"IMR-32 Thawing人神經(jīng)母細胞瘤細胞系
細胞背景資料:該細胞是1967年4月由NicholsWW,LeeJ和DwightS建立,來源于一名13月齡白人男嬰腹部腫塊,臨床診斷為神經(jīng)母細胞瘤,伴有極少部位的類器官樣分化。
細胞形態(tài):上皮細胞樣
IMR-32 Thawing人神經(jīng)母細胞瘤細胞系
細胞生長:貼壁
接收細胞相關問題:如不能在收到細胞后及時操作細胞,T25及離心管發(fā)貨的細胞將可以消毒后在37度過夜,血清發(fā)貨的細胞在室溫下靜置1-2天(注意不要放冰箱),干冰發(fā)貨的可以在確認干冰未完全升華時將細胞直接放回液氮或者-80度冰箱,若干冰完全升華,請即刻復蘇細胞。T25瓶及離心管在培養(yǎng)箱平衡是為了讓細胞盡快適應培養(yǎng)箱環(huán)境,同時使部分因運輸導致脫落的細胞貼壁,此步驟非常必要。T25瓶如果在顯微鏡下可以看到部分不貼壁的細胞,可以收集上清后離心(1200rpm,5min)后,將沉淀用新的培養(yǎng)基重懸后接種至新的培養(yǎng)瓶或皿中。部分細胞在運輸過程中,由于不斷震蕩及環(huán)境不適,可能導致細胞破碎死亡,從而使培養(yǎng)基中漂浮很多細胞碎片及顆粒狀物質(zhì)。這種情況下,平衡后,貼壁細胞用PBS洗兩遍再加新的培養(yǎng)基培養(yǎng)或者傳代至新瓶中培養(yǎng)即可;懸浮細胞可以離心(1000rpm,3min)收集細胞,并用PBS重懸后再離心一次,再用新的培養(yǎng)基重懸并接種細胞。
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2傳代
在細胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題,客戶遇到的問題從細胞生長角度來說,針對細胞培養(yǎng)過程中生長不好、甚至死亡的原因,我們做以下分析并提出相對應的解決方法。一、培養(yǎng)細胞生長不好》可能原因:細胞本身的狀態(tài)》1)細胞傳代次數(shù)多,細胞老化;2)細胞的接種量:接種量過低,細胞生長緩慢;3)細胞傳代時間過晚:細胞中毒,影響傳代后的細胞生長;4)胰酶消化時間過長或過短:時間過長,細胞死亡;時間過短,細胞未完全分離而成團,細胞死亡;5)細胞的凍存與復蘇:慢凍速融。污染:1)支原體污染;2)霉菌污染;培養(yǎng)基或血清:1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進行驗證;2)選擇的培養(yǎng)基是否合適;3)培養(yǎng)基配制是否準確無誤;培養(yǎng)環(huán)境:1)CO2供應是否正常;2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確;解決方法:根據(jù)以上四個方面的可能原因,做出針對性的解決方案》1)注意細胞的本身狀態(tài):如傳代次數(shù)、接種量等;2)避免產(chǎn)生污染(用正規(guī)、合法、可溯源的血清);3)要用合適的血清或培養(yǎng)基,經(jīng)過驗證;4)注意實驗室的環(huán)境;二、培養(yǎng)細胞死亡》可能原因:1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2;2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動太大;3)細胞凍存或復蘇過程中損傷;4)培養(yǎng)液滲透壓不正確;5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積;解決方法:1)檢測培養(yǎng)箱內(nèi)CO2;2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度;3)取新的保存細胞種;4)檢測培養(yǎng)液滲透壓;5)換入新鮮培養(yǎng)液。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
IMR-32 Thawing人神經(jīng)母細胞瘤細胞系
細胞生長特性:貼壁生長
細胞凍存知識普及:細胞凍存是細胞保存的主要方法之一。利用凍存技術將細胞置于-196℃液氮中低溫保存,可以使細胞暫時脫離生長狀態(tài)而將其細胞特性保存起來,這樣在需要的時候再復蘇細胞用于實驗。而且適度地保存一定量的細胞,可以防止因正在培養(yǎng)的細胞被污染或其他意外事件而使細胞丟種,起到了細胞保種的作用。除此之外,還可以利用細胞凍存的形式來購買、寄贈、交換和運送某些細胞。細胞凍存時向培養(yǎng)基中加入保護劑--終濃度5%.15%的甘油或二甲基亞砜(DMSO),可使溶液冰點降低,加之在緩慢凍結條件下,細胞內(nèi)水分透出,減少了冰晶形成,從而避免細胞損傷。 采用""慢凍快融""的方法能較好地保證細胞存活。標準冷凍速度開始為-1到-2℃/min,當溫度低于-25℃時可加速,到-80℃之后可直接投入液氮內(nèi)(-196℃)。
細胞形態(tài)特性:存在兩種細胞類型,小的神經(jīng)母細胞樣細胞和大的透明成纖維樣細胞
PC 61-5-3細胞系相關產(chǎn)品:GM637細胞、NIH-3T3細胞、BNL.CL2細胞
SF 295細胞系相關產(chǎn)品:MDA-MB 453細胞、SW-1116細胞、HuP-T3細胞
SCC154細胞系相關產(chǎn)品:Plaepi 34細胞、VM-CUB1細胞、BHT101細胞
Hs746T細胞系相關產(chǎn)品:CEMC1細胞、TE-6細胞、U-87細胞
Mv.1.Lu細胞系相關產(chǎn)品:YAC細胞、BC-027細胞、LICCF細胞
KP4細胞系相關產(chǎn)品:NS653細胞、F9細胞、VP229細胞
AKR細胞系相關產(chǎn)品:PA-TU S細胞、RS 4;11細胞、184A1細胞
MUS-M1細胞系相關產(chǎn)品:KE-37細胞、PCI-4M細胞、BNCL2細胞
OVCA433_Bast細胞系相關產(chǎn)品:AE 1201細胞、Bat lung細胞、T1-73細胞
Med 341細胞系相關產(chǎn)品:373MG細胞、HG2855細胞、U-87 MG細胞
SUM-159細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H1341細胞、HS5細胞、JurkatE6-1細胞
HTh 74細胞系相關產(chǎn)品:MDA-MB-415細胞、GM00637細胞、IOSE-Mar細胞
MKN28細胞系相關產(chǎn)品:TOV112細胞、D324細胞、SKLU1細胞
NPA-87細胞系相關產(chǎn)品:RC92A細胞、H-4細胞、SUPT-1細胞
KGN細胞系相關產(chǎn)品:SO-RB50細胞、WM 2664細胞、SMMC 7721細胞
THLE-2細胞系相關產(chǎn)品:TALL-1 [Human adult T-ALL]細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-468細胞、MV411細胞
LWnt-3A細胞系相關產(chǎn)品:A549 ATCC細胞、Epstein-Barr-3細胞、DMS 114細胞
HPF細胞系相關產(chǎn)品:2B4-L細胞、SVHUC細胞、Hepatoma-22細胞
COLO 824細胞系相關產(chǎn)品:KY-270細胞、NP-69細胞、HEK293-EBNA細胞
BALL-1細胞系相關產(chǎn)品:HepG2細胞、SACC-LM細胞、LCLC-103H細胞
LA-N-1細胞系相關產(chǎn)品:HOP-62細胞、B16F10細胞、CHG-5細胞
LA-N-1細胞系相關產(chǎn)品:HOP-62細胞、B16F10細胞、CHG-5細胞
P3/NS-1細胞系相關產(chǎn)品:3LL細胞、SUM-102PT細胞、IPLB-Sf21細胞
P3-Jiyoye細胞系相關產(chǎn)品:M-NFS-60細胞、SHZ-88細胞、SK-RC-39細胞
HCC-95細胞系相關產(chǎn)品:Kit-225細胞、HDQ-P1細胞、DMS-273細胞
NCM-460細胞系相關產(chǎn)品:H-2227細胞、H-220細胞、Roswell Park Memorial Institute 8226細胞
IMR-32 Thawing人神經(jīng)母細胞瘤細胞系
CWR22-R1細胞系相關產(chǎn)品:Bat lung細胞、MCF-7B細胞、LS-411細胞
SCL-I細胞系相關產(chǎn)品:WM-266-4細胞、UCLA-SO-M20細胞、NCI-H647細胞
KYSE-520細胞系相關產(chǎn)品:Bx-PC3細胞、S180細胞、H35細胞
Swiss/3T3細胞系相關產(chǎn)品:Human Fetal Thymocyte-8810細胞、LL/2 (LLC1)細胞、NCI-H2085細胞
Madison lung細胞系相關產(chǎn)品:WEHI-279細胞、CFPAC-1細胞、K 562細胞
MGH-U3細胞系相關產(chǎn)品:RC-K8細胞、AR4-2J細胞、PANC1005細胞
T/GHA-VSMC細胞系相關產(chǎn)品:SGC-7901細胞、NCIH441細胞、KOSC2細胞
697細胞系相關產(chǎn)品:NUGC3細胞、CCD 841 CoN細胞、NCI-H841細胞
NRK clone 52E細胞系相關產(chǎn)品:PBL細胞、ARO81細胞、NIH:OVCAR-5細胞
NSH細胞系相關產(chǎn)品:THC-8307細胞、LA-N-6細胞、HEK 293 EBNA細胞
SKMEL2細胞系相關產(chǎn)品:Tca-83細胞、SW1353細胞、GM04679細胞
TK-1細胞系相關產(chǎn)品:TM3細胞、PC-3M細胞、GLC-15細胞
D-283MED細胞系相關產(chǎn)品:293 Ad5細胞、KMS-18細胞、P3-NS1/1-Ag4-1細胞
T241細胞系相關產(chǎn)品:JeKo 1細胞、VMCUB1細胞、MRC5細胞
TB-1 Lu細胞系相關產(chǎn)品:Jurkat細胞、b.End3細胞、D341MD細胞
HuT 102細胞系相關產(chǎn)品:CAKI 1細胞、GM15452細胞、SW954細胞
TOV112細胞系相關產(chǎn)品:SKHEP-1細胞、DU145細胞、Hs683細胞
HCC2218細胞系相關產(chǎn)品:Hs 819.T細胞、rHSC-99細胞、HCC-78細胞
CP70細胞系相關產(chǎn)品:HUTU80細胞、HEL-92-1-7細胞、NCI-N87細胞
Hs737T細胞系相關產(chǎn)品:KLN 205細胞、MDAMB468細胞、HA細胞
H1581細胞系相關產(chǎn)品:HSC-6細胞、L 132細胞、SPDC-CCL141細胞
GCT細胞系相關產(chǎn)品:BRL-3A細胞、M1細胞、EFM-192B細胞
NCIH2107細胞系相關產(chǎn)品:H295R細胞、CD-18細胞、Hs 822.T細胞
HUV-EC-C細胞系相關產(chǎn)品:B16/F0細胞、H1184細胞、H2444細胞
MM-1S細胞系相關產(chǎn)品:C12細胞、Human Embryonic Skin細胞、G 292 Clone A 141B1細胞
Hs1.Tes細胞系相關產(chǎn)品:hCMEC/D3細胞、UT7細胞、RPTEC/TERT 1細胞
THP-1細胞系相關產(chǎn)品:OVCAR420細胞、P388-D1細胞、High Five細胞
HEK 293FT細胞系相關產(chǎn)品:CBRH7919細胞、HBE細胞、IAR 20細胞
108CC15細胞系相關產(chǎn)品:OAW 42細胞、BHP10-3細胞、RT 112細胞
SW-626細胞系相關產(chǎn)品:Malme-3 M細胞、TALL 1細胞、SK-N-BE(2)細胞
HAPI細胞系相關產(chǎn)品:ARO細胞、H1944細胞、NCIH2227細胞
hEM15A細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H2591細胞、U-251_MG細胞、M-14細胞
MV 3細胞系相關產(chǎn)品:MDAMB361細胞、UCLA SO M21細胞、Stanford University Pediatric T-cell line 1細胞
IMR-32 Thawing人神經(jīng)母細胞瘤細胞系
EBTr細胞系相關產(chǎn)品:RWPE2細胞、SNU869細胞、TSU-Pr1細胞
NEC細胞系相關產(chǎn)品:U14細胞、H1355細胞、Clone M-3細胞
AE1201細胞系相關產(chǎn)品:COLO 357細胞、WM-266-mel細胞、MM1S細胞
PMVEC細胞系相關產(chǎn)品:BC3H1細胞、FM-88細胞、RMS1598細胞
BA/F3細胞系相關產(chǎn)品:DSL-6A-C1細胞、HEP-3B2細胞、MDA-MB468細胞
MDA-MB-157細胞系相關產(chǎn)品:A 172細胞、KGN細胞、LOUNH91細胞
Tb 1 Lu (NBL-12)細胞系相關產(chǎn)品:VMM-5A細胞、SU-DHL-2細胞、RASMCs細胞
CL11細胞系相關產(chǎn)品:HuH6細胞、P3-X63.Ag8.653細胞、HL7702細胞
PANC0327細胞系相關產(chǎn)品:3T3 L1細胞、EU-2細胞、Granta-519細胞
SKNBE細胞系相關產(chǎn)品:PZ-HPV-7細胞、L-132細胞、H-446細胞
RIN m5F細胞系相關產(chǎn)品:H-2141細胞、ROS-17/2.8細胞、SF 295細胞
"