"SMMC-7721 cell line人肝癌細胞系
細胞背景資料:用Northernblot方法,未能檢測到細胞中1.3kbLFIRE-1/HFREP-1mRNA的表達。
一般使用trypsin-EDTA 濃度為0.25%trypsin-0.53mM EDTA.2Na或0.05%trypsin-0.02mM EDTA.2Na。消化液濃度過高時,易造成培養(yǎng)基中細胞碎片增多,黑渣子增多,常規(guī)細胞傳代時建議用0.05%的胰酶進行消化,對于難消化的細胞可采用0.25%胰酶進行消化,細胞密度過高超過80%時,采用分步消化法。胰酶儲存在-20°C,解凍在4°C進行,次開瓶后應立即少量分裝于無菌試管中,保存于-20°C,避免反復冷凍解凍造成trypsin之活性降低,并可減少污染之機會。胰酶消化的程度是細胞培養(yǎng)中的一個關鍵步驟:消化過度細胞碎片增多,黑渣子增多,細胞會成片脫落,嚴重影響細胞活性,并有部分細胞漂浮,隨棄去的胰酶流失;消化不足則細胞難于從瓶壁上吹下,反復吹打同樣也會損傷細胞活性。不同細胞對消化液的敏感性不同,胰酶消化的時間也會有差異。胰酶消化時間與胰酶的濃度,是否含EDTA,胰酶的儲存時間,胰酶的儲存溫度,是否反復凍融,消化加入的胰酶體積,消化溫度及細胞的密度有關。對于新購買的細胞,建議客戶先用低濃度的胰酶仔細去摸索一下消化時間,可每隔1分鐘鏡下觀察細胞是否變圓,記錄消化時間,下一次操作參考之前的記錄來控制時間即可。
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
SMMC-7721 cell line人肝癌細胞系
細胞傳代培養(yǎng)的胰酶消化法:傳代培養(yǎng):是指細胞從一個培養(yǎng)瓶以1:2或1:2以上的比例轉移,接種到另一培養(yǎng)瓶的培養(yǎng)。傳代細胞,可根據(jù)不同細胞采取不同的方法進行細胞傳代。貼壁生長的細胞用消化法傳代,部分貼壁的細胞用直接吹打或用硅膠軟刮的刮除法傳代。懸浮細胞可采用加入等量新鮮培養(yǎng)基后直接吹打分散進行傳代,或用自然沉降法加入新培養(yǎng)基后再吹打分散進行傳代。實驗步驟:①入無菌室之前用肥皂洗手,再用75% 的酒精擦拭消毒雙手;②倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài),確定細胞是否傳代及細胞需要稀釋的倍數(shù)。將培養(yǎng)用液37℃下預熱;③超凈臺臺面應整潔,用75%酒精棉球擦拭清潔;④打開超凈工作臺的紫外燈照射臺面20min左右,關閉紫外燈,打開風機清潔空氣除去臭氧;⑤點燃酒精燈;取出無菌試管,巴士德吸管和刻度吸管;安上橡皮頭;過酒精燈火焰略燒后插在無菌試管內(nèi);⑥將培養(yǎng)用液瓶口用75%酒精消毒,過酒精燈火焰后斜置于酒精燈旁的架子上;⑦倒掉培養(yǎng)細胞的舊培養(yǎng)基。酌情可用2-3ml Hanks液洗去殘留的就培養(yǎng)基,或用少量胰酶涮洗一下;⑧每個大培養(yǎng)瓶加入1ml胰酶,小培養(yǎng)瓶用量酌減,蓋好瓶蓋后在倒置顯微鏡下觀察。當細胞收回突起變圓時立即翻轉培養(yǎng)瓶,使細胞脫離胰酶,然后將胰酶倒掉。注意勿使細胞提早脫落入消化液中;⑨加入少量的含血清的新鮮培養(yǎng)基,反復吹打消化好的細胞使其脫壁并分散,再根據(jù)分傳瓶數(shù)補加一定量的含血清的新鮮培養(yǎng)基(7-10ml/大瓶;3-5ml/小瓶)制成細胞懸液,然后分裝到新培養(yǎng)瓶中。蓋好瓶蓋,適度擰緊后稍回轉,以利于CO2的進入,將培養(yǎng)瓶放回CO2培養(yǎng)箱;⑩對懸浮培養(yǎng)細胞,步驟7-9不做。直接將細胞懸液進行離心去除舊培養(yǎng)基上清,加入新鮮培養(yǎng)基,然后分裝到各瓶中。
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:3傳代,2-3天換液一次
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
細胞生長特性:貼壁生長
可以這樣說,對于需要消化傳代的細胞,每一次的消化都是對這個細胞存活與否,狀態(tài)好與不好至關重要的考驗。很多同學都遇到過這個問題,自己養(yǎng)的細胞開始的幾代長的還挺好的,可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細胞不行了,狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題,可以非??隙ǖ卣f,你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細胞受到較大損傷了。所以,越長越差。在消化的過程中,你加入胰酶后,所有細胞都在被胰酶消化著,但是我們忽視了一個問題就是,細胞的生長狀態(tài)是不一樣的,每一個細胞的貼壁情況也是不一樣的,有的貼壁牢固,有的貼壁沒有那么牢固的,所以,讓所有的細胞消化同樣的時間對細胞是不公平的,他們受到了差別待遇當然會有脾氣的,大家爭取做到因材施教,比如試試下面的“四步消化法”。(以難消化細胞為例),具體操作:1)首先不加胰酶,倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗1-2遍(目的是將漂浮著的死細胞之類盡量洗掉)。2)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍,這一遍是把貼壁不牢固的細胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍,兩次所得懸液混合傳入新瓶。(你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng),以與后面胰酶消化過的細胞對比觀察看誰長的更好一點就知道該細胞對胰酶的敏感度了)3)吸干凈瓶內(nèi)剩余液體,加入0.3ml左右的胰酶潤洗一遍,吸掉棄之,再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察,待細胞與細胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶,加入新培養(yǎng)基開始吹打,吹打2-3遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用2ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。(也可以傳入新瓶培養(yǎng),以與后面及前面的做對比)4)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細胞。當然你也可以用新的胰酶,如果你們那比較富裕的話,繼續(xù)鏡下觀察,待剩余細胞間隙明顯,細胞獨立開來的時候,吸掉胰酶,加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)(根據(jù)實際情況把握)。
SMMC-7721 cell line人肝癌細胞系
細胞形態(tài)特性:上皮樣
MADISON LUNG TA-109細胞系相關產(chǎn)品:PK136細胞、MIA PaCa-2細胞、C666-1細胞
B16-F1細胞系相關產(chǎn)品:Huh7.5.1細胞、PAN 02細胞、143B TK-細胞
Tn5B1-4細胞系相關產(chǎn)品:PC-2 [Human pancreatic carcinoma]細胞、B16/F10細胞、RCC10RGB細胞
HCC-78細胞系相關產(chǎn)品:H358細胞、RPMC細胞、L-Wnt-3A細胞
Clone 166細胞系相關產(chǎn)品:CCD-33Co細胞、COLO 320F細胞、SV40 MES 13細胞
Hela-mock細胞系相關產(chǎn)品:LS-123細胞、HCV 29細胞、Hs 578.Bst細胞
GC1-SPG細胞系相關產(chǎn)品:SaOS-2細胞、SUM149-PT細胞、H-1048細胞
F9細胞系相關產(chǎn)品:Roswell Park Memorial Institute 8402細胞、NCI-H2052細胞、A-1847細胞
SCL-2細胞系相關產(chǎn)品:BNCL-2細胞、LNCaP subline C4-2細胞、PIG3細胞
MC57細胞系相關產(chǎn)品:NB19-RIKEN細胞、Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1細胞、NPA細胞
TE4細胞系相關產(chǎn)品:RKO_AS45細胞、SNB-19細胞、BrCL18細胞
HepG2細胞系相關產(chǎn)品:Centre Antoine Lacassagne-148細胞、Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5細胞、JKT1細胞
NCI H548細胞系相關產(chǎn)品:HCC 38細胞、MDAMB175VII細胞、AQ-Mel細胞
SMMC-7721 cell line人肝癌細胞系
MT-4細胞系相關產(chǎn)品:HPAC細胞、PANC0813細胞、BBE細胞
Intestinal Epithelioid Cell line No. 18細胞系相關產(chǎn)品:Hx-147細胞、H510A細胞、NIH:OVCAR3細胞
RMa-bm細胞系相關產(chǎn)品:CT26WT細胞、HEL-92.1.7細胞、HCC2218細胞
RMa-bm細胞系相關產(chǎn)品:CT26WT細胞、HEL-92.1.7細胞、HCC2218細胞
WEHI-3細胞系相關產(chǎn)品:BERH-2細胞、PC-12細胞、SKGT4細胞
H-1755細胞系相關產(chǎn)品:NCIH2342細胞、COLO-680N細胞、OCI-AML-3細胞
Renal Carcinoma細胞系相關產(chǎn)品:LNCaP subline C4-2細胞、H9c2細胞、Hs 888.T細胞
C3H/10T1/2 clone 8細胞系相關產(chǎn)品:TE 32細胞、PIG1細胞、RPMI-8402細胞
NIH:OVCAR-8細胞系相關產(chǎn)品:X63-Ag8.653細胞、QBI-HEK 293A細胞、IEC-6細胞
PC-3M-1E8細胞系相關產(chǎn)品:OVCAR-4細胞、ARH 77細胞、QBI-293A細胞
HRA19細胞系相關產(chǎn)品:UMNSAH-DF1細胞、SW-1463細胞、IGROV1細胞
AR41P細胞系相關產(chǎn)品:SW527細胞、P3/X63/Ag8.653細胞、EC-GI-10細胞
CAL-78細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H1435細胞、COLO 680N細胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5細胞
EnCa1細胞系相關產(chǎn)品:K7M2-WT細胞、CHL-11細胞、NCI-H2023細胞
BT.549細胞系相關產(chǎn)品:H1755細胞、KU19-19細胞、DV90細胞
H-1755細胞系相關產(chǎn)品:NCIH2342細胞、COLO-680N細胞、OCI-AML-3細胞
SK Mel 24細胞系相關產(chǎn)品:Earle's L cells細胞、SNK-6細胞、Mono Mac 6細胞
BTI-Tn-5B1-4細胞系相關產(chǎn)品:RMC細胞、H1581細胞、OKT 3細胞
CHL1細胞系相關產(chǎn)品:MBMEC細胞、NCI-H220細胞、MDA157細胞
BE2M17細胞系相關產(chǎn)品:LLC-PK-1細胞、KU 19-19細胞、Ketr-3細胞
HBZY 1細胞系相關產(chǎn)品:HOS-MNNG細胞、HEK-293F細胞、REC1細胞
H1238細胞系相關產(chǎn)品:Dysplastic Oral Keratinocyte細胞、PC-3M-IE8細胞、A549-Taxol細胞
NFS 60細胞系相關產(chǎn)品:CHO細胞、NCI-SNU-761細胞、Malme3M細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-231細胞系相關產(chǎn)品:95D細胞、Hs 940.T細胞、UACC812細胞
NCI-H1404細胞系相關產(chǎn)品:THP-1細胞、159PT細胞、XWLC-05細胞
Panc02-H0細胞系相關產(chǎn)品:PANC-08-13細胞、Y-1細胞、VA-ES-BJ細胞
NCIH1975細胞系相關產(chǎn)品:SW 480細胞、Tb 1 Lu細胞、ME-1 [Human leukemia]細胞
MGH-UI細胞系相關產(chǎn)品:ASH3細胞、Bovine Turbinate細胞、SK-MEL3細胞
Clone 166細胞系相關產(chǎn)品:CCD-33Co細胞、COLO 320F細胞、SV40 MES 13細胞
NCI-H446細胞系相關產(chǎn)品:WM 451-Lu細胞、TALL1細胞、H-226細胞
RMC細胞系相關產(chǎn)品:NBL-2細胞、NCI-H1355細胞、Hs343T細胞
UWB1289細胞系相關產(chǎn)品:A 2780 CP細胞、Panc_05_04細胞、NCIH2081細胞
HCC-1428細胞系相關產(chǎn)品:BNL-CL.2細胞、HFL1細胞、130-T細胞
H-69細胞系相關產(chǎn)品:VK2 (E6/E7)細胞、E304細胞、NCI-H1048細胞
CEM C7細胞系相關產(chǎn)品:NPC-TW 039細胞、A2008細胞、BeWo細胞
C2BBe 1細胞系相關產(chǎn)品:KYSE-510細胞、Hepa-RG細胞、130T細胞
RPMI 8402細胞系相關產(chǎn)品:Hs-611-T細胞、AML-2細胞、HT-1197細胞
PC-9/GR細胞系相關產(chǎn)品:PC 61-5-3細胞、NCI-H2172細胞、MDA MB 134VI細胞
OCI-LY-7細胞系相關產(chǎn)品:HEC-251細胞、SK-ES-1細胞、Hamster Islet Transformed-Tioguanine resistant clone 15細胞
Centre Antoine Lacassagne-33細胞系相關產(chǎn)品:Det. 562細胞、MV522細胞、MAC1細胞
CEM clone 7細胞系相關產(chǎn)品:NKM-1細胞、BTI-TN5B1-4細胞、SW-620細胞
NCTC 3960細胞系相關產(chǎn)品:MD Anderson-Metastatic Breast-157細胞、HOS/MNNG細胞、JAR細胞
U373細胞系相關產(chǎn)品:ASPC1細胞、BIC1細胞、Y-79細胞
SMMC-7721 cell line人肝癌細胞系
SKMEL5細胞系相關產(chǎn)品:C57 Mouse Tumor 93細胞、PC-3M-1E8細胞、293-EBNA1細胞
P3/NS1/1-Ag4.1細胞系相關產(chǎn)品:H2444細胞、IR 983F細胞、LC1細胞
P3/NS1/1-Ag4.1細胞系相關產(chǎn)品:H2444細胞、IR 983F細胞、LC1細胞
NIH:OVCAR-8細胞系相關產(chǎn)品:X63-Ag8.653細胞、QBI-HEK 293A細胞、IEC-6細胞
BV2細胞系相關產(chǎn)品:KYSE 520細胞、HIT clone T15細胞、QGY7701細胞
BpRcl細胞系相關產(chǎn)品:HTR-8/SV neo細胞、MOLT 16細胞、Glioma 261細胞
Tn5B1-4細胞系相關產(chǎn)品:PC-2 [Human pancreatic carcinoma]細胞、HCC-1359細胞、Swiss 3T6細胞
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