"SiHa Thawing人子宮頸鱗狀細胞癌細胞系
細胞背景資料：該細胞來源于一位日本病人的手術切除的腫瘤組織。電鏡下可以看到細胞間典型的橋粒和細胞質中大量的張力絲。１９７５年發(fā)現有支原體污染，而后被去除。該細胞整合有HPV１６基因組，每個細胞中有１~２個拷貝。
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
SiHa Thawing人子宮頸鱗狀細胞癌細胞系
細胞生長：貼壁
【細胞培養(yǎng)中原蟲的污染情況總結】原蟲：培養(yǎng)液可輕微渾濁，顯微鏡下那些細小的點狀物數量非常多，輕微活動，細胞雖然可以生長但繁殖速度卻明顯減慢，而且細胞狀態(tài)不好，邊緣不清楚，細胞不透亮。他們與細胞可共生但會與細胞爭奪營養(yǎng)。這種共生是非常普遍的，但他們的數量小，細胞站優(yōu)勢所以不會影響到細胞的正常生長，只有當他們到達一定的數量時就會影響到細胞的生長，最終形成惡性循環(huán)。污染的可能原因：可能原因很多比如配液消毒問題、操作問題、環(huán)境問題等等關于培養(yǎng)基的無菌狀況，取培養(yǎng)基至培養(yǎng)瓶中(不加細胞)，３７度試培養(yǎng)一段時間后觀察。如果沒有細菌生長就是操作的問題。也可以在培養(yǎng)基中事先加入雙抗(酸鏈霉素和芐青霉素)。但雙抗有時會影響細胞的狀態(tài)，所以在做轉染、檢測細胞某項指標前一定要撤去雙抗，以避免影響實驗結果。１)孵箱應定期用三氧機消毒或者紫外光照射，并用酒精和新潔爾滅試擦孵箱同時孵箱內的水應是三蒸水；２)超凈臺\取材\器材\培養(yǎng)液\培養(yǎng)瓶\操作等因素；３)超凈臺的風機不能過大，風機到６-８格。否則也可能能致霉菌污染；４)無菌室經甲醛熏蒸消毒后，可用同等量的噴灑中和，約幾小時即可進入操作。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：３傳代，２-３天換液一次
細胞培養(yǎng)更好經驗詳解：1)收到細胞，首先要鏡檢：觀察細胞形態(tài)是否正常，對于貼壁細胞則要注意看貼壁情況是否很好，觀察細胞密度，有疑議及時咨提供細胞的技術人員。 由于運輸的時間或者溫度的變化，很多貼壁細胞在盛滿培養(yǎng)基的瓶子里生長的狀態(tài)和平時會有點不一樣，主要是貼壁牢固問題。比如293T，平時貼壁就不是很牢，在裝滿的培養(yǎng)基瓶子里面，會發(fā)生大片的脫落，細胞聚集在一起，但是細胞生長還是正常的，通過離心收集，加以胰酶的消化，重新打散，又可以正常的貼壁生長。2)當通過上一步的觀察，細胞初步沒有問題時，進行下一步操作。當收到的細胞密達到80%左右時，則處理如下：棄除瓶中大部分培養(yǎng)基，僅保留5到10mL培養(yǎng)所需的常規(guī)培養(yǎng)基；或更換新鮮的培養(yǎng)基，置于培養(yǎng)箱中，隨后每天觀察。 細胞在低于正常生長溫度情況下，會調整為靜止期，或者慢速生長期，恢復37度的環(huán)境至少3個小時左右，才能重新調整到接近對數生長期的狀態(tài)，在對數生長期進行細胞的傳代會大大增加傳代的成功率，和細胞的存活率。3)如果經步觀察發(fā)現細胞密度超過90%，并且細胞狀態(tài)很好時，則復溫后2個小時需要立即傳代。傳代的比例應依據不同的細胞而定。對于生長比較快，狀態(tài)穩(wěn)定，不易受外界影響的細胞可以一次多傳幾瓶；對于生長較慢，細胞比較薄，狀態(tài)容易波動的細胞類型，一次少傳些，每瓶細胞密度大些，便于穩(wěn)定生長。至于一些比較陌生的細胞，次處理也可以依照第二種情況。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數國外著名大學建系
SiHa Thawing人子宮頸鱗狀細胞癌細胞系
細胞生長特性：貼壁生長
【胰蛋白酶消化操作】１)加入消化液：小心吸出舊培養(yǎng)液，用PBS清洗(沖洗)，加入適量消化液(胰蛋白酶液)，注意消化液的量以蓋住細胞，消化溫度是３７℃；２)顯微鏡下觀察細胞：倒置顯微鏡下觀察消化細胞，若胞質回縮，細胞之間不再連接成片，表明此時細胞消化適度；(３)吸棄消化液加入培養(yǎng)液：棄去胰蛋白酶液，注意更換吸管，加入新鮮的培養(yǎng)液。【吹打分散細胞操作】１)吹打制懸：用滴管將已經消化細胞吹打成細胞懸液；２)吸細胞懸液入離心管：將細胞懸液吸入１０ml離心管中；３)平衡離心：平衡后將離心管放入臺式離心機中，以１０００轉/分鐘離心６-８分鐘；４)棄上清液，加入新培養(yǎng)液：棄去上清液，加入２ml培養(yǎng)液，用滴管輕輕吹打細胞制成細胞懸液?！痉盅b稀釋細胞操作】１)顯微鏡下觀察細胞：倒置顯微鏡下觀察細胞量，必要是計數。注意密度過小會影響傳代細胞的生長，傳代細胞的密度應該不低于５×１０５/ml。最后要做好標記；２)分裝：將細胞懸液吸出分裝至２～３個培養(yǎng)瓶中，加入適量培養(yǎng)基旋緊瓶蓋；３)繼續(xù)培養(yǎng)：用酒精棉球擦拭培養(yǎng)瓶，適當旋松瓶蓋，放入CO２培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。傳代細胞２小時后開始貼附在瓶壁上。
細胞形態(tài)特性：上皮樣
PAa細胞系相關產品：ML2細胞、HCC2218細胞、C-8161細胞
NCI-H1648細胞系相關產品：CT26-clone 25細胞、UPCI:SCC154細胞、MSTO-211H細胞
Ketr-3細胞系相關產品：C42細胞、CCD 966SK細胞、MES-SA/Dx5細胞
MESSADX5細胞系相關產品：MALME 3M細胞、CHL/IU細胞、P3-X63.Ag8.653細胞
ZR75_1細胞系相關產品：AML193細胞、CCC-ESF-1細胞、RPMI 2650細胞
NCI-H865細胞系相關產品：SU-DHL-6細胞、AZ-521細胞、SU-DHL-2細胞
RPMI 8226細胞系相關產品：LLC1細胞、A204細胞、Intestinal Epithelioid Cell line No. 18細胞
KY-50細胞系相關產品：CL MC/9細胞、NCI-SNU-407細胞、Hs 606細胞
COV504細胞系相關產品：H341細胞、Rh30細胞、Hs 27細胞
H.Ep. No. 2細胞系相關產品：RBL 2H3細胞、Immortalized Human Hepatocytes細胞、OVCAR8/ADR細胞
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AU-565細胞系相關產品：LCLC-103H細胞、Clone 166細胞、Panc04.03細胞
HFL1細胞系相關產品：MC3T3細胞、COLO-684細胞、SKO-007細胞
TM-3細胞系相關產品：LS174細胞、3T3-A31細胞、746T細胞
HuH-28細胞系相關產品：MCCAR細胞、CSQT-2細胞、HUT 28細胞
H-2126細胞系相關產品：A253細胞、SK-MES細胞、KYSE 150 KYSE150 Kyse150 KY150
細胞
SNU601細胞系相關產品：KYSE0030細胞、WiDr-TC細胞、KPNRTBM1細胞
RPMI 2650細胞系相關產品：JIMT細胞、HuLEC-5a細胞、H-735細胞
SW 403細胞系相關產品：NBL_S細胞、4T1-LUC細胞、A375細胞
Panc813細胞系相關產品：Vero-E6細胞、HPB-ALL細胞、SuDHL 2細胞
SACC83細胞系相關產品：BMSCs（mBMSCs）細胞、MLMA細胞、SF17細胞
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GC-1 spg細胞系相關產品：NCI-H3255細胞、CHL-CL-11細胞、NMC-G1細胞
Immortal Pig Intestinal-2I細胞系相關產品：CHO Lec1細胞、LM TK negative細胞、Centre Antoine Lacassagne-27細胞
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CNE-2Z細胞系相關產品：Centre Antoine Lacassagne-27細胞、WM35細胞、Line 870 Emory University-4細胞
SiHa Thawing人子宮頸鱗狀細胞癌細胞系
Calu 3細胞系相關產品：MV-1-Lu細胞、SW780細胞、RT4-D6-P2T細胞
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NCI-H1693細胞系相關產品：MARC 145細胞、RCK8細胞、Hs888Lu細胞
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H87細胞系相關產品：LNCaP-ATCC細胞、HEK293F細胞、RC-2細胞
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SiHa Thawing人子宮頸鱗狀細胞癌細胞系
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