"3T3-Swiss albino fibroblast cells小鼠胚胎成纖維細胞系
細胞背景資料:3T3細胞株是1962年Todaro G和Green H從分離的瑞士小鼠胚胎中建立的;該細胞的生長受接觸性抑制,匯合狀態(tài)的單層細胞密度為40000個細胞/平方厘米;檢測結(jié)果顯示該細胞鼠痘病毒陰性;在中生長較好,在某些玻璃表面上可能狀態(tài)不佳;細胞生長飽和時其密度可以達到約50000 cells/cm2。
細胞形態(tài):成纖維細胞樣
細胞傳代培養(yǎng)實驗:體外培養(yǎng)的原代細胞或細胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代,以便獲得穩(wěn)定的細胞株或得到大量的同種細胞,并維持細胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細胞形成單層匯合以后,由于密度過大生存空間不足而引起營養(yǎng)枯竭,將培養(yǎng)的細胞分散,從容器中取出,以1:2或1:3以上的比率轉(zhuǎn)移到另外的容器中進行培養(yǎng),即為傳代培養(yǎng);細胞“一代”指從細胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間,與細胞世代或倍增不同。在一代中,細胞培增3~6次。細胞傳代后,一般經(jīng)過三個階段:游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細胞分裂指數(shù)表示細胞增殖的旺盛程度,即細胞群的分裂相數(shù)/100個細胞。一般細胞分裂指數(shù)介于0.2%~0.5%,腫瘤細胞可達3~5%;細胞接種2~3天分裂增殖旺盛,是活力時期,稱指數(shù)增生期(對數(shù)生長期),適宜進行各種試驗。實驗步驟:1.將長成的培養(yǎng)細胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出,在超凈工作臺中倒掉瓶內(nèi)的培養(yǎng)液,加入少許消化液。(以液面蓋住細胞為宜),靜置5~10分鐘。2.在倒置鏡下觀察被消化的細胞,如果細胞變圓,相互之間不再連接成片,這時應(yīng)立即在超凈臺中將消化液倒掉,加入3~5ml新鮮培養(yǎng)液,吹打,制成細胞懸液。3.將細胞懸液吸出2ml左右,加到另一個培養(yǎng)瓶中并向每個瓶中分別加3ml左右培養(yǎng)液,蓋好瓶塞,送回二氧化碳培養(yǎng)箱中,繼續(xù)進行培養(yǎng)。一般情況,傳代后的細胞在2小時左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上,2~4天就可在瓶內(nèi)形成單層,需要再次進行傳代。
BV173細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RGC-5細胞、RBL.2H3細胞、HS-445細胞
RPMI-7951細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HDQP1細胞、SBC-3細胞、TC-1 [Mouse lung]細胞
Walker256細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1993細胞、kms 11細胞、624mel細胞
細胞生長:貼壁
3T3-Swiss albino fibroblast cells小鼠胚胎成纖維細胞系
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代的一般方法:開始細胞傳代前,仔細檢查細胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全:一般主要有:細胞(單層細胞,鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-0.2%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或199等適合細胞有要求的培養(yǎng)液)、滅活小牛血清、慶大霉素溶液(1萬單位)、7.5%NaHC03溶液、0.25%胰蛋白酶、PBS洗液。用具:小方瓶(100m1)、克氏瓶、膠塞、吸管(10ml、1m1)、細胞吹打管(20ml)(以上用具需經(jīng)121℃至少15分鐘高壓滅菌)、C02 孵箱、超凈臺、倒置顯微鏡、4℃、-20℃冰箱;操作步驟:鏡檢細胞,挑選生長狀態(tài)良好,細胞界限清晰,具有立體感,形態(tài)好無污染、無異常及可疑病變細胞。配制細胞培養(yǎng)液:按以下配比配制MEM-0.2%LH培養(yǎng)液100ml內(nèi),加入滅活小牛血清10m1,慶大霉素溶液0.3m1,7.5%碳酸鈉溶液3ml。(僅供一般參考)。消化細胞;先用PBS洗液沖洗細胞表面1-2次,每次10m1,棄去洗液,向細胞瓶內(nèi)加入0.25%胰蛋白酶溶液,每瓶1m1,細胞瓶平放,使消化液完全覆蓋細胞表面。至細胞完全脫落到胰酶中。每瓶加入10m1細胞培養(yǎng)液吹打分散細胞,按所需的傳代比例分裝于小方瓶(100m1)中,再加入10m1細胞培養(yǎng)液重復吹打一次后分裝,然后補加至所需培養(yǎng)量。加塞,置于37±1℃孵箱培養(yǎng)。約2~4天成片。(由細胞接種濃度決定);填寫傳代記錄。
細胞傳代方法:1:3傳代;3-4天1次。
MDCK (NBL-2)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMS-26細胞、As-PC1細胞、NCI-H69C細胞
NCI-H1915細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIADRRES細胞、NCI-H2195細胞、SK-N-BE-2c細胞
108CC15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OAW 42細胞、BHP10-3細胞、RT 112細胞
4T1.2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SHG-44細胞、143 B細胞、Colon26細胞
Calf Pulmonary Artery 47細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKRC-20細胞、MKN-74細胞、Virginia Mason Research Center-Renal Cancer Z細胞
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
3T3-Swiss albino fibroblast cells小鼠胚胎成纖維細胞系
細胞生長特性:貼壁生長
細胞形態(tài)特性:成纖維細胞樣
細胞凍存的步驟:1)選擇處于對數(shù)生長期的細胞,在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng)液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復吹打瓶壁上的細胞,使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘);2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,細胞濃度為5×106~1×107/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具體要看培養(yǎng)的細胞類型來選擇;3)將分裝上述細胞懸液于2ml凍存管中,每管0.25ml。凍存管要將蓋子蓋緊,并標記好細胞名稱和凍存日期,同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù));4)將裝好細胞的凍存管放到凍存盒中,-80℃冰箱過夜。;如果有程序降溫器(放在-80℃冰箱過夜,放入液氮罐);或者可以在4℃,2h;然后轉(zhuǎn)到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐;5)細胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只凍存管細胞復蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。
HCC-95細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kit-225細胞、HDQ-P1細胞、DMS-273細胞
Jurkat細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pt-K1細胞、ACC2細胞、mRMEC細胞
A-101D細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI/AML-3細胞、FRTL-5 Cl 2細胞、TE-15細胞
CAL 78細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-387細胞、U138-MG細胞、MB49細胞
NCI-H1092細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI 2650細胞、COR-L105細胞、KOSC-2細胞
WSU-DLCL-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UWB1.289+BRCA1細胞、MuM-2C細胞、H.Ep.-2細胞
RWPE2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8細胞、DMS 153細胞、SCLC21H細胞
COLO 320DM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:4T1.2細胞、R2C細胞、C3H/10T1/2 CL8細胞
NIH 3T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AR42J細胞、KYSE-150細胞、RPMI-2650細胞
Mouse Bladder Tumor line-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NPA87-1細胞、Porcine Kidney-15細胞、IPLB-SF-21細胞
3T3-Swiss albino fibroblast cells小鼠胚胎成纖維細胞系
ARIP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AR4-2J細胞、H1666細胞、CFSC-2G細胞
IGROV1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI.H226細胞、GH3細胞、SW982細胞
HTR-8/SV neo細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BDCM細胞、RMa-bm細胞、NCI-H747細胞
Mo 59J細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GA-10 clone 4細胞、HuTu 80細胞、Ca759細胞
H-82細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH295R細胞、HEL 299細胞、PG-BE1細胞
FDC-P1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CMT-93細胞、NCTC clone 929細胞、COLO 829細胞
FDC-P1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CMT-93細胞、NCTC clone 929細胞、COLO 829細胞
HCC-1569細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WSUDLCL2細胞、AN3 CA細胞、Hs606T細胞
FU-OV-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH526細胞、MDA-MB-231-GFP細胞、U-CH1細胞
TPC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OUMS23細胞、D407 RPE細胞、RTE細胞
FDC-P1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CMT-93細胞、NCTC clone 929細胞、COLO 829細胞
NCIH748細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A375S2細胞、Central Adrenergic TH-expressing a細胞、SUDHL-10細胞
CCRF/CEM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:M-1細胞、PL 5細胞、DHBE細胞
DHL4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IALM細胞、CALU 1細胞、GDM1細胞
NRK 52E細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR8細胞、Human Fetal Thymocyte-8810細胞、GC-1細胞
SPC-A1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H548細胞、NCIH1793細胞、HMEC-1細胞
NCI-H1184細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H748細胞、L363細胞、Hs 870.T細胞
OE19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc-10.05細胞、BT 20細胞、DH82細胞
NCI-H441細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-366細胞、MN 60細胞、DITNC1細胞
SU4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NW38細胞、MCA-38細胞、CAL-39細胞
LS 174T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS 445T細胞、P3-NS1/1-Ag4-1細胞、L 540細胞
NCIH1755細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FET細胞、RGM-1細胞、MILE SVEN1細胞
BTI-Tn5B14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 281.T細胞、CNE2細胞、LNCaP-ATCC細胞
WB F344細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-HSC細胞、LS-174T細胞、RPMI8226/S細胞
H1618細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-12細胞、TCMK-1細胞、H810細胞
Hs 888.Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT細胞、PL12細胞、P3J細胞
Hs 578.Bst細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2107細胞、MPC-5細胞、HL-60細胞
Leghorn Male Hepatoma cell line細胞系相關(guān)產(chǎn)品:2V6.11細胞、P-19細胞、COR-L 105細胞
A 549細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HLEC-SRA 01/04細胞、MMAc-SF細胞、MSB1細胞
PC-3M-IE8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-231-GFP細胞、M059J細胞、CCK-81細胞
GM07404細胞系相關(guān)產(chǎn)品:639-V細胞、Pa017C細胞、OCI/AML-5細胞
JB-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H322細胞、NCIH740細胞、COLO 824細胞
H-2029細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCTC-929細胞、UM-UC3細胞、SK MES 1細胞
LNCaP C4-2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EB1細胞、HCE細胞、MAD109細胞
OCIAML3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BetaTC6細胞、GM2132細胞、HS-5細胞
MM.1S細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1419細胞、C-4I細胞、F36P細胞
Jiyoye(P-2003)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Cloudman S91 melanoma clone M-3細胞、ECC1細胞、Tb 1 Lu (NBL-12)細胞
P388-D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCL-I細胞、SU8686細胞、CoCL3細胞
P388-D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCL-I細胞、SU8686細胞、CoCL3細胞
BHP10-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A375-SM細胞、MES23.5細胞、SKGT2細胞
RLE-6TN細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C3H10T1/2CL8細胞、U-251MG細胞、RWPE-1細胞
MCAEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM15452細胞、293T細胞、McA-RH 7777細胞
NCIH2342細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RTMC細胞、ssMCF-7細胞、CAL148細胞
R1610細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H510細胞、Murine Thymic Epithelial Cell line 1細胞、HUT 28細胞
Line 522細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H4IIEC3細胞、F442-A細胞、hMSC-BM細胞
MPP 89細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KY180細胞、Sp 2/0-Ag 14細胞、INS1細胞
OCI-Ly3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C8166細胞、WERI-Rb-1細胞、PLA801D細胞
CCRF/CEM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:M-1細胞、PL 5細胞、DHBE細胞
MHCC97-L細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKCO1細胞、SACC83細胞、NCI-H2126細胞
GM2131細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RT-112細胞、P3-X63-Ag8-6-5-3細胞、PIEC細胞
SL-29細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MB39細胞、LED-WiDr細胞、E0771細胞
3T3-Swiss albino fibroblast cells小鼠胚胎成纖維細胞系
OCI-AML3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC0078細胞、UPCI:SCC90細胞、P3X63Ag8.653細胞
M-G63細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKMel-5細胞、Tca8113細胞、PaCa2細胞
SUDHL-16細胞系相關(guān)產(chǎn)品:F-81細胞、Menschliche Und Tierische Zellkulture-1細胞、SW-403細胞
A-101D細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI/AML-3細胞、EFM19細胞、P3 (Jiyoye)細胞
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