"PC-3 Thawing人前列腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：PC-３源于一位６２歲白人男性IV級(jí)前列腺腺癌患者的骨轉(zhuǎn)移灶；有低水平的酸性酶活性和５-α-睪酮還原酶活性。
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
PC-3 Thawing人前列腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
細(xì)胞接收操作說(shuō)明：請(qǐng)仔細(xì)閱讀本操作說(shuō)明及相應(yīng)的細(xì)胞說(shuō)明書(shū)。本公司細(xì)胞發(fā)貨有四種形式：T２５培養(yǎng)瓶(一般是貼壁細(xì)胞使用，懸浮細(xì)胞也可以)、離心管(懸浮細(xì)胞使用多，當(dāng)然，有些公司也會(huì)用這種離心管形式發(fā)貼壁細(xì)胞，但是，長(zhǎng)期經(jīng)驗(yàn)來(lái)說(shuō)，貼壁細(xì)胞容易發(fā)生形態(tài)變化，估計(jì)是細(xì)胞培養(yǎng)空間狹小，血清不足導(dǎo)致(最主要是怕運(yùn)輸延誤導(dǎo)致這些情況發(fā)生)，個(gè)人不建議用離心管形式發(fā)貼壁細(xì)胞)及干冰(凍存細(xì)胞用，主要是冬天天氣冷，溫度低于４℃的地方，都要考慮凍存細(xì)胞)。T２５培養(yǎng)瓶：是用T２５細(xì)胞培養(yǎng)瓶直接發(fā)貨的形式。收到細(xì)胞后，拆開(kāi)包裝T２５培養(yǎng)瓶的自封袋，不拆封口膜，表面噴７５%酒精消毒后顯微鏡觀察細(xì)胞狀態(tài)(有條件可以拍下此時(shí)細(xì)胞照片)。將細(xì)胞放入３７度培養(yǎng)箱平衡兩小時(shí)以上，再處理細(xì)胞。首先將T２５中培養(yǎng)基取出裝好備用，如細(xì)胞密度高于８０%，可以直接消化傳代，相反則加入５-６ml培養(yǎng)基放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)即可。離心管：是用１５ml離心管發(fā)貨的形式，只用于懸浮細(xì)胞發(fā)貨。收到細(xì)胞后消毒處理及將細(xì)胞放入３７度培養(yǎng)箱平衡兩小時(shí)以上，再處理細(xì)胞。首先將T２５中培養(yǎng)基取出裝好備用(如果實(shí)驗(yàn)室沒(méi)有T２５培養(yǎng)瓶，可以暫時(shí)T７５培養(yǎng)瓶，加入１０-１５ml培養(yǎng)基，建議１０ml培養(yǎng)基，也可以使用T１７５培養(yǎng)瓶，加入５０-６０ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)瓶越大，需要的培養(yǎng)基越多。當(dāng)然如果剛接收到細(xì)胞密度不夠的話，不用大瓶子，先用小瓶子養(yǎng)起來(lái)再換大的，不然會(huì)長(zhǎng)得很慢，嚴(yán)重的，會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞死亡等危險(xiǎn))，平衡完成后，離心(１０００rpm，３min)收集細(xì)胞，棄上清，用新的培養(yǎng)基重懸細(xì)胞并接種至培養(yǎng)瓶或皿中，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。干冰：是用本公司凍存液凍存細(xì)胞后，直接用干冰將凍存的細(xì)胞冷凍發(fā)貨的形式。收到細(xì)胞后按照細(xì)胞復(fù)蘇的步驟操作即可。
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：消化３-５分鐘，１：２,３天內(nèi)可長(zhǎng)滿
細(xì)胞培養(yǎng)更好經(jīng)驗(yàn)詳解：1)收到細(xì)胞，首先要鏡檢：觀察細(xì)胞形態(tài)是否正常，對(duì)于貼壁細(xì)胞則要注意看貼壁情況是否很好，觀察細(xì)胞密度，有疑議及時(shí)咨提供細(xì)胞的技術(shù)人員。 由于運(yùn)輸?shù)臅r(shí)間或者溫度的變化，很多貼壁細(xì)胞在盛滿培養(yǎng)基的瓶子里生長(zhǎng)的狀態(tài)和平時(shí)會(huì)有點(diǎn)不一樣，主要是貼壁牢固問(wèn)題。比如293T，平時(shí)貼壁就不是很牢，在裝滿的培養(yǎng)基瓶子里面，會(huì)發(fā)生大片的脫落，細(xì)胞聚集在一起，但是細(xì)胞生長(zhǎng)還是正常的，通過(guò)離心收集，加以胰酶的消化，重新打散，又可以正常的貼壁生長(zhǎng)。2)當(dāng)通過(guò)上一步的觀察，細(xì)胞初步?jīng)]有問(wèn)題時(shí)，進(jìn)行下一步操作。當(dāng)收到的細(xì)胞密達(dá)到80%左右時(shí)，則處理如下：棄除瓶中大部分培養(yǎng)基，僅保留5到10mL培養(yǎng)所需的常規(guī)培養(yǎng)基；或更換新鮮的培養(yǎng)基，置于培養(yǎng)箱中，隨后每天觀察。 細(xì)胞在低于正常生長(zhǎng)溫度情況下，會(huì)調(diào)整為靜止期，或者慢速生長(zhǎng)期，恢復(fù)37度的環(huán)境至少3個(gè)小時(shí)左右，才能重新調(diào)整到接近對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的狀態(tài)，在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期進(jìn)行細(xì)胞的傳代會(huì)大大增加傳代的成功率，和細(xì)胞的存活率。3)如果經(jīng)步觀察發(fā)現(xiàn)細(xì)胞密度超過(guò)90%，并且細(xì)胞狀態(tài)很好時(shí)，則復(fù)溫后2個(gè)小時(shí)需要立即傳代。傳代的比例應(yīng)依據(jù)不同的細(xì)胞而定。對(duì)于生長(zhǎng)比較快，狀態(tài)穩(wěn)定，不易受外界影響的細(xì)胞可以一次多傳幾瓶；對(duì)于生長(zhǎng)較慢，細(xì)胞比較薄，狀態(tài)容易波動(dòng)的細(xì)胞類型，一次少傳些，每瓶細(xì)胞密度大些，便于穩(wěn)定生長(zhǎng)。至于一些比較陌生的細(xì)胞，次處理也可以依照第二種情況。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
PC-3 Thawing人前列腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng),在軟瓊脂中成簇生長(zhǎng)，并可懸浮生長(zhǎng)
我?？吹揭粋€(gè)比較復(fù)雜的四步消化法，這個(gè)挺有意思，我也是次聽(tīng)說(shuō)，應(yīng)該是網(wǎng)友自己發(fā)展出來(lái)的方法，很有參考價(jià)值。但我估計(jì)這個(gè)方法可能對(duì)付少數(shù)非常怪異的細(xì)胞才需要這么復(fù)雜的程序。我目前養(yǎng)過(guò)的近３００株細(xì)胞里面，還沒(méi)遇到這么怪異的。比如Caco２其實(shí)是很好消化的細(xì)胞，不需要胰酶孵育即可，只是有點(diǎn)成片分布。不要以為成片分布是自己沒(méi)養(yǎng)好，這個(gè)視細(xì)胞而定。如果和標(biāo)準(zhǔn)形態(tài)不一致，那可能是自己沒(méi)消化好導(dǎo)致的，但如果消化方法正確，仍然成片分布，甚至完全吹打成單細(xì)胞懸液，貼壁后仍然成片分布，這是細(xì)胞的特性，是因?yàn)橘N壁過(guò)程中重新聚集了。這個(gè)時(shí)候你拼了命要去讓它均勻分布，你的細(xì)胞之后會(huì)對(duì)你越來(lái)越不好；比較難消化的細(xì)胞(潤(rùn)洗方法５min還不能消化)，就以colon cancer為例，比如HCT１５, LS４１１和KM１２，這樣的細(xì)胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００ mm dish，一次最多加入５００ul，就足夠了，一般我加３００ul。即使這樣難消化的細(xì)胞，一般不超過(guò)５min，即可見(jiàn)細(xì)胞成片移動(dòng)，就應(yīng)該停止消化。一些正常細(xì)胞也會(huì)有難消化的時(shí)候，比如tsDC細(xì)胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙狀移動(dòng)。
細(xì)胞形態(tài)特性：上皮樣
SupB15WT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1944細(xì)胞、IGROV 1細(xì)胞、ME 180細(xì)胞
PNT1/A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1599細(xì)胞、Hs729T細(xì)胞、NRK-49F細(xì)胞
HGBEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEAS-2B細(xì)胞、MGH-U1 (EJ)細(xì)胞、LNCaP C4-2B細(xì)胞
SP2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD1095Sk細(xì)胞、SW 13細(xì)胞、HPB-ALL細(xì)胞
KCL-22細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Central Adrenergic TH-expressing a細(xì)胞、MKN28細(xì)胞、SaOS細(xì)胞
HCEpiC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C2BBe1細(xì)胞、Meat Animal Research Center-145細(xì)胞、RFL-6細(xì)胞
OVCAR.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vero C1008細(xì)胞、SKNEP1細(xì)胞、Madin Darby Canine Kidney細(xì)胞
RSC-96細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKRC-52細(xì)胞、769-P細(xì)胞、SUM 52PE細(xì)胞
H-1703細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Porcine Kidney-13細(xì)胞、IOSE 80細(xì)胞、U343MG細(xì)胞
SUIT-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：K1735細(xì)胞、GalK 1細(xì)胞、HLCL9B10細(xì)胞
FBHE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1781細(xì)胞、A2780/CP細(xì)胞、MHCC97L細(xì)胞
EU-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC0203細(xì)胞、Vero 76細(xì)胞、DHL-5細(xì)胞
OVCA432_Bast細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-A549細(xì)胞、130-T細(xì)胞、SW-1271細(xì)胞
HHUA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U266BL細(xì)胞、Hs-578Bst細(xì)胞、NK92-MI細(xì)胞
MB468細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pt-K2細(xì)胞、LS 513細(xì)胞、MDA MB 361細(xì)胞
EBC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc 04.03細(xì)胞、WEHI-164細(xì)胞、Lu-165細(xì)胞
TGBC11T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Co 205細(xì)胞、CLONE M3細(xì)胞、CMT167細(xì)胞
SUM102細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CPAE細(xì)胞、GS9L細(xì)胞、H2.35細(xì)胞
U251MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：3AO細(xì)胞、Cattle chondrocytes細(xì)胞、MCF10A細(xì)胞
H1417細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jiyoye細(xì)胞、GM03671C細(xì)胞、GM2131細(xì)胞
Ra #1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-10細(xì)胞、MDAMB157細(xì)胞、H-1781細(xì)胞
Ra #1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-10細(xì)胞、MDAMB157細(xì)胞、H-1781細(xì)胞
RH7777細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KALS-1細(xì)胞、HCC-827細(xì)胞、NCI-128細(xì)胞
3T3-L1 ad細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：D-283 Med細(xì)胞、Hs 819.T細(xì)胞、H2009細(xì)胞
LoVo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE 270細(xì)胞、SNU878細(xì)胞、NCI-H1105細(xì)胞
Natural Killer-92細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BrCL15細(xì)胞、BEL7405細(xì)胞、H-865細(xì)胞
PC-3 Thawing人前列腺癌細(xì)胞系
VeroE6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HANK細(xì)胞、SF 767細(xì)胞、A-20細(xì)胞
HEC-151細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HepG2-luc細(xì)胞、H358細(xì)胞、T2 (174 x CEM.T2)細(xì)胞
H125細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLM16細(xì)胞、LLC-WRC 256細(xì)胞、RPPVEC細(xì)胞
D341 Med細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A172細(xì)胞、ZR-75-30細(xì)胞、Doubling time: ~50 hours (ATCC).細(xì)胞
DanG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：207細(xì)胞、TGW細(xì)胞、T2(174 x CEM.T2)細(xì)胞
MILE SVEN1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3-A31細(xì)胞、HuH7細(xì)胞、IFRS1細(xì)胞
CHO/dhFr-細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDBK細(xì)胞、NOK細(xì)胞、HT 115細(xì)胞
DV90細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SRA01/04 (HLE)細(xì)胞、RenCa細(xì)胞、373 MG細(xì)胞
OCILY-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 888Lu細(xì)胞、Walker/LLC-WRC256細(xì)胞、P3X63 Ag8.653細(xì)胞
Hs611T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16-F0細(xì)胞、MFD-1細(xì)胞、NCIH1385細(xì)胞
SW-1463細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HO1-N-1細(xì)胞、MCF.7細(xì)胞、BEAS2B細(xì)胞
Rat-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMS18細(xì)胞、Kit225-K6細(xì)胞、526細(xì)胞
NCIH1755細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FET細(xì)胞、RGM-1細(xì)胞、MILE SVEN1細(xì)胞
SK-MES1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：G519細(xì)胞、MCF7-CTRL細(xì)胞、MB468細(xì)胞
NCI-SNU-886細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SJSA-1細(xì)胞、MGC-803細(xì)胞、R 2 C細(xì)胞
VP229細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-1222細(xì)胞、HUT 226細(xì)胞、OCM-1A細(xì)胞
GM02131A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16/F10細(xì)胞、PLC-8024細(xì)胞、MDA MB 453細(xì)胞
H847細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FRO細(xì)胞、Huh 7.5.1細(xì)胞、PE/CA-PJ34 (clone C12)細(xì)胞
SK.OV.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HME1細(xì)胞、NUGC2細(xì)胞、Emory University-2細(xì)胞
SK.MEL.28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1770細(xì)胞、U-251細(xì)胞、Z138細(xì)胞
HGC-27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FLS細(xì)胞、H510細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 7951細(xì)胞
H-1573細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUCEC細(xì)胞、RCSMC細(xì)胞、SkChA-1細(xì)胞
MXI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Earles's cells細(xì)胞、HET-1A細(xì)胞、HepG2-luc細(xì)胞
HEP-3B2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CNE-2Z細(xì)胞、OCLY8細(xì)胞、KMM-1細(xì)胞
CWR22R細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EAhy926細(xì)胞、A72細(xì)胞、SK_N_BE2C細(xì)胞
RPMI7666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MFD-1細(xì)胞、EFM192C細(xì)胞、Panc_05_04細(xì)胞
MARC 145細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CoCL2細(xì)胞、CP70細(xì)胞、T-T細(xì)胞
Human podocyte細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L(TK-)細(xì)胞、ECC12細(xì)胞、Daoy細(xì)胞
SW-48細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 16細(xì)胞、H-2030細(xì)胞、B16 F1細(xì)胞
HCC1954-BL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-A細(xì)胞、SK-MEL-3細(xì)胞、MyLa 2059細(xì)胞
SJ-Rh 30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LLC PK1細(xì)胞、H716細(xì)胞、RKN細(xì)胞
C3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TCC-SUP細(xì)胞、GAK細(xì)胞、CII細(xì)胞
NBL-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NPC-039細(xì)胞、Farage Original Line細(xì)胞、EFM192B細(xì)胞
PC-3 Thawing人前列腺癌細(xì)胞系
OCI-Ly18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC9724細(xì)胞、C-643細(xì)胞、LoVo細(xì)胞
NCI-H676B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：J82細(xì)胞、CPAE細(xì)胞、A-427細(xì)胞
HPaSteC(HPSC)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C3H-10T1/2細(xì)胞、MyLa 2059細(xì)胞、HEL-92細(xì)胞
HCC2185細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEL-7402細(xì)胞、CCD-33Co細(xì)胞、B16/F0細(xì)胞
CAL-62細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：mRMEC細(xì)胞、KYSE180細(xì)胞、HS766T細(xì)胞
HLE B-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：M.D. Anderson-Prostate Cancer-2b細(xì)胞、Ly1細(xì)胞、CZ-1細(xì)胞
B16-F10--RED細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3(A31)細(xì)胞、RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma]細(xì)胞、HO-8910PM細(xì)胞
MEC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPAF-I細(xì)胞、HCC-2935細(xì)胞、NCI-H889細(xì)胞
H1373細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Opossum Kidney細(xì)胞、SUP-T1細(xì)胞、JEKO細(xì)胞
HAVSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC95細(xì)胞、P3/NS1/1-Ag4-1細(xì)胞、Colon-38細(xì)胞
CHL-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U373 MG細(xì)胞、Chang Cells細(xì)胞、HC11 Mammary Epithelium細(xì)胞
"