扇運轉(zhuǎn)數(shù)分鐘后，才開始實驗操作。每次操作只處理一株細胞株，以避免失誤混淆或細胞間污染。實驗完畢后，將實驗物品帶出工作臺，以７０%ethanol擦拭無菌操作抬面。無菌操作工作區(qū)域應保持清潔及寬敞，必要物品，例如支架、吸管等公用物品可以暫時放置，其它個人實驗用品用完應立即拿出。實驗用品以７０%乙醇擦拭后才帶入無菌操作臺內(nèi)。實驗操作應在中央無菌區(qū)域，一般勿在邊緣區(qū)域操作。小心取用無菌之實驗物品，避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或是容器瓶口，亦不要在打開之容器正上方操作實驗。容器打開后，以手夾住瓶蓋并握住瓶身，傾斜約４５°角取用，盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。選擇正確的培養(yǎng)基：不同的細胞可能培養(yǎng)基不同，甚至不同的文獻可能對相同的細胞培養(yǎng)基成分也是可能不同的。如我當時培養(yǎng)神經(jīng)干細胞，有文獻就選用neurobase培養(yǎng)基，而我的實驗目的主要是做抗氧化和氧化方面的，而這種培養(yǎng)基中含有抗氧化劑成分，此時，我就不得不選擇另外一種不含抗氧化劑的培養(yǎng)基。瓶裝血清一定要逐步解凍:４℃冰箱全溶后再分裝，在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沉淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀。熱滅活是指５６℃，３０分鐘加熱已完全解凍之血清。水浴鍋升到５６℃后，將血清放入，待溫度升高到５６℃后計時，一般５分鐘左右規(guī)則搖晃均勻一次。此熱處理之目的是使血清中之補體成份去活化。除非必須，一般不要作此熱處理，因為會造成沉淀物之顯著增多，且會影響血清之品質(zhì)。注意更換新血清(包括不同批次)對細胞的影響。
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：３傳代,２-３天傳一代
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
細胞生長特性：貼壁生長
凍存和復蘇的原則：慢凍快融》當細胞冷到零度以下，可以產(chǎn)生以下變化：細胞器脫水，細胞中可溶性物質(zhì)濃度升高，并在細胞內(nèi)形成冰晶。如果緩慢冷凍，可使細胞逐步脫水，細胞內(nèi)不致產(chǎn)生大的冰晶；相反，結(jié)晶就大，大結(jié)晶會造成細胞膜、綱胞器的損傷和破裂。復蘇過程應快融，目的是防止小冰晶形成大冰晶，即冰晶的重結(jié)晶。慢凍程序》1.標準程序：采用細胞凍存器》當溫度在-25℃以上時，1~2℃/min；當溫度達-25℃以下時，5~10℃/min；當溫度達-100℃時，可迅速放入液氮中。2.簡易程序：將冷凍管（管口要朝上）放入紗布袋內(nèi)，紗布袋系以線繩，通過線繩將紗布袋固定于液氮罐罐口，按每分鐘溫度下降1~2℃的速度，在40min內(nèi)降至液氮表面過夜，次晨投人液氮中。3.傳統(tǒng)程序：冷凍管置于4℃10分鐘→-20℃30分鐘→-80℃16~18小時（或隔夜）→液氮槽長期儲存。細胞凍存方法：1.預先配制凍存液》（1）8%DMSO+細胞生長液（92%血清）2.取對數(shù)生長期細胞，經(jīng)胰酶消化后，加入適量凍存液，用吸管吹打制成細胞懸液（1×10(6)~5×10(6)細胞/ml）。3.加入1ml細胞于凍存管中，密封后標記冷凍細胞名稱和冷凍日期。液氮長期保存。保存細胞的復蘇方法：1.快速解凍》凍存細胞從液氮中取出后，立即放入37℃水浴中，輕輕搖動冷凍管，使其在1分鐘內(nèi)全部融化（不要超過3分鐘）。2.解凍后的細胞可直接接種到含完全生長培養(yǎng)液的細胞培養(yǎng)瓶中直接進行培養(yǎng)，24小時后再用新鮮完全培養(yǎng)液替換舊培養(yǎng)液，以去除DMSO。3.如果細胞對冷凍保護劑特別敏感解凍后的細胞應先通過離心去除冷凍保護劑，然后再接種到含完全生長培養(yǎng)液的培養(yǎng)瓶中。
NCI-H441 cell line人肺腺癌細胞系
細胞形態(tài)特性：上皮細胞樣
PC-3M 2B4細胞系相關產(chǎn)品：KYSE510細胞、Reuber-H-35 hepatoma細胞、Transformed Human Liver Epithelial-2細胞
CMT-93細胞系相關產(chǎn)品：Bac1 2F5細胞、D341MD細胞、H1105細胞
RMa-bm細胞系相關產(chǎn)品：CT26WT細胞、HEL-92.1.7細胞、HCC2218細胞
KRC Y細胞系相關產(chǎn)品：L540細胞、B-95-8細胞、McG-1細胞
TOV-112D細胞系相關產(chǎn)品：ECGI10細胞、HEK293-H細胞、Hs68細胞
KPL-4細胞系相關產(chǎn)品：NCIH1417細胞、SW626細胞、BMDC細胞
NCIH1770細胞系相關產(chǎn)品：J45.01細胞、293 F細胞、Kasumi 1細胞
Michigan Cancer Foundation-12F細胞系相關產(chǎn)品：HBL 100細胞、HRCEC細胞、WM-2664細胞
Huh-7細胞系相關產(chǎn)品：MCM細胞、EAhy926細胞、MDAMB435S細胞
HEP3B2細胞系相關產(chǎn)品：Hos TE-85細胞、H647細胞、HMSC細胞
Microbiological Associates-104細胞系相關產(chǎn)品：HR1K細胞、KG-1a細胞、LN 382細胞
4T1細胞系相關產(chǎn)品：BSC40細胞、T173細胞、SK_HEP1細胞
HIC細胞系相關產(chǎn)品：hA549細胞、GP2d細胞、SF 763細胞
NCI-H441 cell line人肺腺癌細胞系
NCI-H1672細胞系相關產(chǎn)品：BL2141細胞、Turbot Embryonic Cell line細胞、OVCA432_Bast細胞
H2009細胞系相關產(chǎn)品：MCF7細胞、OC-316細胞、HEK293-H細胞
GEO細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H1373細胞、BSC-40細胞、OCI-LY-7細胞
GEO細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H1373細胞、BSC-40細胞、OCI-LY-7細胞
D283 Med細胞系相關產(chǎn)品：253JB-V細胞、L 428細胞、BC3H1細胞
NCI-H2170細胞系相關產(chǎn)品：Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2細胞、BHT101細胞、COLO-824細胞
LC-2-Ad細胞系相關產(chǎn)品：SKRC 39細胞、HLFa細胞、WB-F344細胞
Sp 2817細胞系相關產(chǎn)品：RPMI1846細胞、OUMS27細胞、NCI-BL6細胞
RCSMC細胞系相關產(chǎn)品：OVCAR.8細胞、H-2073細胞、LAN-5細胞
H-865細胞系相關產(chǎn)品：Huh-7.5細胞、A20細胞、SKES-1細胞
ATN1細胞系相關產(chǎn)品：NOR 10細胞、GM-215細胞、H-727細胞
MKN 7細胞系相關產(chǎn)品：MCAEC細胞、COR-L279細胞、JEG-3細胞
BIC細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H1563細胞、Adeno 293細胞、Panc-3_27細胞
Renal Proximal Tubule Epithelial Cells/TERT-immortalized 1細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H-69細胞、WI38細胞、H-292細胞
NUGC3細胞系相關產(chǎn)品：VMRC-RCZ細胞、SU-DHL6細胞、16-HBEo細胞
Anip973細胞系相關產(chǎn)品：WI-38細胞、COLO-320-DM細胞、MDCKII細胞
SKNBE2C細胞系相關產(chǎn)品：C17細胞、ECV細胞、JiyoyeP-2003細胞
KYSE 30細胞系相關產(chǎn)品：P3HR1細胞、EA.Hy926細胞、PCI-04B細胞
CAMA-1細胞系相關產(chǎn)品：Human Microglia Clone 3細胞、PC3M-IE8細胞、WERI細胞
HL-7702細胞系相關產(chǎn)品：Ly3細胞、H508細胞、BPH1細胞
CoCL2細胞系相關產(chǎn)品：HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]細胞、143BTK-細胞、J774A.1細胞
SUM149細胞系相關產(chǎn)品：KBM7細胞、PA317細胞、SP-2/0-AG14細胞
Hs888 Lu細胞系相關產(chǎn)品：NE-4C細胞、NTERA-2 cl.D1細胞、Ca9-22細胞
SK ES 01細胞系相關產(chǎn)品：MKN45細胞、PSN-1細胞、NCI-H1385細胞
Hs 839.T細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H661細胞、HEK 293細胞、HEK293-A細胞
CAL-62細胞系相關產(chǎn)品：mRMEC細胞、KYSE180細胞、HS766T細胞
NB9細胞系相關產(chǎn)品：WM451細胞、A-9細胞、MPC11細胞
HSC-2細胞系相關產(chǎn)品：Hs-578-T細胞、EPC細胞、MPC-11細胞
Madin Darby Canine Kidney細胞系相關產(chǎn)品：M20 [Human melanoma]細胞、SK-MEL5細胞、TM-4細胞
RTE細胞系相關產(chǎn)品：ECC-1細胞、UACC 893細胞、H-250細胞
H2591細胞系相關產(chǎn)品：Hep G2-Luc細胞、SKOV-3細胞、CEMC7細胞
231-luc細胞系相關產(chǎn)品：BTT739細胞、HCC-2185細胞、RPE1-hTERT細胞
NBL-S細胞系相關產(chǎn)品：CZ-1細胞、H-1395細胞、U-373MG ATCC細胞
U14細胞系相關產(chǎn)品：IFRS1細胞、DR2R 1610細胞、H-1838細胞
KASUMI1細胞系相關產(chǎn)品：9L細胞、Tca-8113細胞、NCI-H295R細胞
HC11細胞系相關產(chǎn)品：MM6細胞、HEC-251細胞、NUGC4細胞
HCC1569細胞系相關產(chǎn)品：MC57細胞、UPCI-SCC-154細胞、SU86-86細胞
MDAMB175細胞系相關產(chǎn)品：FCCH1018細胞、Reuber H-35細胞、H292細胞
JiyoyeP-2003細胞系相關產(chǎn)品：UCLA SO M14細胞、B5537SKIN細胞、Panc813細胞
HOP62細胞系相關產(chǎn)品：UM-RC-2細胞、SK-OV-3細胞、Ku812F細胞
BNL CL2細胞系相關產(chǎn)品：BT 20細胞、MDA2B細胞、Hs-600-T細胞
H-2122細胞系相關產(chǎn)品：SF126細胞、MDA231-LM2-4175細胞、TF1細胞
H4-IIE-C3細胞系相關產(chǎn)品：CAL 27細胞、Human Embryonic Kidney 293細胞、Walker-Ca.256細胞
NCI-H441 cell line人肺腺癌細胞系
CEMx721.174.T2細胞系相關產(chǎn)品：Tn5B1-4細胞、TE-13細胞、2BS細胞
32D.3細胞系相關產(chǎn)品：TKB-1細胞、Hs 636.T細胞、Capan1細胞
C4-2B細胞系相關產(chǎn)品：H-II-E-C3細胞、FRO81-2細胞、LCD細胞
MS-751細胞系相關產(chǎn)品：H-1184細胞、COLO.205細胞、H847細胞
C33細胞系相關產(chǎn)品：2B4細胞、BCaP 37細胞、OVCAR-10細胞
JTC-28細胞系相關產(chǎn)品：G 292 Clone A 141B1細胞、Human Embryonic Skin細胞、NB9細胞
RMa-bm細胞系相關產(chǎn)品：CT26WT細胞、Rin-M-5F細胞、FO [Mouse myeloma]細胞
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