"MDA-MB-175-VII Thawing人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:該細(xì)胞源自一位54歲患有乳腺導(dǎo)管癌白人女性的胸腔積液。
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
MDA-MB-175-VII Thawing人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長:貼壁
【細(xì)胞培養(yǎng)中細(xì)菌、霉菌的污染情況總結(jié)】細(xì)菌:細(xì)菌在普通倒置顯微鏡下為黑色細(xì)沙狀,根據(jù)感染細(xì)菌的不同,可有不同的外形,培養(yǎng)液一般會渾濁變黃,對細(xì)胞生長影響明顯。仔細(xì)檢查一下器皿的滅菌情況,是否在高壓滅菌時放氣時間足夠,壓力足夠!尤其是和儲存培養(yǎng)液接觸的移液管等物品,連續(xù)兩次污染的話有可能造成儲存液污染,一定要注意!下次使用前檢查一下培養(yǎng)液是否存在渾濁的現(xiàn)象!可在培養(yǎng)液中加相應(yīng)的抗生素處理;霉菌:培養(yǎng)液是清亮的,倒置顯微鏡下無雜質(zhì),37度孵箱培養(yǎng)2-3天,仍清亮,但出現(xiàn)絮狀雜質(zhì),鏡下可見呈細(xì)絲狀的團(tuán)狀漂浮物,可看到明顯的菌絲,細(xì)胞仍可生長,但時間長之后,細(xì)胞的活力狀態(tài)變差,用酸銅溶液擦拭CO2孵箱內(nèi),再把水盤里也加上飽和量的酸銅。或者在培養(yǎng)箱的托盤加入飽和的消毒二鈉高鹽液體,可以防止霉菌污染。CO2孵箱被霉菌污染后,可把所有細(xì)胞暫時轉(zhuǎn)移,采用擦洗孵箱(包括隔板,箱壁)。并把放置在孵箱內(nèi)一個小時,使其蒸汽彌漫。待的氣味消散后,再移入細(xì)胞。孵箱應(yīng)定期清潔(2月左右),尤其在多雨的季節(jié)。其它培養(yǎng)箱清洗方法是:用84液擦洗-清水擦洗-75%酒精擦洗-紫外燈照。預(yù)防霉菌污染,可在培養(yǎng)基里加3u/ml的兩性霉素或制霉菌素或D或雙抗;但細(xì)胞一旦污染,很難挽救,制霉菌素或D或雙抗都于事無補(bǔ),建議舍棄該污染細(xì)胞,將環(huán)境徹底消毒,如果所有細(xì)胞都污染,可能是系統(tǒng)污染,檢查一下培養(yǎng)基和器材,如果只是個別污染,可能是操作問題,就要注意操作。
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法:1:2—1:6傳代,每周換液2—3次
細(xì)胞培養(yǎng)過程中,總是會出現(xiàn)各種意想不到的問題,一不留神就會全盤皆輸。所謂細(xì)胞虐我千百遍,我待細(xì)胞如初戀。下面是貼壁細(xì)胞的保藏方法,希望對細(xì)胞培養(yǎng)初學(xué)操作者有所幫助:1)觀察細(xì)胞狀態(tài):貼壁細(xì)胞密度達(dá)到85-90%,即可以細(xì)胞凍存形式進(jìn)行保藏,拍照,記錄細(xì)胞狀態(tài);2)細(xì)胞清洗:培養(yǎng)皿表面消毒后,轉(zhuǎn)移至生物安全柜中,去除培養(yǎng)皿中培養(yǎng)液,加入12mlPBS,輕輕搖晃培養(yǎng)皿清洗細(xì)胞,隨后吸除PBS清洗液;3)細(xì)胞消化:將2ml胰酶加入培養(yǎng)皿中,完全覆蓋細(xì)胞,置于顯微鏡下觀察(期間禁止搖晃培養(yǎng)皿),當(dāng)細(xì)胞剛開始脫落時,立即轉(zhuǎn)移至生物安全柜中,除去大部分胰酶,剩余約0.5ml胰酶,轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)箱內(nèi)繼續(xù)消化,每30秒肉眼觀察細(xì)胞狀態(tài),至細(xì)胞成流沙狀完全脫落,轉(zhuǎn)移至生物安全柜中,加入12ml完全培養(yǎng)基,終止消化;4)細(xì)胞離心:將終止消化后的細(xì)胞懸液吹打均勻,吸取至15ml離心管中,1000r/min(110g),離心3min;5)細(xì)胞凍存:離心后去除細(xì)胞上清液,按照凍存細(xì)胞量5*10^5/ml,吸取凍存液重懸細(xì)胞沉淀,吹打均勻后分裝至相應(yīng)的凍存管中,進(jìn)行凍存;6)細(xì)胞保藏:凍存管做好標(biāo)記,放至程序降溫盒中,于4℃冰箱放置30min,轉(zhuǎn)移至-80℃超低溫冰箱過夜,將過夜后的凍存細(xì)胞轉(zhuǎn)移至液氮中保藏。
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
MDA-MB-175-VII Thawing人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長特性:松散貼壁生長
有關(guān)實驗室細(xì)胞培養(yǎng)基知識普及:經(jīng)典的培養(yǎng)基有很多種,Corning、Invitrogen(GIBCO)、Thermo Fisher(HyClone)等公司都可以提供。其中DMEM、RPMI 1640、MEM、DMEM/F12都是應(yīng)用最廣泛的培養(yǎng)基。其他如M199、IMDM、L15培養(yǎng)基等也用于某些細(xì)胞的培養(yǎng);MEM是由Eagle’s基礎(chǔ)培養(yǎng)基(BME)發(fā)展而來的,其中增加了組分的范圍及濃度;BEM(DMEM)培養(yǎng)基是為小鼠成纖維細(xì)胞設(shè)計的,現(xiàn)在常用于貼壁細(xì)胞的培養(yǎng)。DMEM的基酸濃度是MEM的兩倍,維生素濃度是MEM的4倍,采用雙倍的HCO3-和CO2濃度起到更好的緩沖作用。最初的配方中葡萄糖含量為1000mg/L,后來為了某些細(xì)胞的生長需要,將葡萄糖含量又調(diào)整為4500mg/L,這就是大家常說的低糖和高糖了;aMEM含有附加的基酸、維生素以及核苷和脂肪酸,它可廣泛應(yīng)用于各種細(xì)胞類型,包括對營養(yǎng)成分要求苛刻的細(xì)胞;Ham’s F12是為在低血清濃度下克隆CHO細(xì)胞而設(shè)計的,現(xiàn)在也廣泛應(yīng)用于克隆形成率的分析及原代培養(yǎng)。F12還可以與DMEM等體積混合使用,得到一種高濃度與成分多樣化相結(jié)合的產(chǎn)物,這種培養(yǎng)基已應(yīng)用于許多原代培養(yǎng)及更難養(yǎng)的細(xì)胞系的培養(yǎng);RPMI 1640培養(yǎng)基是專為淋巴細(xì)胞培養(yǎng)而設(shè)計的,現(xiàn)在已廣泛應(yīng)用于懸浮細(xì)胞的培養(yǎng)。
細(xì)胞形態(tài)特性:上皮細(xì)胞樣
HCC0366細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF/Adr細(xì)胞、RN-c細(xì)胞、NTC200細(xì)胞
HLEpiC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tca8113細(xì)胞、AAV293細(xì)胞、DHL5細(xì)胞
Hs 281.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-320-DM細(xì)胞、NCM460細(xì)胞、ARH-77細(xì)胞
BC-024細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MGH-UI細(xì)胞、SUM 159細(xì)胞、MV-1-Lu細(xì)胞
B104 [Rat neuroblastoma]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C57/B6-L細(xì)胞、HHL5細(xì)胞、C166細(xì)胞
J82COT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK MES 1細(xì)胞、P3-X63-Ag 8.653細(xì)胞、SJCRH30細(xì)胞
GB-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DLD-1細(xì)胞、RPVSMC細(xì)胞、MOLT3細(xì)胞
MDA-MB-468細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:V79-4細(xì)胞、H82細(xì)胞、Ra No. 1細(xì)胞
P-815細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3-X63-Ag8細(xì)胞、Human fetal lung fibroblast 1細(xì)胞、Panc-327細(xì)胞
SU.86.86細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:D6P2T細(xì)胞、U031細(xì)胞、IMR90細(xì)胞
Hx147細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:343 MG細(xì)胞、BJAB細(xì)胞、COLO 394細(xì)胞
Menschliche Und Tierische Zellkulture-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UACC 893細(xì)胞、JVM2細(xì)胞、LS-411N細(xì)胞
Embryonic Bovine Tracheal cells細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCM460細(xì)胞、HNE2細(xì)胞、DMS 153細(xì)胞
PL5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PSN-1細(xì)胞、JM-Jurkat細(xì)胞、SK-N-FI細(xì)胞
SKNEP1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PG-LH7細(xì)胞、MEC1細(xì)胞、MOLT-3細(xì)胞
SK UT 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU216細(xì)胞、H-1417細(xì)胞、PANC-10-05細(xì)胞
HuH28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IHH4細(xì)胞、LS 513細(xì)胞、PTK-2細(xì)胞
H28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1618細(xì)胞、HOK細(xì)胞、V79-GalK1細(xì)胞
RA 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCTC 1469細(xì)胞、A549 ATCC細(xì)胞、A-704細(xì)胞
RTE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ECC-1細(xì)胞、UACC 893細(xì)胞、H-250細(xì)胞
TGBC11TKB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2085細(xì)胞、NCTC-3960細(xì)胞、OVCAR-433細(xì)胞
TGBC11TKB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2085細(xì)胞、NCTC-3960細(xì)胞、OVCAR-433細(xì)胞
COR-L23/P細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RKO-E6細(xì)胞、AtT 20細(xì)胞、NALM-6細(xì)胞
CF-1 MEF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Centre Antoine Lacassagne-62細(xì)胞、RM1細(xì)胞、NCI-H-82細(xì)胞
OCI-LY-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tb1Lu細(xì)胞、OAW 42細(xì)胞、Tn-5細(xì)胞
Vero from pool #76細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TM-3細(xì)胞、DoTc2 4510細(xì)胞、HCE-2 [50.B1]細(xì)胞
MDA-MB-175-VII Thawing人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞系
P3X63 Ag8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2291細(xì)胞、FCCH1024細(xì)胞、SU-DHL6細(xì)胞
HIC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:hA549細(xì)胞、GP2d細(xì)胞、SF 763細(xì)胞
hs 68細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MSB1細(xì)胞、MOLP-2細(xì)胞、RBL2H3細(xì)胞
HCC1954 BL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50細(xì)胞、HPC-Y5細(xì)胞、SW 900細(xì)胞
IBRS2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DoTc2-4510細(xì)胞、NCI-H1092細(xì)胞、SW780細(xì)胞
MDA-MB 453細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LoVo細(xì)胞、NCI-H727細(xì)胞、2780CP細(xì)胞
NCI-H2347細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KATO III細(xì)胞、32D/cl3細(xì)胞、KAT-5細(xì)胞
Centre Antoine Lacassagne-62細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MESSA細(xì)胞、IHC-ST1細(xì)胞、CEM-CCRF (CAMR)細(xì)胞
SPDC-CCL141細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCC-HEH-2細(xì)胞、CHP-126細(xì)胞、LTEP a2細(xì)胞
Capan 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAOV3細(xì)胞、BHP 10-3細(xì)胞、NCI-SNU-5細(xì)胞
SJ-Rh 30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LLC PK1細(xì)胞、H716細(xì)胞、RKN細(xì)胞
LTEP-sm 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mono-Mac-6細(xì)胞、UPCI-SCC-090細(xì)胞、SNU-475細(xì)胞
GH3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UPCI-SCC090細(xì)胞、HCT15細(xì)胞、293T細(xì)胞
HFB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU484細(xì)胞、SUSM-1細(xì)胞、BA/F3細(xì)胞
Mc Ardle 7777細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLC-PRF-5細(xì)胞、MBMEC細(xì)胞、SUDHL-6細(xì)胞
Walker-256細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AR4-IP細(xì)胞、HCC0366細(xì)胞、HEL-92_1_7細(xì)胞
FAK+/+細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1869細(xì)胞、Melanoma 14細(xì)胞、RD-ES細(xì)胞
H650細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:K1細(xì)胞、SK HEP 01細(xì)胞、RLE-6TN細(xì)胞
HFF-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MHCC 97-L細(xì)胞、McARH7777細(xì)胞、HCC827細(xì)胞
NIH3T3-L1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KE 37細(xì)胞、Hs294細(xì)胞、HCC38細(xì)胞
BPH-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H711細(xì)胞、HEK;293細(xì)胞、Hs-746T細(xì)胞
OE33細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPMC細(xì)胞、Ramos 2G6 4C10細(xì)胞、SK Hep1細(xì)胞
Ramos-2G6-4C10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT 549細(xì)胞、PANC0327細(xì)胞、COS7細(xì)胞
ZR75_1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AML193細(xì)胞、CCC-ESF-1細(xì)胞、RPMI 2650細(xì)胞
Blotchy fibroblast-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mevo細(xì)胞、OCI-AML-3細(xì)胞、UMC11細(xì)胞
U-251-MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-962細(xì)胞、RPTEC TERT1細(xì)胞、Hs840T細(xì)胞
B/C3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1672細(xì)胞、HMC細(xì)胞、HNE3細(xì)胞
SKO007細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L1210細(xì)胞、BL-6細(xì)胞、HNE-3細(xì)胞
NRK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DC2.4細(xì)胞、Sp2/O-Ag14細(xì)胞、NCTC-3960細(xì)胞
Rat Basophilic Leukemia-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sp2/O-Ag14細(xì)胞、PG-LH7細(xì)胞、CAL-27細(xì)胞
EU-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC0203細(xì)胞、Vero 76細(xì)胞、DHL-5細(xì)胞
T24(ECV304)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Porcine Kidney-15細(xì)胞、Panc 3.27細(xì)胞、DI TNC-1細(xì)胞
JB6 [Mouse]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NRK49F細(xì)胞、CL1-5細(xì)胞、ST-2細(xì)胞
MDA-MB-175-VII Thawing人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞系
KALS-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RA 1細(xì)胞、SUDHL1細(xì)胞、OVCA433細(xì)胞
PG-BE1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1792細(xì)胞、SUPT-1細(xì)胞、H510A細(xì)胞
CNE1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OE33細(xì)胞、KMS-11細(xì)胞、HEK-293細(xì)胞
UWB1.289細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:118MG細(xì)胞、NCIH196細(xì)胞、FD-LSC-1細(xì)胞
C-28I2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPPVEC細(xì)胞、H-1650細(xì)胞、NCI-H1993細(xì)胞
HCC-9724細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LN299細(xì)胞、L-6 myoblast細(xì)胞、697細(xì)胞
C2C12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OC 316細(xì)胞、COLO-HSR細(xì)胞、RPE D407細(xì)胞
CCD841CoTr細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-72細(xì)胞、MFM223細(xì)胞、U-343細(xì)胞
Vero 76 clone E6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EFO 27細(xì)胞、HMCB細(xì)胞、PaTu-8988s細(xì)胞
Douglas Foster-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2227細(xì)胞、APRE-19細(xì)胞、NIH:OVCAR-3細(xì)胞
FF-WT-BJ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:hTERT-HPNE細(xì)胞、R 2 C細(xì)胞、H-4細(xì)胞
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