"SW13 epithelioid cells人腎上腺皮質(zhì)瘤細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項(xiàng):1.取細(xì)胞的過程中注意帶好防凍手套,護(hù)目鏡。此項(xiàng)尤為重要,細(xì)胞凍存管可能漏入液氮,解凍時(shí)凍存管中的氣溫急劇上升,可導(dǎo)致爆炸。2.凍存液的問題:凍存液的配置已是常識(shí),在這里不作詳述,但二甲基亞砜(DMSO )對(duì)細(xì)胞不是完全無毒副作用,在常溫下,二甲基亞砜對(duì)細(xì)胞的毒副作較大,因此,必須在1-2min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢,會(huì)造成細(xì)胞的損傷,二甲基亞砜(DMSO)選擇進(jìn)口產(chǎn)品。3.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細(xì)胞解凍后二甲基亞砜濃度較高,注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度,以減少對(duì)細(xì)胞的損傷。4.離心問題:目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細(xì)胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng),第二天換液。因?yàn)殡x心的目的是兩個(gè),去除DMSO,去除死細(xì)胞,這個(gè)是標(biāo)準(zhǔn)流程,但對(duì)一般人來說,把握不好離心轉(zhuǎn)速和時(shí)間,轉(zhuǎn)的不夠活細(xì)胞沉底的少,細(xì)胞就全被扔掉了,轉(zhuǎn)過了活細(xì)胞會(huì)受壓過大,死亡。此外在操作過程中容易污染,所以不推薦。另一種說法為細(xì)胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO),DMSO對(duì)細(xì)胞有一定的毒副作用,所以須將離心后的液體前倒凈,且一定倒干凈。我在試驗(yàn)中按照常規(guī)的離心分裝的方法進(jìn)行復(fù)蘇,結(jié)果無異常。5.細(xì)胞貼壁少的問題:教科書中說明凍存細(xì)胞解凍時(shí)1ml細(xì)胞液要加10ml-15ml培養(yǎng)液,而在我的試驗(yàn)中的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為培養(yǎng)基越少細(xì)胞越容易貼附。6.復(fù)蘇細(xì)胞分裝的問題:試驗(yàn)中我的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為復(fù)蘇1管細(xì)胞一般可分裝到1-2只培養(yǎng)瓶中,分裝過多,細(xì)胞濃度過低,不利于細(xì)胞的貼壁。7.加培養(yǎng)基的量放入問題:這個(gè)量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度,從如果你加培養(yǎng)基的太少,那么DMSO的濃度就會(huì)比較大,就會(huì)影響細(xì)胞生長,從以前的資料來看,DMSO的濃度在小于0.5%的時(shí)候?qū)σ话慵?xì)胞沒有什么影響,還有一個(gè)說法是1%。所以如果你的凍存液的濃度是10%DMSO的話那么加10ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
VMM5A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CX-1細(xì)胞、Fox/NY細(xì)胞、7860細(xì)胞
MCF.10A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEP-3B2細(xì)胞、P1-Raji細(xì)胞、F442A細(xì)胞
VM-CUB-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT-483細(xì)胞、SF-126細(xì)胞、AU565細(xì)胞
細(xì)胞生長:貼壁
SW13 epithelioid cells人腎上腺皮質(zhì)瘤細(xì)胞系
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞培養(yǎng)中支原體污染的經(jīng)驗(yàn)分享:支原體是一類缺乏細(xì)胞壁的原核細(xì)胞型微生物,大小一般在0.3-0.5um之間,呈高度多形性,有球形、桿形、絲狀、分枝狀等多種形態(tài)。它不同于細(xì)胞,也不同于病毒。支原體用普通染色法不易著色,用姬姆薩染色很淺,革蘭染色為陰性。支原體可在雞胚絨毛尿囊膜上或細(xì)胞培養(yǎng)中生長,營養(yǎng)要求比細(xì)菌高。細(xì)胞培養(yǎng)(特別是傳代細(xì)胞)被支原體污染是個(gè)世界性問題。在細(xì)胞培養(yǎng)中支原體感染發(fā)生率達(dá)到63%,支原體感染發(fā)生后能改變細(xì)胞的DNA,RNA及蛋白表達(dá),又不能通過可視法對(duì)其進(jìn)行檢測(cè),而且它對(duì)細(xì)胞的生長率影響較小,不易引起注意。國內(nèi)外研究表明,95%以上是以下四種支原體:口腔支原體(M.orale)、精酸支原體(M.arginini)、豬鼻支原體(M.hyorhinis)和萊氏無膽甾原體(A.laidlawii),為牛源性。以上是最常見的污染細(xì)胞培養(yǎng)的支原體菌群,但能夠污染細(xì)胞的支原體種類是很多的,國外調(diào)查證明,大約有二十多種支原體能污染細(xì)胞,有的細(xì)胞株可以同時(shí)污染兩種以上的支原體。支原體污染的來源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染(一些支原體在人體是正常菌群)、培養(yǎng)基的污染、污染支原體的細(xì)胞造成的交叉污染、實(shí)驗(yàn)器材帶來的污染和用來制備細(xì)胞的原始組織或器官的污染。組織細(xì)胞培養(yǎng)工作中,主要從以下幾個(gè)方面來預(yù)防支原體的污染:控制環(huán)境污染;嚴(yán)格實(shí)驗(yàn)操作;細(xì)胞培養(yǎng)基和器材要保證無菌;在細(xì)胞培養(yǎng)基中加入適量的抗生素。支原體污染細(xì)胞后,特別是重要的細(xì)胞株,有必要清除支原體,常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補(bǔ)體聯(lián)合處理。支原體最突出的結(jié)構(gòu)特征是沒有細(xì)胞壁,一般來講,對(duì)作用于細(xì)胞壁生物合成的抗生素,如萬古霉素等完全不敏感;對(duì)多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺藥物普遍耐藥。對(duì)支原體最有抑制活性及常用于支原體感染治療的抗生素是四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類及一些喹諾酮;其他類抗生素如基糖苷類、霉素對(duì)支原體有較小抑制作用,所以常不用來作為支原體感染的化學(xué)治療劑。
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
H-1672細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC3M細(xì)胞、Calu-3細(xì)胞、SK MEL 28細(xì)胞
HCT/Taxo1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTERA2-D1細(xì)胞、RKN細(xì)胞、NW-MEL-38細(xì)胞
MMAc.SF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PIEC細(xì)胞、NCIH2452細(xì)胞、CDC/EU.HMEC-1細(xì)胞
Mo 59J細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GA-10 clone 4細(xì)胞、HuTu 80細(xì)胞、Ca759細(xì)胞
Hs 739.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U138-MG細(xì)胞、HUVSMC細(xì)胞、OVCA 432細(xì)胞
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
SW13 epithelioid cells人腎上腺皮質(zhì)瘤細(xì)胞系
細(xì)胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細(xì)胞說明書部分
細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書
培養(yǎng)細(xì)胞真的不難,最關(guān)鍵幾點(diǎn):1)所有的東西使用,如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進(jìn)口的,真的很難相信你會(huì)把細(xì)胞養(yǎng)壞;2)動(dòng)作要快,胰酶消化,換液什么,細(xì)胞暴露在空氣中的時(shí)間越少越好。另外,要掌握好胰酶消化時(shí)間,所謂的細(xì)胞狀態(tài)差,很多時(shí)候是傳代的原因;3)有時(shí)間的話,需要細(xì)胞計(jì)數(shù),傳相應(yīng)數(shù)目的細(xì)胞到培養(yǎng)皿中,可以大致清楚細(xì)胞的生長曲線,不會(huì)臨時(shí)要處理,手足無措;4)要做什么心里要非常清楚,合理安排時(shí)間,傳代細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)穿插進(jìn)行,可以節(jié)省很多時(shí)間,也不會(huì)耽誤別人的實(shí)驗(yàn);5)個(gè)人的實(shí)驗(yàn)器具自己收一套,不要和別人混用,最近換了什么新的東西稍微記一下,試劑一旦懷疑污染,馬上丟;6)傳代細(xì)胞不能進(jìn)去太多人,避免相互干擾。每天對(duì)待細(xì)胞比孝敬爹媽還用心,那真是捧在手里怕碎了,含在嘴里怕化了,看在眼里怕丟了,培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)有哪些經(jīng)驗(yàn)教訓(xùn)可以分享呢?1)嚴(yán)格無菌操作,多噴噴酒精,要是對(duì)滅菌的東西不放心,自己包自己送自己烘干;2)不要和別人共用試劑耗材,自己準(zhǔn)備一套;3)有可能的話在拿到新細(xì)胞的時(shí)候做好支原體衣原體檢測(cè);4)水浴鍋很臟,生化培養(yǎng)箱要是得手動(dòng)加濕的話盤里的水也會(huì)很臟,勤換(滅菌水加進(jìn)去);5)晚上離開的時(shí)候給傳代細(xì)胞照紫外,超凈臺(tái)是用完就開;6)是同一時(shí)間就你一個(gè)人在用傳代細(xì)胞在養(yǎng)細(xì)胞。
CV-1.K細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVMANA細(xì)胞、Ku812F細(xì)胞、RH8994細(xì)胞
KYSE 150 KYSE150 Kyse150 KY150
細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1299細(xì)胞、SUP-B15細(xì)胞、C6細(xì)胞
Human Microglia Clone 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC2108細(xì)胞、SCL2細(xì)胞、32Dcl3細(xì)胞
SU86.86細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NT2D1細(xì)胞、BIC細(xì)胞、H-1435細(xì)胞
HEY A8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ME-180細(xì)胞、H-2198細(xì)胞、CMK細(xì)胞
VP303細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Huh-7細(xì)胞、COLO 205細(xì)胞、MOLP-8細(xì)胞
RT4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-118-MG細(xì)胞、OLN 93細(xì)胞、SVOG細(xì)胞
HCC1500細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OEC33細(xì)胞、HTR-8/SV neo細(xì)胞、H1417細(xì)胞
NP69細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2023細(xì)胞、LM(TK-)細(xì)胞、NCI-H1573細(xì)胞
LAD2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IPEC-1細(xì)胞、RGB細(xì)胞、WERIRb1細(xì)胞
SW13 epithelioid cells人腎上腺皮質(zhì)瘤細(xì)胞系
NCIH510細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:N-9細(xì)胞、HCT GEO細(xì)胞、SNU-886細(xì)胞
HuH7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL-120細(xì)胞、MeT 5A細(xì)胞、M 1細(xì)胞
OCI-Ly01細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 578Bst細(xì)胞、COLO 699細(xì)胞、E6-1細(xì)胞
KRC-Y細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Foreskin Fibroblast細(xì)胞、EAC細(xì)胞、Y3M細(xì)胞
hs 68細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MSB1細(xì)胞、MOLP-2細(xì)胞、RBL2H3細(xì)胞
NHEK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA 435細(xì)胞、526 mel細(xì)胞、OCI-Ly 18細(xì)胞
NHEK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA 435細(xì)胞、526 mel細(xì)胞、OCI-Ly 18細(xì)胞
PNT1A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPE-1細(xì)胞、HCCLM6細(xì)胞、HLEC-SRA 01/04細(xì)胞
NFS-60細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-600-T細(xì)胞、MeSoTheliOma-211H細(xì)胞、293 H細(xì)胞
H-748細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mel624細(xì)胞、MARC 145細(xì)胞、SK-RC 39細(xì)胞
INS1E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEC1B細(xì)胞、KTCTL140細(xì)胞、HEK 293T/17細(xì)胞
Sp 2817細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI1846細(xì)胞、OUMS27細(xì)胞、NCI-BL6細(xì)胞
IOSE 29細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:293-EBNA1細(xì)胞、F442A細(xì)胞、Hx147細(xì)胞
Panc-1-P細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H460細(xì)胞、GM03570E細(xì)胞、PLA801-95D細(xì)胞
766T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EnCa1細(xì)胞、ABC-1細(xì)胞、RS4-11細(xì)胞
HEC-1A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Oka-C1細(xì)胞、SK Col 1細(xì)胞、OEC33細(xì)胞
MNNG-HOS (Cl#5)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P31-FUJ細(xì)胞、HCGC細(xì)胞、Hi-5細(xì)胞
X63-Ag8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H187細(xì)胞、SW 1783細(xì)胞、H1930細(xì)胞
IALM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS273細(xì)胞、COS7細(xì)胞、C28/I2細(xì)胞
SNU869細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Corneal Endothelial Cells-12細(xì)胞、MNNG/HOS細(xì)胞、A2780CP70細(xì)胞
NCI-H211細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H22細(xì)胞、JG細(xì)胞、P3 (Jiyoye)細(xì)胞
GM15452細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 343.T細(xì)胞、Human Hepatocyte Line 5細(xì)胞、COLO 320細(xì)胞
P3-X63Ag8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC 2185細(xì)胞、Reuber H35細(xì)胞、H460細(xì)胞
CNE-2Z細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Centre Antoine Lacassagne-27細(xì)胞、WM35細(xì)胞、Line 870 Emory University-4細(xì)胞
UMUC14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mono Mac 1細(xì)胞、CT26-clone 25細(xì)胞、MNNG-HOS細(xì)胞
NB4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep G2細(xì)胞、H524細(xì)胞、COR-L105細(xì)胞
NCI-H1694細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1048細(xì)胞、OKAC1細(xì)胞、NCI-H441細(xì)胞
COR-L51細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C26細(xì)胞、MC/9細(xì)胞、LM8細(xì)胞
PG-4(S+L-)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:F36P細(xì)胞、NCI-H157細(xì)胞、VCaP細(xì)胞
KP-N-RT-BM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT-116細(xì)胞、190PT細(xì)胞、VERO C 1008細(xì)胞
TM3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HRCEC細(xì)胞、NS653細(xì)胞、HSC-1細(xì)胞
SNU668細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Malme-3M細(xì)胞、H-446細(xì)胞、DU 4475細(xì)胞
RPVSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM-149細(xì)胞、NCI-H1651細(xì)胞、NCIH1975細(xì)胞
P3HRI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCL I細(xì)胞、CCF-STTG1細(xì)胞、MDST8細(xì)胞
KMS26細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kuramochi細(xì)胞、NCI-441細(xì)胞、3T3 Swiss Albino細(xì)胞
HC11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MM6細(xì)胞、HEC-251細(xì)胞、NUGC4細(xì)胞
FLS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs68細(xì)胞、PC10細(xì)胞、SNU484細(xì)胞
GI-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUDHL-10細(xì)胞、SW-1088細(xì)胞、National Medical Center-Glioma 1細(xì)胞
KYSE0410細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H929細(xì)胞、GTL-16細(xì)胞、SKG-IIIa細(xì)胞
Institute for Medical Research-90細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CACO2細(xì)胞、NCIH2009細(xì)胞、NCI-H322T細(xì)胞
F98細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC-CAR細(xì)胞、YES 2細(xì)胞、YAC-1細(xì)胞
Hs 934.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV4-11細(xì)胞、NCIH2030細(xì)胞、G 401細(xì)胞
Jurkat, Clone E6-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2452細(xì)胞、HEYA8細(xì)胞、MC3T3E1細(xì)胞
RBL-I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PFSK1細(xì)胞、B16細(xì)胞、Institute for Medical Research-32細(xì)胞
KYSE-410細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE1細(xì)胞、SKMEL-1細(xì)胞、BTT739細(xì)胞
LU165細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WIL2-S細(xì)胞、hMSC-BM細(xì)胞、HCT 116細(xì)胞
SNU407細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-BL6細(xì)胞、SNU251細(xì)胞、OVCAR.4細(xì)胞
NTHY-ORI3.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:hEEC細(xì)胞、Mv1Lu細(xì)胞、HMy2.CIR細(xì)胞
NCIH1385細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P 815細(xì)胞、NCI H345細(xì)胞、Kobe university Oral Squamous Cell culture-2細(xì)胞
HT-1080細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AMJ2C8細(xì)胞、Capan-2細(xì)胞、U266細(xì)胞
NCI-H2029細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ku812細(xì)胞、P30 OHK細(xì)胞、SK-NEP-1細(xì)胞
SW13 epithelioid cells人腎上腺皮質(zhì)瘤細(xì)胞系
CFPAC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH524細(xì)胞、HEL9217細(xì)胞、DMS-153細(xì)胞
HNTEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MES-SA細(xì)胞、H1648細(xì)胞、KLN205細(xì)胞
HEL-92_1_7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKG-IIIa細(xì)胞、NCI H157細(xì)胞、SCC-15細(xì)胞
Human Melanoma Cell Bowes細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jeko1細(xì)胞、J-774A.1細(xì)胞、SNU-520細(xì)胞
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