"CHO-K1 cell line中國倉鼠卵巢細胞系
細胞背景資料:1957年,PuckTT從成年中國倉鼠卵巢的活檢組織建立了CHO細胞,CHO-K1是CHO的一個亞克隆。CHO-K1的生長需要脯酸。
一般使用trypsin-EDTA 濃度為0.25%trypsin-0.53mM EDTA.2Na或0.05%trypsin-0.02mM EDTA.2Na。消化液濃度過高時,易造成培養(yǎng)基中細胞碎片增多,黑渣子增多,常規(guī)細胞傳代時建議用0.05%的胰酶進行消化,對于難消化的細胞可采用0.25%胰酶進行消化,細胞密度過高超過80%時,采用分步消化法。胰酶儲存在-20°C,解凍在4°C進行,次開瓶后應立即少量分裝于無菌試管中,保存于-20°C,避免反復冷凍解凍造成trypsin之活性降低,并可減少污染之機會。胰酶消化的程度是細胞培養(yǎng)中的一個關(guān)鍵步驟:消化過度細胞碎片增多,黑渣子增多,細胞會成片脫落,嚴重影響細胞活性,并有部分細胞漂浮,隨棄去的胰酶流失;消化不足則細胞難于從瓶壁上吹下,反復吹打同樣也會損傷細胞活性。不同細胞對消化液的敏感性不同,胰酶消化的時間也會有差異。胰酶消化時間與胰酶的濃度,是否含EDTA,胰酶的儲存時間,胰酶的儲存溫度,是否反復凍融,消化加入的胰酶體積,消化溫度及細胞的密度有關(guān)。對于新購買的細胞,建議客戶先用低濃度的胰酶仔細去摸索一下消化時間,可每隔1分鐘鏡下觀察細胞是否變圓,記錄消化時間,下一次操作參考之前的記錄來控制時間即可。
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
CHO-K1 cell line中國倉鼠卵巢細胞系
購買細胞注意事項:1)收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系;2)仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關(guān)信息,如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等;3)用75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落,將細胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)過夜,隔天再取出觀察。此時多數(shù)細胞均會貼壁,若細胞仍不能貼壁請用臺盼藍染色測定細胞活力,如果證實細胞活力正常,請將細胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng);如果染色結(jié)果顯示細胞無活力,請拍下照片及時和我們聯(lián)系,信息確認后我們?yōu)槟倜赓M寄送一次;4)建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和公司技術(shù)部溝通交流。【細胞傳代操作步驟】一、貼壁細胞傳代:1)提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi);2)吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細胞;3)加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細胞瓶,終止胰酶作用;4)用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產(chǎn)生大量的氣泡;5)將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。二、懸浮細胞傳代:1)將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min;2)棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液;3)將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2傳代
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
細胞生長特性:貼壁生長
絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可。吸去胰酶后,殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在37℃一般不到2min足夠消化細胞。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞,連續(xù)這樣傳代,對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去,胰酶潤洗吸去,然后37℃消化。比較難消化的細胞(潤洗方法5min還不能消化),這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育。不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了,一般你肉眼觀察貼壁細胞層,只要能移動了,多半呈沙壯移動,其實已經(jīng)可以了,很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞,這是沒有必要的。一般能移動了,說明細胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了,細胞之間的附著也已經(jīng)消失了,細胞已經(jīng)獨立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個時候應該停止消化,不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好,間隙很大,才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液,之后在貼壁的過程中仍然會聚集,這個是貼壁培養(yǎng)的細胞,尤其是腫瘤細胞的一個特性。如果和標準形態(tài)不一致,那可能是自己沒消化好導致的,但如果消化方法正確,仍然成片分布,甚至完全吹打成單細胞懸液,貼壁后仍然成片分布,這是細胞的特性,是因為貼壁過程中重新聚集了。這個時候你拼了命要去讓它均勻分布,你的細胞之后會對你越來越不好。
CHO-K1 cell line中國倉鼠卵巢細胞系
細胞形態(tài)特性:上皮樣
58F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BNL CL2細胞、H1395細胞、NCI-H2135細胞
RL952細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV-4:11細胞、IA-LM細胞、Sf-21細胞
HT 1376細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PG-4(S+L-)細胞、Panc-327細胞、NCIH1993細胞
B16BL6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEI193細胞、Rat Basophilic Leukemia-1細胞、MSF細胞
H661細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ABC1細胞、BHK21細胞、TSUpr1細胞
H283細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U266 Bl細胞、beta TC6細胞、Gerner 7666細胞
bEnd3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-LY-7細胞、T 98 G細胞、HEL9217細胞
GM03671C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JTC-28細胞、MCF7ADR細胞、U-118 MG細胞
NCIH889細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS180細胞、SK-HEP-1細胞、FHL 124細胞
Bat lung細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LTEP-sm細胞、SHI1細胞、H-187細胞
NRK49F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SN4741細胞、GM04678細胞、3T3-L1 ad細胞
RC-4B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RIN-14B細胞、MDA468細胞、MonoMac1細胞
Okayama University Medical School-23細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OC-316細胞、H-2108細胞、ELD-1細胞
CHO-K1 cell line中國倉鼠卵巢細胞系
QGP1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H220細胞、MT-2J細胞、LS-180細胞
MOLT 3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BC-009細胞、OAW-42細胞、LA-4 [Mouse lung adenoma]細胞
HHFK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEMCSS細胞、MDA-MB-134細胞、Michigan Cancer Foundation-10A細胞
OCI/AML-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDST8細胞、293FT細胞、He La細胞
SUM149PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1954細胞、hTERT RPE1細胞、HEK293-F細胞
CCD 1112SK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR-432細胞、OV1-P細胞、H-1650細胞
251MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-578T細胞、IMCD-3細胞、HN 4細胞
3T3-L1 ad細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D-283 Med細胞、Hs 819.T細胞、H2009細胞
SNU-719細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HcerEpic細胞、P36細胞、Sp2/0-Ag14細胞
SW954細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KNS81細胞、MIA-Pa-Ca-2細胞、HCC15細胞
H1341細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T47D:A細胞、TE354.T細胞、H-1666細胞
RT4P細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep 3B2細胞、DMS153細胞、FRhK-4細胞
BRL-3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Calu-6細胞、Hi5細胞、KM.12細胞
HMC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ML-2細胞、NCI-H711細胞、H35 Reuber細胞
NCI-H322T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rh30細胞、H-660細胞、BC-PAP細胞
T-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 766細胞、H-676細胞、RPVSMC細胞
SP-2/0-AG14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LAD2細胞、MN60細胞、KP-N-NS細胞
RCC_7860細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-2 OS細胞、IOSE80UBC細胞、OLN93細胞
MNNG/HOS Clone F-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SJSA1細胞、DHL-16細胞、GM02131A細胞
HCMEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C4-2B細胞、LAD-2細胞、Hs706T細胞
L-929細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SN12PM6細胞、HANK-1細胞、Hs.27細胞
Dysplastic Oral Keratinocyte細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ACC2細胞、SK-RC-42細胞、SKMEL1細胞
mouse Inner Medullary Collecting Duct-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC/CAR細胞、HEM-L細胞、HuH6細胞
Ca759細胞系相關(guān)產(chǎn)品:130T細胞、C3H10T1/2CL8細胞、OAC-P4C細胞
Lewis lung carcinoma line 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA157細胞、IPEC-1細胞、SNU119細胞
HT 1376.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U138細胞、hADSCs細胞、OVCA432細胞
G361mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VP 267細胞、HCC-202細胞、HPB/ALL細胞
X63細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MPASMC細胞、C8-D1A細胞、SU4細胞
SNU520細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2170細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6細胞、MPASMC細胞
SAS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GA-10-Clone-4細胞、NPA細胞、H-650細胞
N-87細胞系相關(guān)產(chǎn)品:108CC15細胞、Hs 895 T細胞、KYSE 520細胞
Clone Y1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COR-L23/P細胞、RPE1-hTERT細胞、H1876細胞
H295R細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mia PACA 2細胞、MM134細胞、H660細胞
BSC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COV 504細胞、Tn5B1-4細胞、RBMVEC細胞
HEK293細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-343-MG細胞、HIMEC細胞、Murine Carcinoma-38細胞
Tn-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MHCC97H細胞、AG06814-M細胞、16-HBE細胞
TE 85.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BE(2)M17細胞、RPTEC/TERT1細胞、GA-10 (Clone 4)細胞
JIMT1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKMel-28細胞、CL40細胞、Calu-6細胞
PLC-8024細胞系相關(guān)產(chǎn)品:aTC1-6細胞、BT-B細胞、AMC-HN8細胞
T1-73細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PM6細胞、C12細胞、CL MC/9細胞
CL 1-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC-1細胞、H-1563細胞、IBMF-7細胞
HEK 293-H細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs870T細胞、KYSE510細胞、PLA801-95C細胞
HOP92細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF.7細胞、OCI-Ly03細胞、KYSE-270細胞
CHO-K1 cell line中國倉鼠卵巢細胞系
HBE135-E6E7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WERIRb1細胞、NFS 60細胞、GalK1細胞
M619細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H498細胞、PC-10細胞、UM-RC-2細胞
WiDr-TC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Los Angeles Prostate Cancer-4細胞、SUM-190PT細胞、WIL2 Secreting細胞
B16F0細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK-293-FT細胞、NCI H2106細胞、MLA144細胞
HCC 70細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Nthy-ori 3-1細胞、NCI-H82細胞、RAW 264.7細胞
143B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JVM2細胞、HRGEC細胞、H283細胞
HT 1376.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U138細胞、UCLA-SO-14細胞、AC16 [Human hybrid]細胞
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