"BT-20 Thawing人乳腺癌細胞系
細胞背景資料：該細胞１９５８年由E.Y. Lasfargues 和 L. Ozzello 建系，源自一位７４歲白人女性的乳腺癌組織。該細胞表達WNT３和WNT７８。TNF alpha抑制該細胞生長。該細胞雌激素受體陰性，但表達５＇外顯子缺失的雌激素mRNA。
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
BT-20 Thawing人乳腺癌細胞系
細胞生長：貼壁
傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細胞培養(yǎng)成功以后，需要進行分離培養(yǎng)，否則細胞會因生存空間不足或密度過大，營養(yǎng)障礙，影響細胞生長。細胞由原培養(yǎng)瓶內(nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細胞允許培養(yǎng)的細胞擴增(形成細胞株)，可以進行細胞克隆，易于保存，但可能喪失一些特殊的細胞和分化特征。傳代細胞形成細胞株的利處在于提供了大量持久的實驗材料，便于實驗?！静僮鞑襟E】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進行觀察，當發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細胞間隙增大后，應立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶內(nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶內(nèi)培養(yǎng)液，按順序反復輕輕吹打瓶壁細胞，使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。吹打時動作要輕柔，以防用力過猛損傷細胞；６)用計數(shù)板計數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)；７)細胞培養(yǎng)換液時間應根據(jù)細胞生長的狀態(tài)和實驗要求來確定。一般２～３d后應換一次生長液。待細胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴大培養(yǎng)或換成維持液?！咀⒁馐马棥浚?掌握好細胞消化的時間，消化時間過短時，細胞不宜從瓶壁脫落，過長的消化會導致細胞脫落、損傷；２)掌握好消化濃度，當消化液濃度過高時，消化時間應縮短，過低時細胞消化時間相對延長。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２—１：４傳代，２—３天換液一次
傳代的操作步驟注意事項：1)操作前要洗手，進入超凈臺后手要用75%酒精或0.2%新潔爾滅擦試。試劑等瓶口也要擦試。2)點燃酒精燈，操作在火焰附近進行，耐熱物品要經(jīng)常在火焰上燒灼，金屬器械燒灼時間不能太長，以免退火，并冷卻后才能夾取組織，吸取過營養(yǎng)液的用具不能再燒灼，以免燒焦形成碳膜。3)操作動作要準確敏捷，但又不能太快，以防空氣流動，增加污染機會。4)不能用手觸已消毒器皿的工作部分，工作臺面上用品要布局合理。5)瓶子開口后要盡量保持45℃斜位。6)吸溶液的吸管等不能混用。貼壁細胞傳代的操作步驟：1)吸除培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液。2)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶和EDTA混合液少許，以能覆滿瓶底為限。3)置溫箱中2-5分鐘，當發(fā)現(xiàn)細胞質(zhì)回縮，細胞間隙增大后，立即終止消化。4)吸除消化液，向瓶內(nèi)注入Hanks液數(shù)毫升，輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶，把殘余消化液沖掉。注意加Hanks液沖洗細胞時，動作要輕，以免把已松動的細胞沖掉流失，如用胰蛋白酶液單獨消化，吸除胰蛋白酶液后，可不用Hanks液沖洗，直接加入培養(yǎng)液。5)用吸管吸取營養(yǎng)液輕輕反復吹打瓶壁細胞，使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。6)計數(shù)板計數(shù)后，把細胞懸液分成等份分裝入數(shù)個培養(yǎng)瓶中，置溫箱中培養(yǎng)。懸浮細胞傳代的操作步驟：1)吸出細胞培養(yǎng)液，放入離心管中，離心1000rpm5分鐘。2)吸掉上清液，加入適量之新鮮培養(yǎng)基，混和均勻后，依稀釋比例轉(zhuǎn)移至新的培養(yǎng)瓶中，以正常培養(yǎng)條件培養(yǎng)。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
BT-20 Thawing人乳腺癌細胞系
細胞生長特性：貼壁生長
實驗室細胞培養(yǎng)基知識簡介：干粉培養(yǎng)基：以前大部分實驗室都是用干粉培養(yǎng)基，但配制過程就較為繁瑣，要溶解、調(diào)pH值，過濾，過程中可能會產(chǎn)生一些濃度誤差，而且有些實驗室的水質(zhì)并不理想，所以培養(yǎng)的效果會有差異。如果使用液體培養(yǎng)基，這種人為的誤差會減少，因為畢竟是大批量工業(yè)化生產(chǎn)的，批間差會很小。大家是不是感覺液體培養(yǎng)基會貴很多，以前是這樣，但現(xiàn)在大家都認同了；無血清培養(yǎng)基(Serum-Free Media)，通常以SFM表示，顧名思義，就是在細胞培養(yǎng)中不需要添加血清，但是在某些應用中可能要添加生長因子或細胞因子。無血清培養(yǎng)基中添加了血清的主要成分：粘附因子、生長因子、必需的營養(yǎng)物質(zhì)和激素等，能減少上述血清帶來的不利因素，使細胞培養(yǎng)的條件更穩(wěn)定。但它也不是完美的，從有血清培養(yǎng)過渡到無血清培養(yǎng)的條件并不像想象中那么直截了當。處于發(fā)育的不同分化階段的細胞(例如干細胞與定向前體細胞相比)需要不同的配方，對生長因子和細胞因子的選擇尤為重要。而且在去除血清的同時，也去除了一些血清蛋白具有的保護、解毒作用，因此對試劑、水的純度和儀器清潔度的要求更高。另外，它的價格也比普通的培養(yǎng)基貴很多。
細胞形態(tài)特性：上皮細胞樣
Hu-P-T4細胞系相關產(chǎn)品：COV362細胞、697細胞、Menschliche Und Tierische Zellkulture-3細胞
S91細胞系相關產(chǎn)品：EFM192細胞、Walker-256細胞、MDAMB134細胞
HAVSMC細胞系相關產(chǎn)品：HCC95細胞、P3/NS1/1-Ag4-1細胞、Colon-38細胞
FBHE細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H1781細胞、A2780/CP細胞、MHCC97L細胞
GM04678細胞系相關產(chǎn)品：P388細胞、L cells (TK-)細胞、GCT細胞
DAN-G細胞系相關產(chǎn)品：aNK細胞、MC 3T3-E1細胞、Ramos-2G6-4C10細胞
SEM細胞系相關產(chǎn)品：LTEP-a2細胞、OC-3-VGH細胞、WM115細胞
SK-MEL-MeWo細胞系相關產(chǎn)品：SP2-0-Ag14細胞、Ly8細胞、NEC細胞
CCD 841 CoN細胞系相關產(chǎn)品：SUD4細胞、DF-1細胞、GM05887A細胞
MOVAS-1細胞系相關產(chǎn)品：Human Liver-7702細胞、NCI-H460細胞、WM266細胞
HT115細胞系相關產(chǎn)品：OCI-AML-5細胞、SNU5細胞、SKMEL3細胞
HIEC6細胞系相關產(chǎn)品：JeKo-1細胞、Ramos-RA1細胞、LNCaP FGC細胞
Okayama University Medical School-23細胞系相關產(chǎn)品：OC-316細胞、H-2108細胞、ELD-1細胞
Mono Mac 6細胞系相關產(chǎn)品：CCD-841CoN細胞、Walker-Ca.256細胞、Hs 578Bst細胞
SV40 MES 13細胞系相關產(chǎn)品：DITNC1細胞、MN 60細胞、B16 subline B78細胞
GM05887細胞系相關產(chǎn)品：RBL.2H3細胞、NCI-H441-4細胞、WBF344細胞
H847細胞系相關產(chǎn)品：FRO細胞、Huh 7.5.1細胞、PE/CA-PJ34 (clone C12)細胞
T98細胞系相關產(chǎn)品：SUPB-15細胞、CF PAC-1細胞、MV-4-11細胞
NCIH2452細胞系相關產(chǎn)品：B-3細胞、NMCG1細胞、HPMEC細胞
Hep II細胞系相關產(chǎn)品：NCIH1581細胞、Anglne細胞、MHCCLM3細胞
NCIH2452細胞系相關產(chǎn)品：B-3細胞、NMCG1細胞、HPMEC細胞
NCIH2452細胞系相關產(chǎn)品：B-3細胞、NMCG1細胞、HPMEC細胞
NCIH740細胞系相關產(chǎn)品：95C細胞、NCI-H3255細胞、CCC-HHM-2細胞
OVCAR-8/ADR細胞系相關產(chǎn)品：Psi2 DAP細胞、MDAMB134VI細胞、X63-Ag8-653細胞
Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2細胞系相關產(chǎn)品：HFB細胞、PL-5細胞、MCF 7B細胞
GM3570細胞系相關產(chǎn)品：HS-729細胞、OCILY10細胞、GM02132細胞
BT-20 Thawing人乳腺癌細胞系
AM38細胞系相關產(chǎn)品：RPMI8226/S細胞、VMRCLCD細胞、Co 205細胞
Immortalized Human Hepatocytes細胞系相關產(chǎn)品：H-7721細胞、H-774細胞、CaES-17細胞
BEL7404細胞系相關產(chǎn)品：Detroit562細胞、LNCaP FGC細胞、SACC83細胞
Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19細胞系相關產(chǎn)品：Mono Mac 6細胞、HOS-MNNG細胞、LN-229細胞
CALU 1細胞系相關產(chǎn)品：GM00637I細胞、NCI H226細胞、Hs 695.T細胞
HDMEC細胞系相關產(chǎn)品：Hs895.T細胞、GLC-82細胞、Karpas 422細胞
TE 85 ClF-5細胞系相關產(chǎn)品：IGROV細胞、Neuro 2a細胞、NCI-SNU-886細胞
JB6Cl30細胞系相關產(chǎn)品：MLO-Y4細胞、H661細胞、DHL4細胞
CCRF/CEM/0細胞系相關產(chǎn)品：H9c2(2-1)細胞、HCC-1419細胞、H661細胞
AZ 521細胞系相關產(chǎn)品：A72細胞、H1651細胞、U-343-MG細胞
GT39細胞系相關產(chǎn)品：NCI.H460細胞、RPMI8226細胞、HCC1588細胞
VA-ES-BJ細胞系相關產(chǎn)品：SK-Col-1細胞、SW480細胞、H.Ep. No. 2細胞
HCC38細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H2171細胞、Hs 766.T細胞、MGC803細胞
CT-26細胞系相關產(chǎn)品：Immortal Pig Intestinal-2I細胞、Hs-606-T細胞、A2780/Taxol細胞
MDA MB 436細胞系相關產(chǎn)品：U266-B1細胞、EAC-E2G8細胞、KM12-SM細胞
D 407細胞系相關產(chǎn)品：HCT 15細胞、293 HEK細胞、ECC12細胞
H2122細胞系相關產(chǎn)品：HTR-8/SV-neo細胞、H2023細胞、RMa-bm細胞
KM932細胞系相關產(chǎn)品：T-24細胞、Caco-2細胞、HRC-99細胞
EU-2細胞系相關產(chǎn)品：TE-11細胞、Roswell Park Memorial Institute 7951細胞、NCI-H1404細胞
PA-1細胞系相關產(chǎn)品：Becker細胞、NUGC-2細胞、NCIH1819細胞
HARA-B細胞系相關產(chǎn)品：HUCCT1細胞、MARC145細胞、DR2R1610細胞
SNK-1細胞系相關產(chǎn)品：CCD 966SK細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-453細胞、H-2085細胞
GM02132細胞系相關產(chǎn)品：SNU-620細胞、VMM5A細胞、A549ATCC細胞
IPEC-1細胞系相關產(chǎn)品：P3 (Jiyoye)細胞、CCRF/CEM/0細胞、SKNO1細胞
Hep 3B2細胞系相關產(chǎn)品：JKT-1細胞、CCD-841-CoN細胞、769-P細胞
HCC1599細胞系相關產(chǎn)品：ARO 81-1細胞、ChaGo-K-1細胞、HCC95細胞
PBL細胞系相關產(chǎn)品：H35細胞、RAW 264.7細胞、MA-782細胞
266 Bl細胞系相關產(chǎn)品：GM03671C細胞、KM-H2細胞、SACC-83細胞
PTK 2細胞系相關產(chǎn)品：COLO 699細胞、NS1-Ag4/1細胞、hCMEC/D3細胞
PFSK-1細胞系相關產(chǎn)品：GT38細胞、Tu-212細胞、Roswell Park Memorial Institute 8402細胞
MODE-K細胞系相關產(chǎn)品：RC-4B細胞、GM03190A細胞、H-69細胞
HT3細胞系相關產(chǎn)品：FDC-P1細胞、HEK293EBNA細胞、OK細胞
PCI-4B細胞系相關產(chǎn)品：GDM-1細胞、NUGC4細胞、HUT125細胞
BT-20 Thawing人乳腺癌細胞系
RF/6A細胞系相關產(chǎn)品：HT-29/CX-1細胞、RGM1細胞、LU65細胞
H-747細胞系相關產(chǎn)品：HPC-Y5細胞、H727細胞、VMRC-LCD細胞
HEK 293A細胞系相關產(chǎn)品：ESC-410細胞、LC-1/sq細胞、RGC5細胞
COLO 201細胞系相關產(chǎn)品：Madin Darby Canine Kidney細胞、HuP-T3細胞、Bovine Turbinate細胞
M07e細胞系相關產(chǎn)品：BS-C-1細胞、SW 1271細胞、LTEPsm細胞
RAW-264.7細胞系相關產(chǎn)品：HCC1937細胞、G361細胞、NCIH2029細胞
AZ-521細胞系相關產(chǎn)品：MADISON LUNG TA-109細胞、MOLT.4細胞、T98-G細胞
LNCaP細胞系相關產(chǎn)品：Y79細胞、CCK81細胞、PE/CA-PJ34細胞
G 401細胞系相關產(chǎn)品：PC-9細胞、HO8910細胞、HEB細胞
D324 Med細胞系相關產(chǎn)品：HFL細胞、FHCRC-11細胞、PANC0504細胞
CFSC-2G細胞系相關產(chǎn)品：H2405細胞、CCD-18Co細胞、NK 10a細胞
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