"NK-92 Suspended人惡性非霍奇金淋巴瘤患者NK細胞系
細胞背景資料：NK細胞；淋巴瘤；男性
細胞形態(tài)：淋巴母細胞樣
傳代24h-48h處于對數(shù)期的細胞，在凍存前24h換液；按照常規(guī)方法消化，離心，收集細胞沉淀；用血清重懸細胞沉淀，用血球計數(shù)板或者細胞計數(shù)儀進行細胞計數(shù)；配制細胞凍存液，將凍存液加到細胞液中，吹打混勻，控制細胞密度為2×10(6)-5×10(6)/ml；將細胞懸液按照1ml/支分裝至已標記好的凍存管中，旋緊管蓋；將凍存管放入程序凍存盒中，凍存盒立即移至-80°C冰箱中，過夜后將凍存細胞移至液氮中長期保存。凍存管內(nèi)細胞數(shù)目一般不低于2x10(6)cells/ml/vial，融合瘤細胞則以5x10(6)cells/ml/vial為宜。細胞凍存和復(fù)蘇遵循“慢凍快溶”的原則。取出冷凍管后，須立即放入37°C水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其在1分鐘內(nèi)全部融化，并注意水面不可超過冷凍管蓋沿，否則易發(fā)生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時，必須注意安全，預(yù)防冷凍管之爆裂。細胞凍存時細胞狀態(tài)不佳，會嚴重影響復(fù)蘇時細胞的活率。一般選擇處于對數(shù)生長期的細胞進行凍存，凍存前一天細胞進行換液；消化過度也會嚴重影響細胞凍存后復(fù)蘇的活率；凍存細胞時為按照溫度梯度進行操作，會嚴重影響細胞活率。
細胞生長：懸浮
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
NK-92 Suspended人惡性非霍奇金淋巴瘤患者NK細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代培養(yǎng)的胰酶消化法：傳代培養(yǎng)：是指細胞從一個培養(yǎng)瓶以１：２或１：２以上的比例轉(zhuǎn)移，接種到另一培養(yǎng)瓶的培養(yǎng)。傳代細胞，可根據(jù)不同細胞采取不同的方法進行細胞傳代。貼壁生長的細胞用消化法傳代，部分貼壁的細胞用直接吹打或用硅膠軟刮的刮除法傳代。懸浮細胞可采用加入等量新鮮培養(yǎng)基后直接吹打分散進行傳代，或用自然沉降法加入新培養(yǎng)基后再吹打分散進行傳代。實驗步驟：①入無菌室之前用肥皂洗手，再用７５% 的酒精擦拭消毒雙手；②倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài)，確定細胞是否傳代及細胞需要稀釋的倍數(shù)。將培養(yǎng)用液３７℃下預(yù)熱；③超凈臺臺面應(yīng)整潔，用７５%酒精棉球擦拭清潔；④打開超凈工作臺的紫外燈照射臺面２０min左右，關(guān)閉紫外燈，打開風機清潔空氣除去臭氧；⑤點燃酒精燈;取出無菌試管，巴士德吸管和刻度吸管;安上橡皮頭;過酒精燈火焰略燒后插在無菌試管內(nèi)；⑥將培養(yǎng)用液瓶口用７５%酒精消毒，過酒精燈火焰后斜置于酒精燈旁的架子上；⑦倒掉培養(yǎng)細胞的舊培養(yǎng)基。酌情可用２-３ml Hanks液洗去殘留的就培養(yǎng)基，或用少量胰酶涮洗一下；⑧每個大培養(yǎng)瓶加入１ml胰酶，小培養(yǎng)瓶用量酌減，蓋好瓶蓋后在倒置顯微鏡下觀察。當細胞收回突起變圓時立即翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶，使細胞脫離胰酶，然后將胰酶倒掉。注意勿使細胞提早脫落入消化液中；⑨加入少量的含血清的新鮮培養(yǎng)基，反復(fù)吹打消化好的細胞使其脫壁并分散，再根據(jù)分傳瓶數(shù)補加一定量的含血清的新鮮培養(yǎng)基(７-１０ml/大瓶;３-５ml/小瓶)制成細胞懸液，然后分裝到新培養(yǎng)瓶中。蓋好瓶蓋，適度擰緊后稍回轉(zhuǎn)，以利于CO２的進入，將培養(yǎng)瓶放回CO２培養(yǎng)箱；⑩對懸浮培養(yǎng)細胞，步驟７-９不做。直接將細胞懸液進行離心去除舊培養(yǎng)基上清，加入新鮮培養(yǎng)基，然后分裝到各瓶中。
MOLM-14細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-643細胞、OCI-Ly07細胞、PANC0203細胞
CAL 85-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Intestinal Epithelioid Cell line No. 18細胞、HIBEpiC細胞、SCC-7細胞
Jurkat clone A3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LL/2 (LLC1)細胞、RTMC細胞、RIN m5F細胞
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
NCIH2135細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MES-SA-Dx5細胞、OE-21細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-468細胞
LC-2-Ad細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKRC 39細胞、HLFa細胞、WB-F344細胞
Caco-2 BBe細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI 6666細胞、Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a細胞、Colo-678細胞
細胞生長特性：懸浮
NK-92 Suspended人惡性非霍奇金淋巴瘤患者NK細胞系
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
養(yǎng)科研細胞是生物醫(yī)學(xué)研究的基本功。有三個小經(jīng)驗可以和大家分享一下：１)不要燒瓶口。大多數(shù)人都喜歡在酒精燈的火焰上關(guān)瓶子，覺得這樣可以避免污染。不知道大家是不是有培養(yǎng)基怎么越用越發(fā)紫的困惑？知道為什么嗎？燒瓶口燒的。培養(yǎng)基一般都是用碳酸/碳酸跟作緩沖體系。瓶口在火焰上的時候，熾熱的空氣進入瓶內(nèi)。塞緊塞子放入冰箱后，空氣變冷，壓力驟降，培養(yǎng)基中的碳酸就會轉(zhuǎn)化成二氧化碳，釋放出來。培養(yǎng)基中的碳酸少了，當然會變堿。如果不燒瓶口的話，你會發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)液變堿的速度會大大減慢。(當然多多少少還是會有一點越用越堿，因為室溫還是比冰箱內(nèi)的溫度高)，其實燒瓶口防止污染純粹是心理安慰。不妨試一下把手指在火上晃幾下，你會發(fā)現(xiàn)根本就不會燒疼。如果有細菌的話，這么晃兩下也燒不死多少。要想燒死全部細菌，除非把瓶口和塞子燒紅。我在國內(nèi)從來就不燒瓶口。來以后發(fā)現(xiàn)這里更徹底，超凈臺內(nèi)根本就不點酒精燈；２)不要頻繁看細胞。對于初學(xué)者而言，養(yǎng)細胞就像養(yǎng)孩子一樣，有空就要去看看。細胞越是養(yǎng)不好，就越是經(jīng)常去看。實際上看細胞對細胞的生長沒有任何好處，特別是對原代細胞或是免疫磁珠分選后，密度特別低的細胞。培養(yǎng)基中的生長因子是非常有限的。細胞好不容易自分泌一點兒促生長的因子在其周圍，形成有利于生長的局部環(huán)境。你跑去看細胞，培養(yǎng)瓶這么一晃，把因子都給晃散了。經(jīng)?？梢钥吹叫率忠惶斓酵矶荚诳醇毎?，細胞老是長不好。老手細胞一扔好幾天不管，細胞瘋長；３)不要怕消化。在傳代的時候，初學(xué)者往往生怕細胞消化過度，早早地終止消化。細胞沒下來就使勁吹燈，吹得滿瓶子都是氣泡。在我看來，用力吹打?qū)毎膿p傷比消化更大。我?guī)熜衷谧鲅芷交≡臅r候，３７度消化過夜，細胞也沒事。我一般是等細胞完全變圓后才中止消化。細胞輕輕一晃就能下來。還有，動作要輕柔，盡量不要產(chǎn)生氣泡。氣泡在破裂時的機械應(yīng)力相當大，對細胞的傷害也是很大的。
KRC-Y細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Foreskin Fibroblast細胞、EAC細胞、Y3M細胞
AU-565細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LCLC-103H細胞、Clone 166細胞、Panc04.03細胞
CEM clone 7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NKM-1細胞、BTI-TN5B1-4細胞、SW-620細胞
HFF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MAEC細胞、HuH 6細胞、P3.653細胞
VMRCLCD細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-5178-Y-R細胞、PaTu-8988s細胞、Astrocyte type I clone細胞
T2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-38細胞、Mel-624細胞、Hs-695-T細胞
NCI.H460細胞系相關(guān)產(chǎn)品：THP-1(ATCC)細胞、P3J HR-1細胞、NS-I/1細胞
SW 626細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LC-1/sq細胞、HK-2 [Human kidney]細胞、159 PT細胞
CT26.WT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1341細胞、SCC-25細胞、SN-12C細胞
NCI-H661細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-231細胞、NCI H295R細胞、RetroPack PT67細胞
Centre Antoine Lacassagne-51細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LWnt-3A細胞、HT 1197.T細胞、SRA01/04細胞
SUM-190細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1355細胞、FL62891細胞、Oka-C1細胞
ONS76細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TCam 2細胞、He-La細胞、MG63細胞
NK-92 Suspended人惡性非霍奇金淋巴瘤患者NK細胞系
Epstein-Barr-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HIT T-15細胞、HCC1359細胞、MDCC-MSB-1細胞
HEK (AD293)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WI 38細胞、HT 1197細胞、BAEC細胞
CCC-HEL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF763細胞、MDA.MB.231細胞、WM-266-mel細胞
CCC-HEL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF763細胞、MDA.MB.231細胞、WM-266-mel細胞
NCI-H1581細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ROS1728細胞、NCI-SNU-C2A細胞、GBC-SD細胞
JeKo-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UM2細胞、BCP-1細胞、H1734細胞
HS-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293-F細胞、HEK293細胞、TN5B14細胞
Nthy-ori 3.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CL 1-5細胞、LLC-PK(1)細胞、IPEC1細胞
OCI-LY-18細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ROS17/2.8細胞、MCA38細胞、HCC-9724細胞
HS-68細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1438細胞、CCD-112 CoN細胞、ChaGo-K-1細胞
HCC-1806細胞系相關(guān)產(chǎn)品：D324 Med細胞、RBL 2H3細胞、HCS2/8細胞
HOP92細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF.7細胞、OCI-Ly03細胞、KYSE-270細胞
Soleus clone 8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rat Glomerular Endothelial細胞、HT 1080細胞、OCI-LY-10細胞
Dysplastic Oral Keratinocyte細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ACC2細胞、SK-RC-42細胞、SKMEL1細胞
SNU-449細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2347細胞、PE/CA-PJ34 (clone C12)細胞、TPC1細胞
IPLB-SF 21細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HITT15細胞、RIN Cl-5F細胞、CLL-CII細胞
Balb/c3T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IPLB-SF 21AE細胞、DLM8細胞、BL6細胞
NCI-H508細胞系相關(guān)產(chǎn)品：293-H細胞、NCI660細胞、JVM3細胞
HFF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MAEC細胞、HuH 6細胞、P3.653細胞
HCC2185細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEL-7402細胞、CCD-33Co細胞、B16/F0細胞
He La細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C81-61細胞、EST50細胞、M210B4細胞
CF-PAC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2452細胞、P30/Ohkubo細胞、NCC-IT細胞
IPLB-SF 21細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HITT15細胞、RIN Cl-5F細胞、CLL-CII細胞
OCILY-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HLEB3細胞、SUM149細胞、CV-1細胞
SW839細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RC-2細胞、Kit 225 K6細胞、SNU182細胞
Panc 3.27細胞系相關(guān)產(chǎn)品：J774細胞、P3JHR-1細胞、HS852.T細胞
SUIT-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：K1735細胞、GalK 1細胞、HLCL9B10細胞
OV-90細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3JHR-1細胞、RK-13細胞、OK-WT細胞
LCD細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-520細胞、ISHI細胞、GM12878細胞
HEK-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC0366細胞、SUM-102細胞、Namalva細胞
hMSC-BM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：YT細胞、FAO-1細胞、NCIH1755細胞
SNU-484細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T.T細胞、KTC-1細胞、EBNA293細胞
MCFs細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK (AD293)細胞、PG-4 S+L-細胞、Ramos.G6.C10細胞
Cloudman M3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Dami細胞、Hs600T細胞、H1650細胞
HBZY1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VeroE6細胞、Mac-1細胞、LS 174T細胞
PFSK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI H548細胞、RAW264細胞、SUSM-1細胞
J 774A.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc4.03細胞、SKCol1細胞、KBM-5細胞
Bovine Turbinate細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MARC-145細胞、TCC-PAN2細胞、RPMI-1846細胞
Hs 888.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SPDC-CCL141細胞、LC-MS細胞、TCC-PAN2細胞
Colon-26細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LN 382細胞、PM6細胞、COLO 357細胞
SKNBE2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PGBE1細胞、C26細胞、DHL-2細胞
HS-68細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1438細胞、CCD-112 CoN細胞、ChaGo-K-1細胞
NK-92 Suspended人惡性非霍奇金淋巴瘤患者NK細胞系
16HBE140細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-475細胞、LCLC-103H細胞、BTI-TN5B1-4細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-436細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GLRK 13細胞、EJ1細胞、HTR-8/SVneo細胞
LICR-HN-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MB468細胞、38C-13細胞、Roswell Park Memorial Institute 6666細胞
SNU-638細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hu-P-T4細胞、VeroC1008細胞、Anip[973]細胞
BL6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UO-31細胞、MC-38細胞、NIH:OVCAR-8細胞
IGROV 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HDF-a細胞、NCI-Hut 125細胞、OLN-93細胞
U138細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EJ-1細胞、SW-1353細胞、EC-9706細胞
CAMA-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Microglia Clone 3細胞、PC3M-IE8細胞、WERI細胞
CCC-HHM-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CL40細胞、NCIH2171細胞、CCD19-Lu細胞
NCI-H1869細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS-1034細胞、BGC-823細胞、NCIH1930細胞
RERF-LC-MS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NH6細胞、A-498細胞、NCM356細胞
CEM clone 7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NKM-1細胞、SK-Mel 1細胞、SNU449細胞
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