"COS-7 ThawingSV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細胞系
細胞背景資料：此細胞株源自CV-１細胞株，經(jīng)轉(zhuǎn)染起始點缺失的SV４０病毒突變體得到；編碼表達野生型T抗原，所以該細胞適合作為需要SV４０T抗原表達的載體的轉(zhuǎn)染宿主。該細胞表達T抗原，允許SV４０病毒的溶解性生長，支持４０℃時溫度敏感性A２０９病毒的復(fù)制，支持起始區(qū)域缺陷的SV４０突變體的復(fù)制。因含有SV４０病毒的DNA序列，該細胞需要在２級生物安全柜中操作。
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
COS-7 ThawingSV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細胞系
細胞生長：貼壁
解凍細胞常見實驗問題分析及推薦解決方法：在解凍凍存細胞時，發(fā)現(xiàn)會出現(xiàn)存活率低、大量細胞碎片及生長緩慢等問題，究竟是什么原因?qū)е拢覀冊撛趺催M行解決？以下是國內(nèi)外細胞培養(yǎng)專家針對解凍細胞實驗問題，總結(jié)的一些解決方案！出現(xiàn)低存活率的可能原因及推薦解決方案如下：１)解凍過程中細胞裂解，推薦的解決方案：可預(yù)期到一定量的細胞死亡，因此細胞的濃度應(yīng)足夠高，考慮到這一損失。起始濃度為１*１０(６)至１*１０(７)細胞/毫升；２)解凍過程中的問題，推薦的解決方案：在-７０℃至-８０℃下保存冷凍的培養(yǎng)物，保存時間為１-５天，但這不是保存的方法。在３７℃充分解凍后應(yīng)立即開始培養(yǎng)；３)對冷凍液過敏，推薦的解決方案：A.完全或部分更換培養(yǎng)基，減少培養(yǎng)基中冷凍液的量。在２４小時后更換培養(yǎng)液體可全部去除冷凍液。B.留出更多時間供培養(yǎng)物恢復(fù)。有時細胞需要幾周時間才能形成單層或密集的懸浮物，取決于冷凍時細胞的年齡或傳代次數(shù)或在生長階段中的位置。冷凍的條件在對數(shù)期；４)被冷凍的原種細胞的年齡或冷凍時培養(yǎng)物的年齡，推薦的解決方案：解凍最近冷凍的細胞。細胞處于冷凍狀態(tài)的時間越長，存活率越低。檢查冷凍細胞的時間和方法。在冷凍時細胞應(yīng)處于對數(shù)期。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２傳代
預(yù)防細胞污染的注意事項：實驗進行前，超凈臺用紫外燈照射30-60min，然后用75%酒精擦拭超凈臺臺面，并開啟超凈臺風扇運轉(zhuǎn)10min左右再開始實驗操作。實驗用品用75%酒精擦拭后才能放入超凈臺內(nèi)；實驗用品用完應(yīng)移出超凈臺，以利于氣流的流通。實驗完成后用75%酒精擦拭超凈臺臺面。每次操作只處理一種細胞；即使不同細胞使用相同的培養(yǎng)基也不要共享同一瓶培養(yǎng)基，避免細胞間的交叉污染。操作時小心取用無菌的物品，避免污染。勿碰觸吸管尖頭，不小心碰觸后應(yīng)立即更換；不要在打開的容器瓶口正上方操作，容器打開后，傾斜45°操作，操作完成后及時蓋上瓶蓋。CO2培養(yǎng)箱的清潔是較易被忽視的地方，應(yīng)1-2個月對培養(yǎng)箱定期進行清潔消毒。先用75%酒精擦拭培養(yǎng)箱內(nèi)壁、隔板、水盤2-3次，用雙蒸水清洗，再用酒精棉球擦拭一遍，后紫外燈照射4h以上。水盤內(nèi)加入無菌水（應(yīng)每周更換），待培養(yǎng)箱內(nèi)溫度、濕度、CO2濃度穩(wěn)定后再放入細胞。定期清洗或更換超凈臺過濾膜、預(yù)濾網(wǎng)。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
COS-7 ThawingSV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細胞系
細胞生長特性：貼壁生長
【胰蛋白酶消化操作】１)加入消化液：小心吸出舊培養(yǎng)液，用PBS清洗(沖洗)，加入適量消化液(胰蛋白酶液)，注意消化液的量以蓋住細胞，消化溫度是３７℃；２)顯微鏡下觀察細胞：倒置顯微鏡下觀察消化細胞，若胞質(zhì)回縮，細胞之間不再連接成片，表明此時細胞消化適度；(３)吸棄消化液加入培養(yǎng)液：棄去胰蛋白酶液，注意更換吸管，加入新鮮的培養(yǎng)液?！敬荡蚍稚⒓毎僮鳌浚?吹打制懸：用滴管將已經(jīng)消化細胞吹打成細胞懸液；２)吸細胞懸液入離心管：將細胞懸液吸入１０ml離心管中；３)平衡離心：平衡后將離心管放入臺式離心機中，以１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心６-８分鐘；４)棄上清液，加入新培養(yǎng)液：棄去上清液，加入２ml培養(yǎng)液，用滴管輕輕吹打細胞制成細胞懸液?！痉盅b稀釋細胞操作】１)顯微鏡下觀察細胞：倒置顯微鏡下觀察細胞量，必要是計數(shù)。注意密度過小會影響傳代細胞的生長，傳代細胞的密度應(yīng)該不低于５×１０５/ml。最后要做好標記；２)分裝：將細胞懸液吸出分裝至２～３個培養(yǎng)瓶中，加入適量培養(yǎng)基旋緊瓶蓋；３)繼續(xù)培養(yǎng)：用酒精棉球擦拭培養(yǎng)瓶，適當旋松瓶蓋，放入CO２培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。傳代細胞２小時后開始貼附在瓶壁上。
細胞形態(tài)特性：成纖維細胞樣
CWR22Rv1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2110細胞、Det 562細胞、HME-1細胞
HO-8910 PM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CL-40細胞、H-2227細胞、NCI-H345細胞
OVMANA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL-5細胞、LIXC-002細胞、PA317細胞
SF763細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H510A細胞、MONO-MAC 6細胞、PBMC細胞
NK-92細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WPMY1細胞、CAL-62細胞、MDA-MB-361細胞
67NR細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs839T細胞、H2195細胞、LLCMK2細胞
Clone 929細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mv1Lu細胞、HET1A細胞、N1E-115細胞
KRC-Y細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Foreskin Fibroblast細胞、EAC細胞、Y3M細胞
NCI-H82細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VSC4.1細胞、PT67細胞、H2108細胞
2780細胞系相關(guān)產(chǎn)品：aTC1 Clone 6細胞、T-47D細胞、HCC-1428細胞
GM03571細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Fetal Rhesus Kidney-4細胞、HCC-1395細胞、SU86.86細胞
P560細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuT-78細胞、H889細胞、OVCAR-10細胞
KMH-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly1細胞、SJRH-30細胞、aTC1 Clone 6細胞
HEM-L細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Z310細胞、SU.86.86細胞、ECC-12細胞
HMEC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LTEP-sm 1細胞、LU-65M細胞、SKNBE(2c)細胞
SNU368細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NB-4細胞、D10G41細胞、PVEC細胞
PLA801-95D細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SJSA細胞、Panc05.04細胞、MPC 11細胞
FHs 74 Int細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KPL1細胞、H-510細胞、HEC-251細胞
NCI-H1781細胞系相關(guān)產(chǎn)品：253JBV細胞、NHEK細胞、ESC-410細胞
RERF-LCMS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1882細胞、MAntle cell VERona-1細胞、BLO-11細胞
HCC0015細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COV434細胞、IBMF-7細胞、IMCD-3細胞
HCC0015細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COV434細胞、IBMF-7細胞、IMCD-3細胞
HuPT3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LU165細胞、624-mel細胞、COLO-738細胞
NALM 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-1386細胞、BT-549細胞、EC-109細胞
PANC.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293T/17細胞、Kupffer細胞、SCC 9細胞
SHEP1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKRC-39細胞、Panc-08.13細胞、Hs940T細胞
COS-7 ThawingSV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細胞系
67NR細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs839T細胞、H2195細胞、LLCMK2細胞
H-727細胞系相關(guān)產(chǎn)品：293A細胞、U251細胞、PK-13細胞
RGCs細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MES-1細胞、C81-61細胞、3T6 Swiss Albino細胞
IEC 18細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H865細胞、alpha-TC1-6細胞、CL-40細胞
Large Cell Lung Cancer-103H細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WPMY-1細胞、A2780CP細胞、NCI-SNU-423細胞
C22 (Clara)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFM-192C細胞、HCC1833細胞、NCI/ADRRES細胞
MHCC97細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK N SH細胞、BPH1細胞、LN299細胞
Lymph Node Carcinoma of the prostate細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1623細胞、H-719細胞、OVSAHO細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-453細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Gingival carcinoma Neck Metastasis細胞、Okayama University Medical School-23細胞、FHL124細胞
HuT-78細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LLC-PK1細胞、University of Arizona Cell Culture-812細胞、LS-513細胞
786-O RCC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SMA 560細胞、Murine Carcinoma-38細胞、VK2/E6E7細胞
HCC0202細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B-CPAP細胞、HT-29/CX-1細胞、OV-1063細胞
MKN-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KM12 SM細胞、108CC15細胞、NR-8383細胞
NS1-1 Ag4.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1238細胞、PANC1005細胞、EB3 [Human Burkitt lymphoma]細胞
OVCAR-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IAR20細胞、NK-92MI細胞、Hs 895.T細胞
Ramos (RA)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BALB/3T3 clone A31細胞、H19-7細胞、Nb-2細胞
HCT116/L細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC 1005細胞、LAC細胞、U-2-OS細胞
HCC-1438細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LN229細胞、PA I細胞、BpRcl細胞
Hca-F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ARO81細胞、RASMCs細胞、SK Mel 2細胞
HS 683T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H522細胞、U266細胞、3T3-Swiss細胞
SF 763細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM2131細胞、RD細胞、HT-29細胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AGS細胞、P388.D1細胞、P3X63 AG8-653細胞
IPEC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3 (Jiyoye)細胞、CCRF/CEM/0細胞、SKNO1細胞
CAMA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL 51細胞、TSU-Pr1細胞、H929細胞
CHL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-128細胞、HEK/EBNA細胞、MGH-U1細胞
MNNGHOS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BIC1細胞、V 79細胞、H28細胞
C-32細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EST81細胞、Cloudman M3細胞、UK Pan-1細胞
BC-027細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOVAS細胞、SW 620細胞、CT-26 WT細胞
H-EMC-SS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BSC-40細胞、HS 683T細胞、U-373 MG細胞
U266-B1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC0403細胞、SK-MEL-5細胞、Super Tube細胞
Hs895.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BMU-S1細胞、D10細胞、H1395細胞
NCIH1688細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H23細胞、AGS細胞、786-0WT細胞
Helacyton gartleri細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCGC細胞、VP229細胞、RBL.2H3細胞
COS-7 ThawingSV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細胞系
HO8910/PM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Bac12F5細胞、U-118-MG細胞、MUS-M1細胞
Hs604T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TSCCa細胞、P3X63細胞、GA-10 clone 4細胞
HNE-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SP-2細胞、DMS 79細胞、NCI-SNU-119細胞
Hs895.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BMU-S1細胞、D10細胞、H1395細胞
Panc 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PA317細胞、TE5細胞、OCI-Ly01細胞
C-127細胞系相關(guān)產(chǎn)品：McARH7777細胞、TOV112細胞、BPH-1細胞
H-2198細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMS-11細胞、NCCIT細胞、JJN-3細胞
HOS/MNNG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2347細胞、Centre Antoine Lacassagne-51細胞、JROECL19細胞
Panc 3.27細胞系相關(guān)產(chǎn)品：J774細胞、P3JHR-1細胞、HS852.T細胞
SKUT1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tn5 B1-4細胞、Calf Pulmonary Artery Endothelial細胞、HepG2細胞
Hs 606細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L132細胞、NCI-H2081細胞、NTERA-2 clone D1細胞
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