"SK-N-FI Thawing人腦神經母細胞瘤細胞系
細胞背景資料：詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
SK-N-FI Thawing人腦神經母細胞瘤細胞系
細胞生長：貼壁
傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細胞培養(yǎng)成功以后，需要進行分離培養(yǎng)，否則細胞會因生存空間不足或密度過大，營養(yǎng)障礙，影響細胞生長。細胞由原培養(yǎng)瓶內分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細胞允許培養(yǎng)的細胞擴增(形成細胞株)，可以進行細胞克隆，易于保存，但可能喪失一些特殊的細胞和分化特征。傳代細胞形成細胞株的利處在于提供了大量持久的實驗材料，便于實驗。【操作步驟】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內舊培養(yǎng)液；２)向瓶內加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進行觀察，當發(fā)現(xiàn)胞質回縮、細胞間隙增大后，應立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶內加入Hanks液少量，輕輕轉動培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶內培養(yǎng)液，按順序反復輕輕吹打瓶壁細胞，使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。吹打時動作要輕柔，以防用力過猛損傷細胞；６)用計數板計數后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)；７)細胞培養(yǎng)換液時間應根據細胞生長的狀態(tài)和實驗要求來確定。一般２～３d后應換一次生長液。待細胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴大培養(yǎng)或換成維持液?！咀⒁馐马棥浚?掌握好細胞消化的時間，消化時間過短時，細胞不宜從瓶壁脫落，過長的消化會導致細胞脫落、損傷；２)掌握好消化濃度，當消化液濃度過高時，消化時間應縮短，過低時細胞消化時間相對延長。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：４傳代，每周換液２次
懸浮細胞不容易轉染：懸浮細胞是指細胞生長不依賴支持物表面，在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長，如淋巴細胞。在實驗室經常會遇到懸浮細胞的轉染，其和貼壁細胞轉染還是有很大不同的。目前大多數實驗室用的是脂質體類的轉染試劑，脂質體轉染是基于電荷吸引原理，先形成脂質體-DNA復合物，散布在細胞周圍，然后通過細胞的內吞作用，將目的基因導入細胞內，而脂質體復合物與貼壁細胞的接觸機會比懸浮細胞高出很多倍，所以，脂質體轉染時懸浮細胞的轉染效率要明顯低于貼壁細胞。其次，脂質體試劑的毒性較大，這就使得懸浮細胞的轉染更為困難了。另外，懸浮細胞不易培養(yǎng)，易死亡，也給細胞轉染造成了一定的困難。為了提高懸浮細胞的轉染效率，可以使用非脂質體的轉染試劑，如納米材料的。也可以使用電轉染方法，針對懸浮細胞等難轉染細胞還是挺不錯的，電擊對細胞有一定的損傷，選用具有細胞膜修復功能的電轉染試劑，可以將電擊對細胞的傷害降到最低，懸浮細胞不易轉染，選對試劑及良好的細胞培養(yǎng)環(huán)境才是關鍵。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數國外著名大學建系
SK-N-FI Thawing人腦神經母細胞瘤細胞系
細胞生長特性：貼壁生長
【懸浮型細胞的傳代操作】１)吸出細胞培養(yǎng)液，放入離心管中，離心１０００rpm ５分鐘；２)吸掉上清液，加入適量之新鮮培養(yǎng)基，混和均勻后，依稀釋比例轉移至新的培養(yǎng)瓶中，以正常培養(yǎng)條件培養(yǎng)。【注意事項】１)嚴格的無菌操作；２)適度消化：消化的時間受消化液的種類、配制時間、加入培養(yǎng)瓶中的量等諸多因素的影響，消化過程中應該注意培養(yǎng)細胞形態(tài)的變化，一旦胞質回縮，連接變松散，或有成片浮起的跡象就要立即終止消化。附：EDTA(０.０２％四乙酸二鈉)消化液配方：EDTA ０.２０g，NaCl ８.００g，KCl ０.２０g，KH２PO４ ０.０２g，葡萄糖 ２.００g，０.５％紅４ml，加入蒸餾水定容至１０００ml。１０磅２０min高壓滅菌，使用時調節(jié)PH值到７.４。注意EDTA不能被血清中和，使用后培養(yǎng)瓶要徹底清洗，否則再培養(yǎng)時細胞容易脫壁。
細胞形態(tài)特性：上皮樣
CMK細胞系相關產品：LS-411細胞、CV-1細胞、NCI-H128細胞
Med 341細胞系相關產品：373MG細胞、HG2855細胞、U-87 MG細胞
GM00215A細胞系相關產品：HOSEpiC細胞、H2122細胞、GM02219D細胞
JurkatE6-1細胞系相關產品：Walker-256-TC細胞、NR8383.1細胞、28SC細胞
HELF細胞系相關產品：BAR-T細胞、MBT-2細胞、CAL-120細胞
SW-780細胞系相關產品：U-251 MG細胞、Kasumi 1細胞、ID8細胞
MIA-Pa-Ca-2細胞系相關產品：451-LU細胞、JEG-3細胞、Panc 08.13細胞
Capan 1細胞系相關產品：CAOV3細胞、BHP 10-3細胞、NCI-SNU-5細胞
Walker256細胞系相關產品：NCI-H1993細胞、kms 11細胞、624mel細胞
H-650細胞系相關產品：LCLC103H細胞、ARO 81-1細胞、AtT 20細胞
Capan-2細胞系相關產品：H-1341細胞、NOR 10細胞、NG10815細胞
NCIH1734細胞系相關產品：SUDHL-1細胞、NCI-H1395細胞、SW-403細胞
SW-1990細胞系相關產品：H-2342細胞、NB19-RIKEN細胞、SKNEP細胞
UC-3細胞系相關產品：HCFB（HCF）細胞、NCIH650細胞、DH-82細胞
Clone 15 HL-60細胞系相關產品：Hs-578Bst細胞、PCI:SG231細胞、MDA MB 436細胞
IOSE 80細胞系相關產品：H2330細胞、HEK293-F細胞、mouse Inner Medullary Collecting Duct-3細胞
MC-3T3細胞系相關產品：CESS細胞、A-172MG細胞、RFL 6細胞
MDA-MB-453細胞系相關產品：H-2444細胞、C57 Mouse Tumor 64細胞、HS-729細胞
RGM1細胞系相關產品：C1R細胞、HT-29細胞、SKMel-28細胞
Mv.1.Lu細胞系相關產品：YAC細胞、BC-027細胞、LICCF細胞
HCC-827細胞系相關產品：MCF-7B細胞、NCI-H1341細胞、SW 527細胞
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KMM-1細胞系相關產品：MCF12F細胞、RPMI 2650細胞、CCRFCEM細胞
EVSAT細胞系相關產品：MB49細胞、HCC0044細胞、PVEC細胞
DHL-4細胞系相關產品：NTHY-ORI3.1細胞、Panc-813細胞、H2110細胞
OsACL細胞系相關產品：Instituto Biologico-Rim Suino-2細胞、LU65細胞、SUM-159-PT細胞
SK-N-FI Thawing人腦神經母細胞瘤細胞系
HFB細胞系相關產品：SNU484細胞、SUSM-1細胞、BA/F3細胞
HEK-293A細胞系相關產品：ECV-304細胞、U-373 MG細胞、KPL-4細胞
MC 3T3-E1細胞系相關產品：SUNE1細胞、WBF344細胞、OE19細胞
SKNDZ細胞系相關產品：751-NA-15細胞、HCC366細胞、PFSK-1細胞
MDA MB 175 VII細胞系相關產品：Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5細胞、H-1623細胞、TO 175.T細胞
KYSE-450細胞系相關產品：MHHCALL2細胞、LA-N-1細胞、SW480細胞
OB2細胞系相關產品：Lieming Xu-2細胞、OCI/AML4細胞、A2780細胞
TI-73細胞系相關產品：Hep 3B2.1-7細胞、KS-SLK細胞、P3J.HR1K細胞
MUTZ-3細胞系相關產品：H1915細胞、NCIH1734細胞、DV-90細胞
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KU1919細胞系相關產品：MC9細胞、NMC-G1細胞、Panc 04.03細胞
NK-10A細胞系相關產品：X63細胞、EFO 27細胞、LL/2(LLc1)細胞
IOSE-Van細胞系相關產品：VM Cub 1細胞、Potorous tridactylus Kidney 1細胞、HMO6細胞
JCA-1細胞系相關產品：NTC-200細胞、H-1975細胞、Fox/NY細胞
H1672細胞系相關產品：MIHA細胞、H-1437細胞、HS-695T細胞
KMS-26細胞系相關產品：ARH-77細胞、H-2110細胞、HME1細胞
WEHI231細胞系相關產品：LICR-HN6細胞、McA-RH 7777細胞、VMRC-RCZ細胞
MDA-468細胞系相關產品：HOC-1細胞、SO-Rb 50細胞、TCCPAN2細胞
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H35細胞系相關產品：OV 2008細胞、6T-CEM細胞、OVCAR8細胞
bEND.3細胞系相關產品：ATDC5細胞、KP-N-NS細胞、HES [Human embryonic skin fibroblast]細胞
H1618細胞系相關產品：TE-12細胞、TCMK-1細胞、H810細胞
SK-MEL 28細胞系相關產品：NS1-Ag4細胞、OSC19細胞、IHC-ST1細胞
DMS-114細胞系相關產品：MDAMB-231細胞、253J細胞、293AD細胞
A 375細胞系相關產品：Hs 746T細胞、MCF-7/ADR細胞、451Lu細胞
LM TK negative細胞系相關產品：SW1088細胞、P3J細胞、HR1K細胞
VP303細胞系相關產品：Huh-7細胞、COLO 205細胞、MOLP-8細胞
MCF7-GFP細胞系相關產品：P3/NS-1細胞、SW 1353細胞、CCRF-CEM C1細胞
52PE細胞系相關產品：Panc04.03細胞、BT-20細胞、Instituto Biologico-Rim Suino-2細胞
H.Ep. No. 2細胞系相關產品：RBL 2H3細胞、Immortalized Human Hepatocytes細胞、OVCAR8/ADR細胞
293S細胞系相關產品：CL-34細胞、LC1sq細胞、RBL-2H3細胞
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SK-N-FI Thawing人腦神經母細胞瘤細胞系
786O細胞系相關產品：OCI-Ly 1細胞、NCI/ADR-RES細胞、NCI-H441-4細胞
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