"HEK293-FT Thawing表達(dá)SV40T抗原人胚腎上皮細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：該細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)SV４０大T抗原，并且促進(jìn)最適病毒產(chǎn)物的產(chǎn)生。
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
HEK293-FT Thawing表達(dá)SV40T抗原人胚腎上皮細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
細(xì)胞接收操作說明：請(qǐng)仔細(xì)閱讀本操作說明及相應(yīng)的細(xì)胞說明書。本公司細(xì)胞發(fā)貨有四種形式：T２５培養(yǎng)瓶(一般是貼壁細(xì)胞使用，懸浮細(xì)胞也可以)、離心管(懸浮細(xì)胞使用多，當(dāng)然，有些公司也會(huì)用這種離心管形式發(fā)貼壁細(xì)胞，但是，長(zhǎng)期經(jīng)驗(yàn)來說，貼壁細(xì)胞容易發(fā)生形態(tài)變化，估計(jì)是細(xì)胞培養(yǎng)空間狹小，血清不足導(dǎo)致(最主要是怕運(yùn)輸延誤導(dǎo)致這些情況發(fā)生)，個(gè)人不建議用離心管形式發(fā)貼壁細(xì)胞)及干冰(凍存細(xì)胞用，主要是冬天天氣冷，溫度低于４℃的地方，都要考慮凍存細(xì)胞)。T２５培養(yǎng)瓶：是用T２５細(xì)胞培養(yǎng)瓶直接發(fā)貨的形式。收到細(xì)胞后，拆開包裝T２５培養(yǎng)瓶的自封袋，不拆封口膜，表面噴７５%酒精消毒后顯微鏡觀察細(xì)胞狀態(tài)(有條件可以拍下此時(shí)細(xì)胞照片)。將細(xì)胞放入３７度培養(yǎng)箱平衡兩小時(shí)以上，再處理細(xì)胞。首先將T２５中培養(yǎng)基取出裝好備用，如細(xì)胞密度高于８０%，可以直接消化傳代，相反則加入５-６ml培養(yǎng)基放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)即可。離心管：是用１５ml離心管發(fā)貨的形式，只用于懸浮細(xì)胞發(fā)貨。收到細(xì)胞后消毒處理及將細(xì)胞放入３７度培養(yǎng)箱平衡兩小時(shí)以上，再處理細(xì)胞。首先將T２５中培養(yǎng)基取出裝好備用(如果實(shí)驗(yàn)室沒有T２５培養(yǎng)瓶，可以暫時(shí)T７５培養(yǎng)瓶，加入１０-１５ml培養(yǎng)基，建議１０ml培養(yǎng)基，也可以使用T１７５培養(yǎng)瓶，加入５０-６０ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)瓶越大，需要的培養(yǎng)基越多。當(dāng)然如果剛接收到細(xì)胞密度不夠的話，不用大瓶子，先用小瓶子養(yǎng)起來再換大的，不然會(huì)長(zhǎng)得很慢，嚴(yán)重的，會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞死亡等危險(xiǎn))，平衡完成后，離心(１０００rpm，３min)收集細(xì)胞，棄上清，用新的培養(yǎng)基重懸細(xì)胞并接種至培養(yǎng)瓶或皿中，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。干冰：是用本公司凍存液凍存細(xì)胞后，直接用干冰將凍存的細(xì)胞冷凍發(fā)貨的形式。收到細(xì)胞后按照細(xì)胞復(fù)蘇的步驟操作即可。
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２傳代
在細(xì)胞培養(yǎng)過程中會(huì)出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細(xì)胞生長(zhǎng)角度來說，針對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)過程中生長(zhǎng)不好、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對(duì)應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)不好》可能原因：細(xì)胞本身的狀態(tài)》1)細(xì)胞傳代次數(shù)多，細(xì)胞老化；2)細(xì)胞的接種量：接種量過低，細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢；3)細(xì)胞傳代時(shí)間過晚：細(xì)胞中毒，影響傳代后的細(xì)胞生長(zhǎng)；4)胰酶消化時(shí)間過長(zhǎng)或過短：時(shí)間過長(zhǎng)，細(xì)胞死亡；時(shí)間過短，細(xì)胞未完全分離而成團(tuán)，細(xì)胞死亡；5)細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進(jìn)行驗(yàn)證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準(zhǔn)確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應(yīng)是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個(gè)方面的可能原因，做出針對(duì)性的解決方案》1)注意細(xì)胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，經(jīng)過驗(yàn)證；4)注意實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細(xì)胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動(dòng)太大；3)細(xì)胞凍存或復(fù)蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測(cè)培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細(xì)胞種；4)檢測(cè)培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
HEK293-FT Thawing表達(dá)SV40T抗原人胚腎上皮細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：懸浮生長(zhǎng)
其實(shí)絕大部分細(xì)胞消化的時(shí)候是只要用胰酶潤(rùn)洗一遍即可，吸去胰酶后，殘留的那些無法計(jì)算體積的附著在細(xì)胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足夠消化細(xì)胞(絕大部分１min不到)。對(duì)于這些細(xì)胞原則上不要用胰酶孵育細(xì)胞，連續(xù)這樣傳代，對(duì)細(xì)胞傷害很大。簡(jiǎn)單的程序是PBS潤(rùn)洗吸去，胰酶潤(rùn)洗吸去，然后３７度消化；什么算是消化好了呢？不是細(xì)胞全部成間隔分布很離散的單個(gè)圓形才算消化好了，一般你肉眼觀察貼壁細(xì)胞層，只要能移動(dòng)了，多半呈沙壯移動(dòng)，其實(shí)已經(jīng)可以了，很多人喜歡把細(xì)胞消化或者吹打成完全分離細(xì)胞，這是沒有必要的。一般能移動(dòng)了，說明細(xì)胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了，細(xì)胞之間的附著也已經(jīng)消失了，細(xì)胞已經(jīng)獨(dú)立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個(gè)時(shí)候應(yīng)該停止消化，不要等到看到鏡下所有細(xì)胞都分離得非常好，間隙很大，才停止。細(xì)胞就是完全成單個(gè)細(xì)胞懸液，之后在貼壁的過程中仍然會(huì)聚集，這個(gè)是貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，尤其是腫瘤細(xì)胞的一個(gè)特性，無論死活的細(xì)胞都是如此，你可以嘗試，準(zhǔn)備１００%的單個(gè)細(xì)胞懸液，貼壁后觀察細(xì)胞，仍然是幾個(gè)幾個(gè)細(xì)胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細(xì)胞也是如此，容易聚集，不要去嘗試過幾個(gè)小時(shí)就拿出來吹打成單細(xì)胞懸液(不要笑，這個(gè)是初養(yǎng)懸浮細(xì)胞的人常犯的錯(cuò)誤，以為懸浮培養(yǎng)就是一個(gè)一個(gè)分開)。細(xì)胞只要能從基質(zhì)上脫離下來，這個(gè)時(shí)候即使是成片的(比如Calu-３細(xì)胞)，吹打不超過２０次后(一般１０次即可)，成小規(guī)模聚集(１０個(gè)細(xì)胞左右)，是正常的，不要試圖再去延長(zhǎng)消化時(shí)間，或者像有的同學(xué)那樣吹打１h，等待單細(xì)胞懸液出現(xiàn)。
細(xì)胞形態(tài)特性：圓形
L Wnt-3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HANK1細(xì)胞、FRO細(xì)胞、Ball 1細(xì)胞
NT2/D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2170細(xì)胞、KYSE0410細(xì)胞、Y79細(xì)胞
A431/P細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2135細(xì)胞、MCF12F細(xì)胞、LMTK-細(xì)胞
BC3H-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：769P細(xì)胞、ETCC007細(xì)胞、GEO細(xì)胞
KYSE-70細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK/293細(xì)胞、NCI-H82細(xì)胞、Nthy-ori 3.1細(xì)胞
CAOV3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEL細(xì)胞、ACHN細(xì)胞、B16-F1細(xì)胞
Tca8113細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 695T細(xì)胞、SUDHL-5細(xì)胞、Tu-212細(xì)胞
SU-DHL-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WiDr-TC細(xì)胞、PC3-M細(xì)胞、MCA 38細(xì)胞
16-HBE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MN60細(xì)胞、Transformed Human Liver Epithelial-2細(xì)胞、IPLB-Sf21-AE細(xì)胞
CoCL3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1355細(xì)胞、H2228細(xì)胞、T-ALL1細(xì)胞
H-2196細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTori 3細(xì)胞、PANC3.27細(xì)胞、C1R細(xì)胞
IGROV細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT8細(xì)胞、NFHIOSE-80細(xì)胞、PA-1細(xì)胞
MH-S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1細(xì)胞、PC12(高分化)細(xì)胞、KE39細(xì)胞
KYSE-150細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BJA-B細(xì)胞、74Int細(xì)胞、Ly1細(xì)胞
HEK 293A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ESC-410細(xì)胞、NHEK細(xì)胞、NCI-H1734細(xì)胞
TOV21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1563細(xì)胞、N-Tera-2細(xì)胞、SKHEP-1細(xì)胞
2V6.11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IPLB-Sf21AE細(xì)胞、NCIH1299細(xì)胞、WC00044細(xì)胞
SW-1116細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CL1細(xì)胞、Transformed Human Liver Epithelial-3細(xì)胞、MODE-K細(xì)胞
231-luc細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BTT739細(xì)胞、HCC-2185細(xì)胞、RPE1-hTERT細(xì)胞
GM00637I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH292細(xì)胞、Medical University of Graz-Chordoma 1細(xì)胞、HS-940-T細(xì)胞
WSUDLCL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCC-HPF-1細(xì)胞、TE 32細(xì)胞、LAN5細(xì)胞
HL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HK-2 [Human kidney]細(xì)胞、H1792細(xì)胞、OCI-Ly7細(xì)胞
Nthy-ori 3-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 636 T細(xì)胞、LYR細(xì)胞、L 929細(xì)胞
Ball 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KM-H2細(xì)胞、HMEC1細(xì)胞、GM03569B細(xì)胞
HME-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ACT-1細(xì)胞、GM02219C細(xì)胞、MIHA細(xì)胞
Caco2BBe細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tn-5B1-4細(xì)胞、OVCAR4細(xì)胞、LS174T細(xì)胞
HEK293-FT Thawing表達(dá)SV40T抗原人胚腎上皮細(xì)胞系
SUM 190細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SV-HUC-1細(xì)胞、SH-SY5Y Parental細(xì)胞、HPAF-II/CD18細(xì)胞
CAL51細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB231細(xì)胞、HEK/293細(xì)胞、HSC細(xì)胞
H2227細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ARPE19細(xì)胞、TW01細(xì)胞、COLO 741細(xì)胞
HCC-1438細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LN229細(xì)胞、PA I細(xì)胞、BpRcl細(xì)胞
J-774細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IMR 90細(xì)胞、A9細(xì)胞、Rat-1細(xì)胞
UPCI-SCC-154細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-28/I2細(xì)胞、NCIH209細(xì)胞、WM-115細(xì)胞
HCC1954-BL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-A細(xì)胞、SK-MEL-3細(xì)胞、MyLa 2059細(xì)胞
SKRC-39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1155細(xì)胞、SPDC-CCL141細(xì)胞、MOLT-3細(xì)胞
HUTU80細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-LMS-1細(xì)胞、IPECJ2細(xì)胞、PCI-SG231細(xì)胞
Neukoplast細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HKF細(xì)胞、Laboratory of Allergic Diseases 2細(xì)胞、TOV21G細(xì)胞
T24細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KCL22S細(xì)胞、GA-10細(xì)胞、UCLA-RO 81細(xì)胞
NCI-H295細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2141細(xì)胞、HUC-1細(xì)胞、Keio University-19-19細(xì)胞
CCRF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EC9706細(xì)胞、SP2/0 Ag-14細(xì)胞、EA hy 926細(xì)胞
KMS18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NS20-Y細(xì)胞、UCLA NPA-87-1細(xì)胞、JHH-7細(xì)胞
SLMT-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)細(xì)胞、SNU1細(xì)胞、BV173細(xì)胞
JIMT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HECV細(xì)胞、OCILY19細(xì)胞、SUPB15細(xì)胞
HSC/mHSC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Embryonic Kidney 293細(xì)胞、Danio rerio Gill細(xì)胞、hESC細(xì)胞
IOSE-29細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LTEP-a-2細(xì)胞、SNU-C2B細(xì)胞、MAntle cell VERona-1細(xì)胞
MDA-134細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CV1細(xì)胞、OACP4C細(xì)胞、LLC細(xì)胞
HIT T15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SuDHL 8細(xì)胞、DH82細(xì)胞、TCMK-1細(xì)胞
MNNG/HOS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2195細(xì)胞、Hs-852-T細(xì)胞、OCI-LY-3細(xì)胞
H-4-II-E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：8505C細(xì)胞、SNUC2A細(xì)胞、U-373-MG細(xì)胞
NTERA-2/D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RM-1細(xì)胞、H-520細(xì)胞、MAVER-1細(xì)胞
C1R細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-293細(xì)胞、UMNSAH-DF1細(xì)胞、NOR 10細(xì)胞
TMD-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：293-FT細(xì)胞、SKNBE-2細(xì)胞、CEM-0細(xì)胞
GOTO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MTC-TT細(xì)胞、OV 1063細(xì)胞、KRC-Y細(xì)胞
Loucy細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hep G2/C3A細(xì)胞、Mc Ardle 7777細(xì)胞、Hs294T細(xì)胞
2780細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：aTC1 Clone 6細(xì)胞、T-47D細(xì)胞、HCC-1428細(xì)胞
COLO-824細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Med 341細(xì)胞、Rat Skin 1細(xì)胞、M1細(xì)胞
H2108細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MES-13細(xì)胞、H-2405細(xì)胞、NCIH69細(xì)胞
NCIH1299細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1650_CO細(xì)胞、JS1細(xì)胞、Swiss 3T6細(xì)胞
SK-ES細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LK 2細(xì)胞、Emory University-3細(xì)胞、U-138 MG細(xì)胞
GDM-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF7-GFP細(xì)胞、B16 melanoma F10細(xì)胞、UWB1289細(xì)胞
HEK293-FT Thawing表達(dá)SV40T抗原人胚腎上皮細(xì)胞系
SW-1222細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SEG1細(xì)胞、GTL 16細(xì)胞、RCK-8細(xì)胞
COLO-320-DM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GEO細(xì)胞、KYSE-520細(xì)胞、SW1353細(xì)胞
Human Embryonic Kidney 293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：My-La 2059細(xì)胞、NKL細(xì)胞、NKL細(xì)胞
BAR-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-293F細(xì)胞、H22-H8D8細(xì)胞、CWR-22rv1細(xì)胞
Y79細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHL-1細(xì)胞、MAVER細(xì)胞、NCI-H211細(xì)胞
AM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFLS-RA細(xì)胞、GLC-15細(xì)胞、HO1N1細(xì)胞
526 mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RTE細(xì)胞、293-EBNA細(xì)胞、Biologics Standards-Cercopithecus-1細(xì)胞
C4-2 Bone metastatic細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-82細(xì)胞、SW-527細(xì)胞、NBL-7細(xì)胞
293 H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RGC5細(xì)胞、NCI-H2291細(xì)胞、H-125細(xì)胞
ChaGo-K-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Michigan Cancer Foundation-7細(xì)胞、LS123細(xì)胞、CAKI1細(xì)胞
RPMI-1788細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1693細(xì)胞、LK2細(xì)胞、SCC-1395細(xì)胞
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