"TM4 Thawing小鼠睪丸細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：該細(xì)胞在FSH的作用下cAMP產(chǎn)量增加，但對(duì)LH無(wú)反應(yīng)；與原代Sertoli細(xì)胞相比，該細(xì)胞對(duì)FSH的反應(yīng)性降低。據(jù)報(bào)道，該細(xì)胞組成性纖溶酶原激活物的產(chǎn)量很低，但可被FSH刺激產(chǎn)生，受維刺激可有大幅增高。該細(xì)胞可產(chǎn)生視黃醇結(jié)合蛋白、組織纖溶酶原激活物和轉(zhuǎn)鐵蛋白；表達(dá)FSH受體、雄激素受體和孕激素受體。鼠痘病毒陰性。
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
TM4 Thawing小鼠睪丸細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細(xì)胞培養(yǎng)成功以后，需要進(jìn)行分離培養(yǎng)，否則細(xì)胞會(huì)因生存空間不足或密度過大，營(yíng)養(yǎng)障礙，影響細(xì)胞生長(zhǎng)。細(xì)胞由原培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細(xì)胞允許培養(yǎng)的細(xì)胞擴(kuò)增(形成細(xì)胞株)，可以進(jìn)行細(xì)胞克隆，易于保存，但可能喪失一些特殊的細(xì)胞和分化特征。傳代細(xì)胞形成細(xì)胞株的利處在于提供了大量持久的實(shí)驗(yàn)材料，便于實(shí)驗(yàn)?！静僮鞑襟E】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶?jī)?nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進(jìn)行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細(xì)胞間隙增大后，應(yīng)立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶?jī)?nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)液，按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細(xì)胞，使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。吹打時(shí)動(dòng)作要輕柔，以防用力過猛損傷細(xì)胞；６)用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)；７)細(xì)胞培養(yǎng)換液時(shí)間應(yīng)根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)的狀態(tài)和實(shí)驗(yàn)要求來(lái)確定。一般２～３d后應(yīng)換一次生長(zhǎng)液。待細(xì)胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴(kuò)大培養(yǎng)或換成維持液?！咀⒁馐马?xiàng)】１)掌握好細(xì)胞消化的時(shí)間，消化時(shí)間過短時(shí)，細(xì)胞不宜從瓶壁脫落，過長(zhǎng)的消化會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞脫落、損傷；２)掌握好消化濃度，當(dāng)消化液濃度過高時(shí)，消化時(shí)間應(yīng)縮短，過低時(shí)細(xì)胞消化時(shí)間相對(duì)延長(zhǎng)。
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：３-１：６傳代；每周２-３次。
在細(xì)胞培養(yǎng)過程中會(huì)出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細(xì)胞生長(zhǎng)角度來(lái)說，針對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)過程中生長(zhǎng)不好、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對(duì)應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)不好》可能原因：細(xì)胞本身的狀態(tài)》1)細(xì)胞傳代次數(shù)多，細(xì)胞老化；2)細(xì)胞的接種量：接種量過低，細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢；3)細(xì)胞傳代時(shí)間過晚：細(xì)胞中毒，影響傳代后的細(xì)胞生長(zhǎng)；4)胰酶消化時(shí)間過長(zhǎng)或過短：時(shí)間過長(zhǎng)，細(xì)胞死亡；時(shí)間過短，細(xì)胞未完全分離而成團(tuán)，細(xì)胞死亡；5)細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進(jìn)行驗(yàn)證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準(zhǔn)確無(wú)誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應(yīng)是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個(gè)方面的可能原因，做出針對(duì)性的解決方案》1)注意細(xì)胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，經(jīng)過驗(yàn)證；4)注意實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細(xì)胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無(wú)CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動(dòng)太大；3)細(xì)胞凍存或復(fù)蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測(cè)培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細(xì)胞種；4)檢測(cè)培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。
細(xì)胞來(lái)源說明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
TM4 Thawing小鼠睪丸細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)
常規(guī)的細(xì)胞實(shí)驗(yàn)(增殖，凋亡，遷移，分化之類的)，受消化影響不是很大，如果不用胰酶去孵育而使用潤(rùn)洗的方法消化的話(難消化細(xì)胞例外)。但少數(shù)實(shí)驗(yàn)，比如病毒包裝，對(duì)細(xì)胞代數(shù)，對(duì)細(xì)胞狀態(tài)要求極高。這個(gè)時(shí)候，胰酶消化，就是潤(rùn)洗，都會(huì)對(duì)細(xì)胞包裝病毒的能力有影響，傳代次數(shù)一多，細(xì)胞包裝能力就會(huì)逐漸下降(當(dāng)然也有其它因素影響包裝效率)。這個(gè)時(shí)候都不用胰酶消化，用一些鹽溶液(不是EDTA液)即可。這些鹽溶液通過影響ECM相關(guān)酶的活性，來(lái)使得細(xì)胞脫離基質(zhì)附著表面，但不切割任何蛋白；EDTA的作用。許多人不用胰酶，只用EDTA，或者用trypsin/EDTA聯(lián)合作用。這里要明白，trypsin切割ECM的一些負(fù)責(zé)粘連和附著的蛋白，而EDTA通過螯合Ca離子，作用于Integrin的活性，所以EDTA的作用更加溫和。有的人在trypsin里添加一些EDTA，或者對(duì)付特別難消化的細(xì)胞，添加多一些EDTA，就是這個(gè)道理。一般不要試圖延長(zhǎng)消化時(shí)間(如果１０min還消化不徹底的話)，而應(yīng)該想其它辦法；PBS洗滌。消化之前用PBS洗滌，是常見的操作，因?yàn)镾erum含有抑制trypsin的蛋白。但這里面也有學(xué)問可以講，對(duì)于一些難消化細(xì)胞，那么可以配制不含Ca，Mg離子的PBS，因?yàn)檫@些離子也會(huì)抑制trypsin的活性。但對(duì)于絕大部分胰酶或者EDTA溶液潤(rùn)洗即可消化的細(xì)胞，不需要配制如此溶液。
細(xì)胞形態(tài)特性：上皮樣
NCIH1793細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：D-324 Med細(xì)胞、GM04154B細(xì)胞、NCIH82細(xì)胞
MCCAR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TGHAVSMC細(xì)胞、U266 B1細(xì)胞、H1437細(xì)胞
H1694細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：beta TC6細(xì)胞、TE671細(xì)胞、CCRF/CEM/0細(xì)胞
GM00637I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH292細(xì)胞、Medical University of Graz-Chordoma 1細(xì)胞、HS-940-T細(xì)胞
LC1sq細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1細(xì)胞、RPMI-8226S細(xì)胞、RenCa細(xì)胞
SUM-190PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-F1細(xì)胞、Calu-1細(xì)胞、CWR22-R1細(xì)胞
P30OHK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rat-2細(xì)胞、H-4-II-E細(xì)胞、SK-MEL-5細(xì)胞
G-361細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-118MG細(xì)胞、U-87MG細(xì)胞、HCMEC細(xì)胞
MyLa2059細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKMEL-24細(xì)胞、PC 61 5.3細(xì)胞、NCI-H1781細(xì)胞
WTRL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AAV-293細(xì)胞、H-920細(xì)胞、DanG細(xì)胞
DLD1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AgC11x3A細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 1846細(xì)胞、Mahlavu細(xì)胞
HT1197細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：190PT細(xì)胞、MKN1細(xì)胞、A-375細(xì)胞
RBL-2H3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFM192B細(xì)胞、KB細(xì)胞、C4-2 Bone metastatic細(xì)胞
COR-L23/P細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RKO-E6細(xì)胞、AtT 20細(xì)胞、NALM-6細(xì)胞
CFPAC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TMK1細(xì)胞、GB1細(xì)胞、TALL 1細(xì)胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AGS細(xì)胞、HCEC細(xì)胞、RMS13細(xì)胞
PANC.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293T/17細(xì)胞、Kupffer細(xì)胞、SCC 9細(xì)胞
HR8348細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DHL10細(xì)胞、LS174T細(xì)胞、DMS153細(xì)胞
C8D1A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1930細(xì)胞、HELA-GFP細(xì)胞、Dunn LM8細(xì)胞
NB19-RIKEN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MODE-K細(xì)胞、NCI-H2342細(xì)胞、IPEC-J2細(xì)胞
SUM 190PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS174T細(xì)胞、HeLaS3細(xì)胞、NE-1細(xì)胞
BE2-C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT/FU細(xì)胞、U-2-OS細(xì)胞、NCI-841細(xì)胞
Fao細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI #8226細(xì)胞、Keio University-19-19細(xì)胞、BEL 7402細(xì)胞
Ramos 2G6.4C10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NSI/1-Ag4-1細(xì)胞、Hx147細(xì)胞、no.11細(xì)胞
DI-TNC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SN12CPM6細(xì)胞、Baby Hamster Kidney from litter No. 21細(xì)胞、hEM15A細(xì)胞
HHFK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEMCSS細(xì)胞、MDA-MB-134細(xì)胞、Michigan Cancer Foundation-10A細(xì)胞
TM4 Thawing小鼠睪丸細(xì)胞系
LTEP-sm 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mono-Mac-6細(xì)胞、UPCI-SCC-090細(xì)胞、SNU-475細(xì)胞
MDA-MB-134細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCA432細(xì)胞、Tu212細(xì)胞、624-mel細(xì)胞
hRPTC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC0504細(xì)胞、Medical Research Council cell strain-9細(xì)胞、KCL-22細(xì)胞
EAC-E2G8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR3細(xì)胞、TM-3細(xì)胞、A9 (Hamprecht)細(xì)胞
HKC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-982細(xì)胞、PL9細(xì)胞、BL1339細(xì)胞
Michigan Cancer Foundation-12F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBL 100細(xì)胞、HRCEC細(xì)胞、WM-2664細(xì)胞
HPAF II細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI細(xì)胞、Caki-1細(xì)胞、NUGC2細(xì)胞
RPMI 1788細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ca Ski細(xì)胞、BIU-87/Adr細(xì)胞、GM637A細(xì)胞
MC3T3-E1(C4)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FHCRC subclone 11細(xì)胞、PC 61.5.3細(xì)胞、P388D1細(xì)胞
ME16C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H250細(xì)胞、Hs-611-T細(xì)胞、3T3J2細(xì)胞
NCIH345細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 738細(xì)胞、MT4細(xì)胞、Jurkat clone A3細(xì)胞
NCI660細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：87 MG細(xì)胞、NCI-H23細(xì)胞、MV 4;11細(xì)胞
TEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BNL.CL2細(xì)胞、SK Mel 2細(xì)胞、LM3細(xì)胞
NCIH1876細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OP-9細(xì)胞、HO1-N1細(xì)胞、NCI H2106細(xì)胞
HO-8910細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2081細(xì)胞、LA-795細(xì)胞、SUM159PT細(xì)胞
PaTu 8988 S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc 02細(xì)胞、PLC細(xì)胞、NCTC clone 929細(xì)胞
High Five細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KLN-205細(xì)胞、SW-48細(xì)胞、D-341細(xì)胞
BAEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C28/I2細(xì)胞、H295細(xì)胞、LK2細(xì)胞
KRC/Y細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VMM5細(xì)胞、GT1-1細(xì)胞、P31/FUJ細(xì)胞
Hk-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B5537SKIN細(xì)胞、BT20細(xì)胞、PC-10細(xì)胞
BrCL15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hep II細(xì)胞、Cates 1B細(xì)胞、P388-D1細(xì)胞
TSUpr1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU761細(xì)胞、UCLA NPA871細(xì)胞、KG1細(xì)胞
H3255_DA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCS2/8細(xì)胞、KPL-4細(xì)胞、OCI Ly3細(xì)胞
NCM-460細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2227細(xì)胞、H-220細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 8226細(xì)胞
HEC1-A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C33A細(xì)胞、hA549細(xì)胞、LAPC-4細(xì)胞
Emory University-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ME 180細(xì)胞、MDA-MB-157細(xì)胞、HIT clone T15細(xì)胞
H209細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HN6細(xì)胞、SKHEP1細(xì)胞、SPCA1細(xì)胞
NALM 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-1386細(xì)胞、BT-549細(xì)胞、EC-109細(xì)胞
DHL-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KS-1 [Human glioblastoma]細(xì)胞、Human Microvascular Endothelial Cell line-1細(xì)胞、HCC0070細(xì)胞
MSTO-211 H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1666細(xì)胞、L5178Y-R細(xì)胞、Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2細(xì)胞
H-1105細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UWB1289細(xì)胞、Pt K2 (NBL-5)細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-330細(xì)胞
Tu-212細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-475細(xì)胞、NCI-H526細(xì)胞、V79-4細(xì)胞
NR-8383細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU4細(xì)胞、NK92細(xì)胞、HFL 1細(xì)胞
TM4 Thawing小鼠睪丸細(xì)胞系
PaTu8988s細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs863T細(xì)胞、HCEC-B4G12細(xì)胞、HPBALL細(xì)胞
DU-145細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HRGEC細(xì)胞、Human Pancreatic Duct Epithelial細(xì)胞、Hx-147細(xì)胞
SK.MEL.5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Co 115細(xì)胞、HCT.116細(xì)胞、PLA801C細(xì)胞
RBL-2H3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFM192B細(xì)胞、KB細(xì)胞、C4-2 Bone metastatic細(xì)胞
SNU-668細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mac-1細(xì)胞、EU-4細(xì)胞、NCI-H660細(xì)胞
Mahlavu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sp2/0-Ag14細(xì)胞、MB468細(xì)胞、HO-1-N-1細(xì)胞
IOSE80細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H69C細(xì)胞、Jurkat E6-1細(xì)胞、MGECs細(xì)胞
HS-294-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSAEC1-KT細(xì)胞、TC-1[JHU-1]細(xì)胞、TALL1細(xì)胞
J-111細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vero 76 clone E6細(xì)胞、LAD2細(xì)胞、HT-22細(xì)胞
NCTC 3960細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-157細(xì)胞、HOS/MNNG細(xì)胞、JAR細(xì)胞
CHP212細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CTV1細(xì)胞、T-98細(xì)胞、Farage Original Line細(xì)胞
"