"B16-F10 Thawing小鼠黑色素瘤細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:B16-F10是B16-F0的亞系。
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
B16-F10 Thawing小鼠黑色素瘤細(xì)胞系
細(xì)胞生長:貼壁
解凍細(xì)胞出現(xiàn)大量細(xì)胞碎片的可能原因及推薦解決方案如下:1)冷凍時(shí)細(xì)胞密度過低:推薦的解決方案:縮短解凍過程中的時(shí)間。將細(xì)胞取出后,立即將凍存管浸入在37℃的水浴中,并震蕩至全部融化,然后迅速地轉(zhuǎn)移到預(yù)熱的培養(yǎng)基中;2)不適當(dāng)?shù)睦鋬鲞^程:推薦的解決方案:解凍不同冷凍室總的試管。確保在凍存過程中采用的適當(dāng)?shù)募夹g(shù),并確保使用了適量和適合的冷凍液。出現(xiàn)生長緩慢的可能原因及推薦解決方案如下:1)培養(yǎng)瓶的大小:一般解決方案是一些細(xì)胞在培養(yǎng)基中傾向于維持一定的密度。將培養(yǎng)物轉(zhuǎn)移到較小的培養(yǎng)瓶中,使細(xì)胞密度上升;如,根據(jù)培養(yǎng)基的體積,從T75培養(yǎng)瓶轉(zhuǎn)移到2或3個(gè)T25培養(yǎng)瓶中;2)細(xì)胞密度過低:通常解決方案是提高未來冷凍物種細(xì)胞的凍存密度,或使用較小的培養(yǎng)容器,或解凍多個(gè)試管來進(jìn)行培養(yǎng)。
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法:消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長滿。
傳代的操作步驟注意事項(xiàng):1)操作前要洗手,進(jìn)入超凈臺后手要用75%酒精或0.2%新潔爾滅擦試。試劑等瓶口也要擦試。2)點(diǎn)燃酒精燈,操作在火焰附近進(jìn)行,耐熱物品要經(jīng)常在火焰上燒灼,金屬器械燒灼時(shí)間不能太長,以免退火,并冷卻后才能夾取組織,吸取過營養(yǎng)液的用具不能再燒灼,以免燒焦形成碳膜。3)操作動作要準(zhǔn)確敏捷,但又不能太快,以防空氣流動,增加污染機(jī)會。4)不能用手觸已消毒器皿的工作部分,工作臺面上用品要布局合理。5)瓶子開口后要盡量保持45℃斜位。6)吸溶液的吸管等不能混用。貼壁細(xì)胞傳代的操作步驟:1)吸除培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液。2)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶和EDTA混合液少許,以能覆滿瓶底為限。3)置溫箱中2-5分鐘,當(dāng)發(fā)現(xiàn)細(xì)胞質(zhì)回縮,細(xì)胞間隙增大后,立即終止消化。4)吸除消化液,向瓶內(nèi)注入Hanks液數(shù)毫升,輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶,把殘余消化液沖掉。注意加Hanks液沖洗細(xì)胞時(shí),動作要輕,以免把已松動的細(xì)胞沖掉流失,如用胰蛋白酶液單獨(dú)消化,吸除胰蛋白酶液后,可不用Hanks液沖洗,直接加入培養(yǎng)液。5)用吸管吸取營養(yǎng)液輕輕反復(fù)吹打瓶壁細(xì)胞,使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。6)計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)后,把細(xì)胞懸液分成等份分裝入數(shù)個(gè)培養(yǎng)瓶中,置溫箱中培養(yǎng)。懸浮細(xì)胞傳代的操作步驟:1)吸出細(xì)胞培養(yǎng)液,放入離心管中,離心1000rpm5分鐘。2)吸掉上清液,加入適量之新鮮培養(yǎng)基,混和均勻后,依稀釋比例轉(zhuǎn)移至新的培養(yǎng)瓶中,以正常培養(yǎng)條件培養(yǎng)。
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
B16-F10 Thawing小鼠黑色素瘤細(xì)胞系
細(xì)胞生長特性:貼壁生長
其實(shí)絕大部分細(xì)胞消化的時(shí)候是只要用胰酶潤洗一遍即可,吸去胰酶后,殘留的那些無法計(jì)算體積的附著在細(xì)胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足夠消化細(xì)胞(絕大部分1min不到)。對于這些細(xì)胞原則上不要用胰酶孵育細(xì)胞,連續(xù)這樣傳代,對細(xì)胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去,胰酶潤洗吸去,然后37度消化;什么算是消化好了呢?不是細(xì)胞全部成間隔分布很離散的單個(gè)圓形才算消化好了,一般你肉眼觀察貼壁細(xì)胞層,只要能移動了,多半呈沙壯移動,其實(shí)已經(jīng)可以了,很多人喜歡把細(xì)胞消化或者吹打成完全分離細(xì)胞,這是沒有必要的。一般能移動了,說明細(xì)胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了,細(xì)胞之間的附著也已經(jīng)消失了,細(xì)胞已經(jīng)獨(dú)立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個(gè)時(shí)候應(yīng)該停止消化,不要等到看到鏡下所有細(xì)胞都分離得非常好,間隙很大,才停止。細(xì)胞就是完全成單個(gè)細(xì)胞懸液,之后在貼壁的過程中仍然會聚集,這個(gè)是貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,尤其是腫瘤細(xì)胞的一個(gè)特性,無論死活的細(xì)胞都是如此,你可以嘗試,準(zhǔn)備100%的單個(gè)細(xì)胞懸液,貼壁后觀察細(xì)胞,仍然是幾個(gè)幾個(gè)細(xì)胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細(xì)胞也是如此,容易聚集,不要去嘗試過幾個(gè)小時(shí)就拿出來吹打成單細(xì)胞懸液(不要笑,這個(gè)是初養(yǎng)懸浮細(xì)胞的人常犯的錯(cuò)誤,以為懸浮培養(yǎng)就是一個(gè)一個(gè)分開)。細(xì)胞只要能從基質(zhì)上脫離下來,這個(gè)時(shí)候即使是成片的(比如Calu-3細(xì)胞),吹打不超過20次后(一般10次即可),成小規(guī)模聚集(10個(gè)細(xì)胞左右),是正常的,不要試圖再去延長消化時(shí)間,或者像有的同學(xué)那樣吹打1h,等待單細(xì)胞懸液出現(xiàn)。
細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書
NH6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MonoMac6細(xì)胞、WERI細(xì)胞、HDQ-P1細(xì)胞
IGROV-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:G361細(xì)胞、PC-9/GR細(xì)胞、RPE-1細(xì)胞
U-87-MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MFHL-2細(xì)胞、A375細(xì)胞、T98 G細(xì)胞
CHO-K1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:V 79細(xì)胞、MCF 7細(xì)胞、NCI-HUT-69細(xì)胞
TOV21G細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4細(xì)胞、PANC-1細(xì)胞、SNU398細(xì)胞
RPE-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Hepatocyte Line 5細(xì)胞、H-1793細(xì)胞、HFLS細(xì)胞
HCT116細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rat podocyte細(xì)胞、MKN 45細(xì)胞、SK-N-BE(2)C細(xì)胞
MARC-145細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC-26細(xì)胞、HUVEC細(xì)胞、HOMEC細(xì)胞
G292細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Nb 2細(xì)胞、HS940細(xì)胞、Lymph Node Carcinoma of the prostate細(xì)胞
P3X63 AG 8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C33細(xì)胞、P-2003細(xì)胞、PANC-10-05細(xì)胞
2V6.11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IPLB-Sf21AE細(xì)胞、NCIH1299細(xì)胞、WC00044細(xì)胞
HO8910PM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TGBC-11-TKB細(xì)胞、SK.MEL.5細(xì)胞、NCI-H220細(xì)胞
HCC4006細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KAT-5細(xì)胞、HCC-94細(xì)胞、H-1184細(xì)胞
OPM2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KP-N-YN細(xì)胞、SKRC 39細(xì)胞、RSC-364細(xì)胞
H-2286細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WERI Rb-1細(xì)胞、H2347細(xì)胞、CCD19Lu細(xì)胞
LL/2(LLc1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHL/IU細(xì)胞、BNL 1MEA.7R.1細(xì)胞、H1770細(xì)胞
SW 626細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LC-1/sq細(xì)胞、HK-2 [Human kidney]細(xì)胞、159 PT細(xì)胞
MN60細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-679細(xì)胞、VMRCRCZ細(xì)胞、WISH細(xì)胞
OE-21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Colon26細(xì)胞、Jurkat E6.1細(xì)胞、H250細(xì)胞
PK-15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PIGI細(xì)胞、SK Mel28細(xì)胞、GB1細(xì)胞
MC9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD1112Sk細(xì)胞、KYSE-180細(xì)胞、0V-1063細(xì)胞
MC9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD1112Sk細(xì)胞、KYSE-180細(xì)胞、0V-1063細(xì)胞
B 95.8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NS20Y細(xì)胞、KBM5細(xì)胞、HFE-145細(xì)胞
SJRH-30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC3T3-E1 Subclone 14細(xì)胞、746T細(xì)胞、SuDHL 4細(xì)胞
D-324MED細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF 539細(xì)胞、A-875細(xì)胞、OE-33細(xì)胞
Karpas-299細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCM細(xì)胞、SHIN-3細(xì)胞、Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative細(xì)胞
B16-F10 Thawing小鼠黑色素瘤細(xì)胞系
NS1-1 Ag4.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1238細(xì)胞、PANC1005細(xì)胞、EB3 [Human Burkitt lymphoma]細(xì)胞
MT-2J細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNAS細(xì)胞、FUOV1細(xì)胞、293/EBNA細(xì)胞
RPMI7666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MFD-1細(xì)胞、EFM192C細(xì)胞、Panc_05_04細(xì)胞
SUDHL8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI Ly19細(xì)胞、N1E115細(xì)胞、GM05887細(xì)胞
KTC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VMM39細(xì)胞、3T3 Swiss Albino細(xì)胞、HCC-94細(xì)胞
Hs-695-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H226細(xì)胞、JB6 Cl 30細(xì)胞、OVCA-420細(xì)胞
BEP2D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuT102細(xì)胞、HFL-I細(xì)胞、LS-1034細(xì)胞
HTh 74細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-415細(xì)胞、GM00637細(xì)胞、IOSE-Mar細(xì)胞
University of Arizona Cell Culture-812細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WEHI 231細(xì)胞、HCC-1143細(xì)胞、NCIH460細(xì)胞
A431細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS688AT細(xì)胞、H740細(xì)胞、HCC 94細(xì)胞
H-460細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GLC-82細(xì)胞、RT-4細(xì)胞、B16F0細(xì)胞
NCIH2452細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B-3細(xì)胞、NMCG1細(xì)胞、HPMEC細(xì)胞
SUDHL6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H841細(xì)胞、RAOEC細(xì)胞、ATN-1細(xì)胞
McA-RH 7777細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H157細(xì)胞、Gerner 7666細(xì)胞、COR-L279細(xì)胞
DU 4475細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WRL68細(xì)胞、32D.cl3細(xì)胞、K562/ADR細(xì)胞
G-292 clone A141B1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EB2細(xì)胞、NCIH244細(xì)胞、LLC1細(xì)胞
C57 Mouse Tumor 64細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BALB/3T3細(xì)胞、MDAPCa2b細(xì)胞、RT-4細(xì)胞
Hopkins-92細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKBr3細(xì)胞、H1650細(xì)胞、Panc 4.03細(xì)胞
Hs445細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-RC-39細(xì)胞、CAL85-1細(xì)胞、CEM-C1細(xì)胞
NALM-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCCJF細(xì)胞、NIH:OVCAR3細(xì)胞、MCF.7細(xì)胞
SKCO1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC3M-1E8細(xì)胞、NG108-15細(xì)胞、RBVEC細(xì)胞
NTC200細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUPB15細(xì)胞、SK-ES細(xì)胞、P815細(xì)胞
HPB-ALL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Eca 109細(xì)胞、H3396細(xì)胞、PCI-4.2細(xì)胞
Granta-519細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RMS13細(xì)胞、RPMI 8226/S細(xì)胞、SUM 102PT細(xì)胞
MHH-CALL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:D-283MED細(xì)胞、W133細(xì)胞、BE(2)-C細(xì)胞
B16-F10--RED細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3(A31)細(xì)胞、RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma]細(xì)胞、HO-8910PM細(xì)胞
U-373-MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC 3T3-E1細(xì)胞、WSU-DLCL-2細(xì)胞、PANC0327細(xì)胞
RMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NBL-2細(xì)胞、NCI-H1355細(xì)胞、Hs343T細(xì)胞
PY8119細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lu-165細(xì)胞、LN382細(xì)胞、BC-022細(xì)胞
2BS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:alphaTC1 Clone 6細(xì)胞、NCI-H2030細(xì)胞、H69細(xì)胞
U266S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC3T3-E1細(xì)胞、NCI-H2198細(xì)胞、SNU-449細(xì)胞
HT-115細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:32D.3細(xì)胞、HSMC細(xì)胞、A-172 MG細(xì)胞
HR1K細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JB6 Cl 30-7b細(xì)胞、TM-4細(xì)胞、IB-RS2細(xì)胞
B16-F10 Thawing小鼠黑色素瘤細(xì)胞系
87MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BJA-B-1細(xì)胞、SK-RC 42細(xì)胞、GA10細(xì)胞
WEHI-231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2170細(xì)胞、CCC-HPF-1細(xì)胞、SW-900細(xì)胞
WEHI-231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2170細(xì)胞、CCC-HPF-1細(xì)胞、SW-900細(xì)胞
HNSC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCASMC細(xì)胞、MDAMB435S細(xì)胞、HEL細(xì)胞
MuM-2C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs688(A)T細(xì)胞、Calu6細(xì)胞、OV2008細(xì)胞
HEM-L細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Z310細(xì)胞、SU.86.86細(xì)胞、ECC-12細(xì)胞
MM134細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H526細(xì)胞、SKOV-433細(xì)胞、KFB細(xì)胞
HCV29細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GS9L細(xì)胞、HCC-1171細(xì)胞、WEHI 164細(xì)胞
BDCM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI/AML2細(xì)胞、Plaepi 34細(xì)胞、SUIT-2細(xì)胞
HMC3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LC-1Sq細(xì)胞、CG-4細(xì)胞、HConEpic細(xì)胞
MB49細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOC細(xì)胞、SF-763細(xì)胞、Mhh-Call 2細(xì)胞
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