"NCI-H1755 cell line人肺癌細胞系
細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹
貼壁細胞傳代:去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基,T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次;棄PBS,再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細胞,顯微鏡下觀察,待細胞變圓,細胞間隙明顯,部分細胞剛開始脫離瓶壁,加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化,將細胞小心吹打下來,1000rpm/min室溫離心5min;棄上清,細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸,按要求分瓶(視細胞密度而定1:2-1:3,1:3-1:6,1:6-1:8),每T25瓶補足培養(yǎng)基至5-6ml,37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細胞傳代:一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中,稀釋細胞濃度即可,若培養(yǎng)液太多時,將細胞懸液移入離心管中,1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清,細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸,按要求分瓶(視細胞密度而定1:4-1:8),每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml,37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細胞趨于成團生長,此時細胞生長狀態(tài)良好,當補液時,需避免反復(fù)吹打。
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
NCI-H1755 cell line人肺癌細胞系
細胞傳代培養(yǎng)的胰酶消化法:傳代培養(yǎng):是指細胞從一個培養(yǎng)瓶以1:2或1:2以上的比例轉(zhuǎn)移,接種到另一培養(yǎng)瓶的培養(yǎng)。傳代細胞,可根據(jù)不同細胞采取不同的方法進行細胞傳代。貼壁生長的細胞用消化法傳代,部分貼壁的細胞用直接吹打或用硅膠軟刮的刮除法傳代。懸浮細胞可采用加入等量新鮮培養(yǎng)基后直接吹打分散進行傳代,或用自然沉降法加入新培養(yǎng)基后再吹打分散進行傳代。實驗步驟:①入無菌室之前用肥皂洗手,再用75% 的酒精擦拭消毒雙手;②倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài),確定細胞是否傳代及細胞需要稀釋的倍數(shù)。將培養(yǎng)用液37℃下預(yù)熱;③超凈臺臺面應(yīng)整潔,用75%酒精棉球擦拭清潔;④打開超凈工作臺的紫外燈照射臺面20min左右,關(guān)閉紫外燈,打開風(fēng)機清潔空氣除去臭氧;⑤點燃酒精燈;取出無菌試管,巴士德吸管和刻度吸管;安上橡皮頭;過酒精燈火焰略燒后插在無菌試管內(nèi);⑥將培養(yǎng)用液瓶口用75%酒精消毒,過酒精燈火焰后斜置于酒精燈旁的架子上;⑦倒掉培養(yǎng)細胞的舊培養(yǎng)基。酌情可用2-3ml Hanks液洗去殘留的就培養(yǎng)基,或用少量胰酶涮洗一下;⑧每個大培養(yǎng)瓶加入1ml胰酶,小培養(yǎng)瓶用量酌減,蓋好瓶蓋后在倒置顯微鏡下觀察。當細胞收回突起變圓時立即翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶,使細胞脫離胰酶,然后將胰酶倒掉。注意勿使細胞提早脫落入消化液中;⑨加入少量的含血清的新鮮培養(yǎng)基,反復(fù)吹打消化好的細胞使其脫壁并分散,再根據(jù)分傳瓶數(shù)補加一定量的含血清的新鮮培養(yǎng)基(7-10ml/大瓶;3-5ml/小瓶)制成細胞懸液,然后分裝到新培養(yǎng)瓶中。蓋好瓶蓋,適度擰緊后稍回轉(zhuǎn),以利于CO2的進入,將培養(yǎng)瓶放回CO2培養(yǎng)箱;⑩對懸浮培養(yǎng)細胞,步驟7-9不做。直接將細胞懸液進行離心去除舊培養(yǎng)基上清,加入新鮮培養(yǎng)基,然后分裝到各瓶中。
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2傳代
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
細胞生長特性:貼壁生長
有一些細胞是數(shù)量多一點比較好生長,生長狀態(tài)也比較好。這種一般是屬于生長速度慢的細胞。譬如內(nèi)皮細胞。而有一些是細胞是數(shù)量少一點細胞狀態(tài)會生長的比較好,譬如巨噬細胞和某些腫瘤細胞。尤其是巨噬細胞,生長速度非常得快,貼壁速度很快,所以傳代時就應(yīng)該留很少量的細胞,這樣細胞狀態(tài)會比較好。并且巨噬細胞比較喜歡扎堆生長,而堆與堆之間是有空間的。如果長成相連在一起的一滿片的時候,細胞形態(tài)基本上就會差了,老化的會比較多,對后期實驗結(jié)果是不好的。所以在養(yǎng)細胞的時候應(yīng)該摸索該細胞喜歡的生長空間密度問題。這個其實是有一個方法可以改善的。對于貼壁細胞,如果細胞形態(tài)不好,(或者細胞形態(tài)不清晰,表面似有異物等)可以在傳代的時候進行如下操作:首先,倒掉舊的培養(yǎng)基,加入3ml新的培養(yǎng)基(有無血清的都可)洗滌一次,用滴管吸走,然后再加入3ml的培養(yǎng)基,進行預(yù)吹打,控制吹打力度,輕輕地大概沿著瓶底過一遍,然后吸走。這時侯再開始正式的消化、吹打。(巨噬細胞建議只吹打,不消化)其次,把吹打下來的細胞懸液加入到新的培養(yǎng)瓶內(nèi),培養(yǎng)瓶事先加入培養(yǎng)基,放入培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng),按時間點觀察細胞貼壁情況。10分鐘觀察一次,20分鐘,30分鐘觀察一次。選擇一個時間點,已經(jīng)有部分細胞貼壁的情況下,重新置于潔凈臺,底面朝上迅速倒出其中的培養(yǎng)基,加入3ml新培養(yǎng)基再輕輕洗一次。然后加入完全培養(yǎng)基培養(yǎng)。后續(xù)觀察細胞生長情況以及形態(tài)。通常稱之為“二傳”。如果一次效果還不理想,可重復(fù)多次。直到找到細胞上乘形態(tài)。其中要注意,結(jié)合細胞喜歡的生長情況。喜歡多一點數(shù)量長得好的細胞你就等貼壁細胞比較多點的時候再傳。反之亦然。
NCI-H1755 cell line人肺癌細胞系
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
SK-NEP-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCL II細胞、Dunn LM8細胞、COLO-829細胞
KBM7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C3A細胞、MDA-MB-231-luc細胞、HS-766-T細胞
UM-UC-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:16HBEo-細胞、A704細胞、AN3CA細胞
KG-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SPC-A1細胞、Hs 895.T細胞、AMJ2-C8細胞
GAK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RSC-364細胞、C-28I2細胞、SVEC4-10細胞
OCM-1A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A.704細胞、Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B細胞、OCILY3細胞
HTori:3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KBM-7/Hap8細胞、H4-II-E細胞、SCC7細胞
BEAS-2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PA-1細胞、143TK-細胞、HCC0078細胞
BC-020細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C-8161細胞、Vero E6細胞、B-16細胞
H-EMC-SS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BSC-40細胞、HS 683T細胞、U-373 MG細胞
ZR751細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PK (15)細胞、DI TNC1細胞、CHP-212細胞
MOLT-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HKBML細胞、NE1-E6E7細胞、BEL-7402細胞
LS-513細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1792細胞、OCIAML4細胞、brain-derived Endothelial cells.3細胞
NCI-H1755 cell line人肺癌細胞系
UO-31細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Kidney-2細胞、PC2細胞、MC-3T3細胞
GA-10 clone 4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P388.D1細胞、Hs 636 T細胞、SNU-869細胞
MGC-803細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NMC-G1細胞、Leukemic 1210細胞、SKMEL-24細胞
MGC-803細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NMC-G1細胞、Leukemic 1210細胞、SKMEL-24細胞
GFP-Olig2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:hTERT-RPE細胞、AML 12細胞、NCIH1618細胞
HN4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LA4細胞、MDA361細胞、H-1618細胞
LA-N-6(OAN)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mel RM細胞、MHCC97H細胞、NG 108-15細胞
RPMI 8226/S細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AC16 [Human hybrid]細胞、NCIH1650細胞、PANC-1細胞
C3H-10T1/2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MUTZ-3細胞、ATN1細胞、Hs 281.T細胞
P3J-HR-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFF1細胞、HIEC6細胞、MCF7-GFP細胞
NCIH526細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc8.13細胞、WERI Rb-1細胞、ATC241細胞
Madin Darby Bovine Kidney細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LU65細胞、JB6 [Mouse]細胞、H1623細胞
TE14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C3H/10T1/2 clone 8細胞、OVCAR10細胞、7404細胞
CCC-ESF-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1781細胞、Namalwa細胞、MB231細胞
COLO-679細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-6細胞、H283細胞、3T3-442A細胞
Karpas422細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL 12細胞、Hepa 1-6細胞、W133細胞
MCF 7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:293-GP細胞、MyLa2059細胞、NCI-H2444細胞
PK (15)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM07404D細胞、Hs-578T細胞、NCIH2286細胞
PLC/PRF/5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ramos.G6.C10細胞、HEY A8細胞、OS-RC-2細胞
MV-4:11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM-159-PT細胞、FHs74 Int細胞、H-1755細胞
PCI:SG231細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCTC-1469細胞、NCI747細胞、A10細胞
Chang Cells細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Z138細胞、G-361細胞、KYSE450細胞
GM3569細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3.NS-1/1.Ag4.1細胞、MDA-MB361細胞、KNS-81細胞
RAW2647細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P30/OHK細胞、0V-1063細胞、SNU520細胞
RCC4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KM933細胞、NCI-SNU-423細胞、HEK 293-F細胞
MEG-01細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H165細胞、CAL 33細胞、LOU-NH91細胞
FRTL 5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RAW264細胞、OCI/AML-5細胞、NS1-Ag 4/1細胞
MC-38細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OE-21細胞、SUDHL8細胞、HeLa S3細胞
H1869細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PA12細胞、SW900細胞、H283細胞
PJ34細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3HRI細胞、SNU-878細胞、HOP 62細胞
Madison lung細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WEHI-279細胞、CFPAC-1細胞、K 562細胞
HCC0827細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI-8402細胞、3 LL細胞、IBRS-2細胞
P30OHK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rat-2細胞、H-4-II-E細胞、SK-MEL-5細胞
P30OHK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rat-2細胞、H-4-II-E細胞、SK-MEL-5細胞
NCIH187細胞系相關(guān)產(chǎn)品:J774.A1細胞、CMT.64細胞、HMEC1細胞
H-510A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUT28細胞、Line 207細胞、McCoy細胞
HCC366細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-363細胞、KYSE70細胞、GM00637H細胞
H3396細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1693細胞、KYSE 410細胞、WSU-DLCL(2)細胞
18G3.cl 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-216細胞、NCI H157細胞、SKGIIIA細胞
NCI-H1819細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2110細胞、KYSE 510細胞、CNE1細胞
MDA-MB-175細胞系相關(guān)產(chǎn)品:293T/17細胞、MDA-MB-453細胞、UCH-1細胞
SCL I細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UCW 100細胞、SF-295細胞、Centre Antoine Lacassagne-33細胞
MGH-U3 (RN)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3X63Ag8細胞、MCF-10 Attached細胞、BV-173細胞
NCI-H1755 cell line人肺癌細胞系
RPE D407細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM115F細胞、MGHU3細胞、SW-480細胞
SK-MEL 28細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NS1-Ag4細胞、OSC19細胞、IHC-ST1細胞
C-Lu65細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLP-2細胞、RCC10細胞、NCIH2009細胞
MRC5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNBE-1細胞、DSL6A/C1細胞、PCI-4B細胞
MNNGHOS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BIC1細胞、U14細胞、NCM460細胞
BEL7404細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Detroit562細胞、GM02219細胞、OSA細胞
UM-UC-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:16HBEo-細胞、SW-626細胞、B16F10細胞
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