"WI-38 fibroblast cells人胚肺成纖維細胞系
細胞背景資料：LeonardHayflick建系；有限傳代細胞系；壽命為５０±１０代（倍增時間２４h）；來自妊娠３個月的正常胚胎肺組織。該細胞系是個用于人制備的人二倍體細胞；培養(yǎng)基中添加TNFα可以加快細胞生長。
細胞形態(tài)：成纖維細胞樣
細胞復蘇后貼壁細胞較少的問題分析：總結１：復蘇過程沒有問題，是否是從液氮拿出直接放入溫水，還有培養(yǎng)箱，二氧化碳濃度，培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS １５-２０%，看看能否幫助貼壁，當然也需要考慮血清問題，還有確信拿來的細胞沒問題。總結２：首先應該懷疑凍存，實際上復蘇出問題的可能非常小，因為操作簡單，而且死板。１、你凍存的時候是不是消化的時間過長，這是一般人所注意不到的，即使書上也不講這個問題，太長的消化時間會讓細胞復蘇時失去貼壁能力，表現(xiàn)為先貼后死，原因是在你復蘇的時候細胞已進入凋亡程序，不可逆轉的死亡。２、你的凍存液好不好，是什么，甘油還是DMSO，質量非常重要，否則也會死亡。３、你的凍存液的量加的是不是太多，ATCC推薦是不超過７%，大于５%，太多也不好。４、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻，這個有一些影響，但不算太大。５、你的凍存是否按部就班，就是所溫度梯度是不是把握嚴格，很多人容易忘卻這個事情，因為這個東西流程長。６、如果你細胞污染，你是否能很快看到，我比我的導師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。７、你的細胞在凍存前是否過密。還有，不贊成孵箱污染這個概念的，所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話，這個細菌是源于孵箱的，但這不代表孵箱污染，因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌，問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找，以后就不犯同樣的問題，這個很重要，不能靠猜，否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題，這個見得太多了，別不當會事。
HCO細胞系相關產(chǎn)品：SNU368細胞、Wien 133細胞、SJSA-1細胞
A.704細胞系相關產(chǎn)品：HEK293-EBNA細胞、16HBE140細胞、HSC-2細胞
Japanese Tissue Culture-28細胞系相關產(chǎn)品：HuH-28細胞、Pa18C細胞、Molm14細胞
細胞生長：貼壁
WI-38 fibroblast cells人胚肺成纖維細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞復蘇基本方法：１．從液氮罐中取出安剖；有時因安剖未封嚴，浸入了液氮，取出后因安剖內液氮迅速氣化而發(fā)生爆炸，因此應帶有防護眼睛和手套。２．迅速放入盛有３６℃～３７℃水的搪瓷罐中，扣上蓋并不時搖動，盡快解凍。３．剪開紗布口袋，取出安剖，用７０％酒精擦拭消毒后，凈化臺上打開蓋，用吸管吸出細胞懸液，裝入離心管中，再補加１０ml培養(yǎng)液，吹打使細胞懸浮。４．低速離心（５００～１０００轉/分）５分鐘，取上清后再重復用培養(yǎng)液漂洗、離心。５．加入培養(yǎng)液適當稀釋后，再移裝入培養(yǎng)瓶中，置溫箱培養(yǎng)，次日更換一次培養(yǎng)液后再繼續(xù)培養(yǎng)。收到T２５ flask細胞時，處理方式為：在寄送過程中，為避免起泡造成細胞脫落死亡，T２５ flask均加滿培養(yǎng)基。請檢查flask外觀，并于顯微鏡下觀察細胞生長狀況和有無污染現(xiàn)象，若有任何問題，不要打開蓋子，請立即通知細胞實驗室。將原封之T２５ flask靜置于３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱中，使細胞回溫至３７°C，并讓運送過程中少數(shù)脫落的細胞可再附著生長。隔天后，于無菌操作箱內取出flask內之培養(yǎng)基(取出之培養(yǎng)基可以再使用)，僅留約５-１０ml培養(yǎng)基于flask內，依一般培養(yǎng)方式再將細胞置入培養(yǎng)箱中，或細胞已長滿盤，則將細胞做傳代培養(yǎng)。
細胞傳代方法：１：２-１：４傳代；２-３天換液１次
NL20細胞系相關產(chǎn)品：RIN m5F細胞、MLFC細胞、LTEP-sm 1細胞
H647細胞系相關產(chǎn)品：DMS-273細胞、FRhK4細胞、Reuber-H-35 hepatoma細胞
A 375細胞系相關產(chǎn)品：Hs 746T細胞、MCF-7/ADR細胞、451Lu細胞
H-1436細胞系相關產(chǎn)品：PNT1/A細胞、SUM-52-PE細胞、Hca-F細胞
GBC-SD細胞系相關產(chǎn)品：Alexander細胞、Hx-147細胞、PL5細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
WI-38 fibroblast cells人胚肺成纖維細胞系
細胞生長特性：貼壁生長
細胞形態(tài)特性：成纖維細胞樣
細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結：１)一般客戶拿到細胞后，應該注意什么？客戶收到細胞后先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細胞１００X，２００X各一張)，排除細胞本身污染的情況；收到細胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過８０%匯合度時，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下１０ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過８０%匯合度時，請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞，吸出培養(yǎng)液、１０００轉/分鐘離心２分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快遞細胞多久能到，是寄凍存的細胞還是復蘇好的細胞？我們采用快遞發(fā)貨，一般外地２--３天，寄細胞前請確認當?shù)販囟?，如果氣溫低于４度的，則采用郵寄凍存細胞；３)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應之細胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基，細胞大都無法立即適應，造成細胞無法存活；４)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的種類和品質對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清，在一些物質或分子的量或內容物上都有所不同，血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
HuT-78細胞系相關產(chǎn)品：LLC-PK1細胞、University of Arizona Cell Culture-812細胞、LS-513細胞
WM 2664細胞系相關產(chǎn)品：TE-9細胞、SK-MEL24細胞、MV411細胞
Bac1 2F5細胞系相關產(chǎn)品：X63Ag8.653細胞、PanC1細胞、Hu-P-T4細胞
Panc-813細胞系相關產(chǎn)品：IA-LM細胞、PCI:SG-231細胞、OE-19細胞
Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma細胞系相關產(chǎn)品：U251細胞、SNU1040細胞、MLFC細胞
FRTL 5細胞系相關產(chǎn)品：RAW264細胞、OCI/AML-5細胞、NS1-Ag 4/1細胞
rRMECs細胞系相關產(chǎn)品：NEC-8細胞、751-NA細胞、U 937細胞
PANC0327細胞系相關產(chǎn)品：3T3 L1細胞、EU-2細胞、Granta-519細胞
NCI-BL6細胞系相關產(chǎn)品：HEC251細胞、TE15細胞、BJ1細胞
JROECL 21細胞系相關產(chǎn)品：KATOIII細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-231細胞、MeT5A細胞
WI-38 fibroblast cells人胚肺成纖維細胞系
I90細胞系相關產(chǎn)品：MES 13細胞、SW1463細胞、INS-1細胞
SK UT 1細胞系相關產(chǎn)品：SNU216細胞、HD11細胞、MN60細胞
Hs606細胞系相關產(chǎn)品：JHH7細胞、HDMEC細胞、Panc 8.13細胞
Pa18C細胞系相關產(chǎn)品：HS-766T細胞、BSC40細胞、NCI-441細胞
SVGp12細胞系相關產(chǎn)品：H-2066細胞、SW-1573細胞、TE354T細胞
H-2073細胞系相關產(chǎn)品：Sf21細胞、KMB17細胞、Huh-7細胞
H-2073細胞系相關產(chǎn)品：Sf21細胞、KMB17細胞、Huh-7細胞
RT-BM-1細胞系相關產(chǎn)品：HUC-1細胞、HCC1806細胞、GM 2132細胞
NCI-H2110細胞系相關產(chǎn)品：E6-1細胞、G-292 clone A141B1細胞、Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1細胞
Tj-905細胞系相關產(chǎn)品：GH 3細胞、COLO678細胞、mousepodocyte細胞
P560細胞系相關產(chǎn)品：HuT-78細胞、H889細胞、OVCAR-10細胞
COLO-684細胞系相關產(chǎn)品：DMS 273細胞、NCI-SNU-668細胞、Hs852細胞
Murine Thymic Epithelial Cell line 1細胞系相關產(chǎn)品：T-84細胞、Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1細胞、PA I細胞
WEHI 231細胞系相關產(chǎn)品：Tn 5B1-4細胞、H1793細胞、H647細胞
CHP 100細胞系相關產(chǎn)品：PANC3.27細胞、RWPE-1細胞、Hs-611-T細胞
Colo205細胞系相關產(chǎn)品：KBM-7細胞、RAG細胞、MHCC 97細胞
BNL-CL.2細胞系相關產(chǎn)品：NW-MEL-38細胞、HSF細胞、P31-FUJ細胞
HCC-202細胞系相關產(chǎn)品：RT4細胞、NB1-RGB細胞、ND7/23細胞
SKNBE(1)細胞系相關產(chǎn)品：WERI-Rb 1細胞、HCC-1588細胞、NBL_S細胞
H-774細胞系相關產(chǎn)品：GM00637細胞、SKNBE細胞、GB-1細胞
GM05372細胞系相關產(chǎn)品：J 774A.1細胞、HF-91細胞、FaDu細胞
LC-MS細胞系相關產(chǎn)品：NCIH1963細胞、SNU601細胞、NCI-H2170細胞
V-79細胞系相關產(chǎn)品：NCI-SNU-5細胞、H9細胞、SKM1細胞
alpha-TC1.6細胞系相關產(chǎn)品：Line 522細胞、MV 4;11細胞、Leydig細胞
HB611細胞系相關產(chǎn)品：HTR8/SVneo細胞、Human Kidney-2細胞、HCFB（HCF）細胞
A.704細胞系相關產(chǎn)品：HEK293-EBNA細胞、16HBE140細胞、HSC-2細胞
OVCAR3細胞系相關產(chǎn)品：BLO-11細胞、SNB.19細胞、NCI-H711細胞
MDA MB 175 VII細胞系相關產(chǎn)品：Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5細胞、H-1623細胞、TO 175.T細胞
Fu97細胞系相關產(chǎn)品：KRC/Y細胞、T 84細胞、LN 229細胞
HPAF-I細胞系相關產(chǎn)品：KM.12細胞、HC11 Mammary Epithelium細胞、Hs 832(C).T細胞
COLO320/DM細胞系相關產(chǎn)品：Pro-Lec1.3C細胞、Jurkat-FHCRC細胞、GOTO細胞
OK-WT細胞系相關產(chǎn)品：BBE細胞、AML-193細胞、PLA-801C細胞
RPMC細胞系相關產(chǎn)品：RA-FLSs細胞、NeHepLxHT細胞、H2286細胞
U14細胞系相關產(chǎn)品：IFRS1細胞、DR2R 1610細胞、H-1838細胞
HOSEpiC細胞系相關產(chǎn)品：Toledo細胞、Hs-27細胞、P-36細胞
SKG IIIa細胞系相關產(chǎn)品：HS578T細胞、NIH:OVCAR-3細胞、WEHI 3細胞
NCI-H1581細胞系相關產(chǎn)品：ROS1728細胞、NCI-SNU-C2A細胞、GBC-SD細胞
Rat1細胞系相關產(chǎn)品：INS-1細胞、HPaSteC(HPSC)細胞、SW 780細胞
Rat1細胞系相關產(chǎn)品：INS-1細胞、HPaSteC(HPSC)細胞、SW 780細胞
AC16 [Human hybrid]細胞系相關產(chǎn)品：SU86.86細胞、L2細胞、L23/P細胞
T1-73細胞系相關產(chǎn)品：PM6細胞、C12細胞、CL MC/9細胞
EBNA-293細胞系相關產(chǎn)品：SKNBE(1)細胞、QBC(939)細胞、GP5d細胞
CCD18Co細胞系相關產(chǎn)品：HLE B-3細胞、NCI-H1385細胞、HBL 100細胞
ChaGo-K-1細胞系相關產(chǎn)品：Michigan Cancer Foundation-7細胞、LS123細胞、CAKI1細胞
HC-11細胞系相關產(chǎn)品：Hca-F細胞、BT-483細胞、KATO 3細胞
PC 61細胞系相關產(chǎn)品：CCF-STTG1細胞、Huh-7細胞、H-524細胞
HFLS細胞系相關產(chǎn)品：MPC11細胞、HCC-9204細胞、HEM細胞
SUP-M2細胞系相關產(chǎn)品：SW1271細胞、D283MED細胞、Baby Hamster Kidney-21細胞
Lewis Lung細胞系相關產(chǎn)品：WEHI231細胞、UMNSAH/DF#1細胞、LIXC-002細胞
WB-F344細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H211細胞、Kit225/K6細胞、WM239A細胞
Molm 13細胞系相關產(chǎn)品：NTERA2-cloneD1細胞、PNT1/A細胞、SK-NSH細胞
WI-38 fibroblast cells人胚肺成纖維細胞系
WERI細胞系相關產(chǎn)品：OV3121細胞、AHH1細胞、HAC-84細胞
SK-N-BE(2)-C細胞系相關產(chǎn)品：HOS (TE85)細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5細胞、T47-D細胞
CORL279細胞系相關產(chǎn)品：MILE SVEN1細胞、HCC-38細胞、TEC細胞
Bac1 2F5細胞系相關產(chǎn)品：X63Ag8.653細胞、COV504細胞、PG-BE1細胞
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