"HCC-44 Adherent人肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
貼壁細(xì)胞傳代：去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基，T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次；棄PBS，再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細(xì)胞，顯微鏡下觀察，待細(xì)胞變圓，細(xì)胞間隙明顯，部分細(xì)胞剛開(kāi)始脫離瓶壁，加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化，將細(xì)胞小心吹打下來(lái)，1000rpm/min室溫離心5min；棄上清，細(xì)胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細(xì)胞密度而定1:2-1:3，1:3-1:6，1:6-1:8），每T25瓶補(bǔ)足培養(yǎng)基至5-6ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細(xì)胞傳代：一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中，稀釋細(xì)胞濃度即可，若培養(yǎng)液太多時(shí)，將細(xì)胞懸液移入離心管中，1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清，細(xì)胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細(xì)胞密度而定1:4-1:8），每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細(xì)胞趨于成團(tuán)生長(zhǎng)，此時(shí)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好，當(dāng)補(bǔ)液時(shí)，需避免反復(fù)吹打。
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
HCC-44 Adherent人肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
培養(yǎng)細(xì)胞的凍存及復(fù)蘇：細(xì)胞低溫凍存是培養(yǎng)室常規(guī)工作和通用技術(shù)。細(xì)胞凍存在-１９６℃液氮中，儲(chǔ)存時(shí)間幾乎是無(wú)限的。細(xì)胞凍存及復(fù)蘇的原則是慢凍快融?！緝龃婕?xì)胞】１)選對(duì)數(shù)增生期細(xì)胞(證明無(wú)支原體污染)，在凍存前１d換液；２)按常規(guī)方法把培養(yǎng)細(xì)胞制備成懸液，計(jì)數(shù)，使細(xì)胞密度達(dá)５×１０／ml左右密度，離心，去上清；３)加入配制好的凍存液(培養(yǎng)液６.８ml，小牛血清２ml，DMSO １ml，５.６%NaHCO３ ０.１ml)，按與去上清相同的量一滴一滴加入離心管中，然后用吸管輕輕吹打令細(xì)胞重懸。凍存細(xì)胞時(shí)培養(yǎng)液中加入保護(hù)劑１０％二甲基亞砜(DMSO)或甘油，可使冰點(diǎn)降低，使細(xì)胞內(nèi)水分在凍結(jié)前透出細(xì)胞外；４)分裝于無(wú)菌凍存管中，每管加１.５m懸液；５)旋好凍存管并仔細(xì)檢查，一定要蓋緊，做好標(biāo)記；６)凍存：在特殊的儀器或簡(jiǎn)易的液氮容器中，按-１℃／min的速度，在３０～４０min時(shí)間內(nèi)，下降到液氮表面，再停３０min后，直接投入液氮中。要適當(dāng)掌握下降冷凍速度，過(guò)快能影響細(xì)胞內(nèi)水分透出，太慢則促進(jìn)冰晶形成。操作時(shí)應(yīng)戴防護(hù)眼鏡和手套，以免液氮凍傷?！緩?fù)蘇細(xì)胞】１)從罐中取出凍存管；２)迅速放入３６℃～３７℃水浴，不時(shí)搖動(dòng)，使其急速融化，３０～６０s內(nèi)完成；３)凍存管用７０％酒精擦拭消毒后，打開(kāi)蓋子，用吸管將細(xì)胞懸液注入離心管中，再滴加１０ml培養(yǎng)液；４)低速離心(５００～１０００r／min) ５min，去上清后再用培養(yǎng)液洗一次；５)用培養(yǎng)液適當(dāng)稀釋后，裝入培養(yǎng)瓶３７℃培養(yǎng)，次日更換一次培養(yǎng)液后，繼續(xù)培養(yǎng)。以后仍按常規(guī)進(jìn)行培養(yǎng)。凍存細(xì)胞數(shù)量要充分，密度應(yīng)達(dá)到１０／ml，在融后稀釋?zhuān)玻氨稌r(shí)，仍能保持５×１０／ml數(shù)量。
NHLF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：149PT細(xì)胞、A-1847細(xì)胞、Anglne細(xì)胞
MEF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OKAC1細(xì)胞、SNT-8細(xì)胞、C8-D1A細(xì)胞
GB1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 680N細(xì)胞、HL1細(xì)胞、rUCMSCs細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
U-87-MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MFHL-2細(xì)胞、A375細(xì)胞、T98 G細(xì)胞
H1048細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IGROV1細(xì)胞、HT55細(xì)胞、NL20細(xì)胞
FAT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Dunn LM8細(xì)胞、IPLB-SF 21AE細(xì)胞、H1650_CO細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁或懸浮，詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)部分
HCC-44 Adherent人肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)
養(yǎng)科研細(xì)胞是生物醫(yī)學(xué)研究的基本功。有三個(gè)小經(jīng)驗(yàn)可以和大家分享一下：１)不要燒瓶口。大多數(shù)人都喜歡在酒精燈的火焰上關(guān)瓶子，覺(jué)得這樣可以避免污染。不知道大家是不是有培養(yǎng)基怎么越用越發(fā)紫的困惑？知道為什么嗎？燒瓶口燒的。培養(yǎng)基一般都是用碳酸/碳酸跟作緩沖體系。瓶口在火焰上的時(shí)候，熾熱的空氣進(jìn)入瓶?jī)?nèi)。塞緊塞子放入冰箱后，空氣變冷，壓力驟降，培養(yǎng)基中的碳酸就會(huì)轉(zhuǎn)化成二氧化碳，釋放出來(lái)。培養(yǎng)基中的碳酸少了，當(dāng)然會(huì)變堿。如果不燒瓶口的話(huà)，你會(huì)發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)液變堿的速度會(huì)大大減慢。(當(dāng)然多多少少還是會(huì)有一點(diǎn)越用越堿，因?yàn)槭覝剡€是比冰箱內(nèi)的溫度高)，其實(shí)燒瓶口防止污染純粹是心理安慰。不妨試一下把手指在火上晃幾下，你會(huì)發(fā)現(xiàn)根本就不會(huì)燒疼。如果有細(xì)菌的話(huà)，這么晃兩下也燒不死多少。要想燒死全部細(xì)菌，除非把瓶口和塞子燒紅。我在國(guó)內(nèi)從來(lái)就不燒瓶口。來(lái)以后發(fā)現(xiàn)這里更徹底，超凈臺(tái)內(nèi)根本就不點(diǎn)酒精燈；２)不要頻繁看細(xì)胞。對(duì)于初學(xué)者而言，養(yǎng)細(xì)胞就像養(yǎng)孩子一樣，有空就要去看看。細(xì)胞越是養(yǎng)不好，就越是經(jīng)常去看。實(shí)際上看細(xì)胞對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)沒(méi)有任何好處，特別是對(duì)原代細(xì)胞或是免疫磁珠分選后，密度特別低的細(xì)胞。培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)因子是非常有限的。細(xì)胞好不容易自分泌一點(diǎn)兒促生長(zhǎng)的因子在其周?chē)纬捎欣谏L(zhǎng)的局部環(huán)境。你跑去看細(xì)胞，培養(yǎng)瓶這么一晃，把因子都給晃散了。經(jīng)?？梢钥吹叫率忠惶斓酵矶荚诳醇?xì)胞，細(xì)胞老是長(zhǎng)不好。老手細(xì)胞一扔好幾天不管，細(xì)胞瘋長(zhǎng)；３)不要怕消化。在傳代的時(shí)候，初學(xué)者往往生怕細(xì)胞消化過(guò)度，早早地終止消化。細(xì)胞沒(méi)下來(lái)就使勁吹燈，吹得滿(mǎn)瓶子都是氣泡。在我看來(lái)，用力吹打?qū)?xì)胞的損傷比消化更大。我?guī)熜衷谧鲅芷交≡臅r(shí)候，３７度消化過(guò)夜，細(xì)胞也沒(méi)事。我一般是等細(xì)胞完全變圓后才中止消化。細(xì)胞輕輕一晃就能下來(lái)。還有，動(dòng)作要輕柔，盡量不要產(chǎn)生氣泡。氣泡在破裂時(shí)的機(jī)械應(yīng)力相當(dāng)大，對(duì)細(xì)胞的傷害也是很大的。
H-2107細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：rUCMSCs細(xì)胞、HDQP1細(xì)胞、H-1688細(xì)胞
SMC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM07404A細(xì)胞、FRTL5細(xì)胞、Caki-2細(xì)胞
MHCCLM3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC0095細(xì)胞、H2110細(xì)胞、SNU-719細(xì)胞
Hs888 Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NE-4C細(xì)胞、NTERA-2 cl.D1細(xì)胞、Ca9-22細(xì)胞
THLE2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：7860細(xì)胞、SCC90細(xì)胞、SNK-6細(xì)胞
CHL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc-03.27細(xì)胞、MALME.3M細(xì)胞、SUDHL-8細(xì)胞
NCI-SNU-520細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM-159細(xì)胞、H-2029細(xì)胞、NCIH1770細(xì)胞
Rca-B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GT39細(xì)胞、MDA-MB 231細(xì)胞、NCI-H1792細(xì)胞
LM8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ECV 304細(xì)胞、PK-13細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-62細(xì)胞
SEG-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1522細(xì)胞、CNLMG-B5537SKIN細(xì)胞、AR4-2J細(xì)胞
Jurkat FHCRC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC-1395細(xì)胞、KMY1022細(xì)胞、SNK6細(xì)胞
CAL27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA MB 231細(xì)胞、R.K.13細(xì)胞、TO175T細(xì)胞
HEM-L細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Z310細(xì)胞、SU.86.86細(xì)胞、ECC-12細(xì)胞
HCC-44 Adherent人肺癌細(xì)胞系
H650細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：K1細(xì)胞、SK HEP 01細(xì)胞、RLE-6TN細(xì)胞
NCI.H522細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PG-4 (S+L-)細(xì)胞、GM03573A細(xì)胞、NS1-1 Ag4.1細(xì)胞
IGROV-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：G361細(xì)胞、PC-9/GR細(xì)胞、RPE-1細(xì)胞
IGROV-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：G361細(xì)胞、PC-9/GR細(xì)胞、RPE-1細(xì)胞
SKRC-42細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1618細(xì)胞、Ra No. 1細(xì)胞、NK-92MI細(xì)胞
Nb-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C666-1細(xì)胞、SK MEL 5細(xì)胞、CL40細(xì)胞
NGEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Duke University 145細(xì)胞、TCam-2細(xì)胞、SF-763細(xì)胞
LLC-MK2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5細(xì)胞、PC3細(xì)胞、L-M (TK-)細(xì)胞
Panc-3_27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WiDr細(xì)胞、SUIT 2細(xì)胞、PC3M-2B4細(xì)胞
OCI-Ly 19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-HEP-1細(xì)胞、UCLA RO-81-A-1細(xì)胞、J 82細(xì)胞
CCD-1112sk細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Renal Carcinoma細(xì)胞、Vertebral Cancer of the Prostate細(xì)胞、H727細(xì)胞
MEF (CF-1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPDE6c7細(xì)胞、RMG-I細(xì)胞、1301細(xì)胞
U-hth74細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MEL-526細(xì)胞、HuT-78細(xì)胞、P3HR1細(xì)胞
Pro-5 Lec1.3c細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuH28細(xì)胞、VM Cub 1細(xì)胞、HS-294T細(xì)胞
COLO206F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TC7細(xì)胞、INS1細(xì)胞、MonoMac6細(xì)胞
HEK (AD293)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WI 38細(xì)胞、HT 1197細(xì)胞、BAEC細(xì)胞
C918細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BNL CL.2細(xì)胞、HCT-15細(xì)胞、MDA435細(xì)胞
LS-174細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OLN-93細(xì)胞、NCI-H1703細(xì)胞、HCC-2279細(xì)胞
OVCA433細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EC-9706細(xì)胞、JCA-1細(xì)胞、NCI-H2029細(xì)胞
Tn5B1-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-2 [Human pancreatic carcinoma]細(xì)胞、B16/F10細(xì)胞、RCC10RGB細(xì)胞
BT-549細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H719細(xì)胞、Karpas-422細(xì)胞、Dami細(xì)胞
H-1819細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：5637細(xì)胞、SKNDZ細(xì)胞、OCI-Ly3細(xì)胞
NCTC 929細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc02.03細(xì)胞、HPMEC細(xì)胞、S3 HeLa細(xì)胞
VMRC-RCZ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-839細(xì)胞、H-358細(xì)胞、Panc02.03細(xì)胞
HS 445T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA.MB.435細(xì)胞、PK15細(xì)胞、L-cells細(xì)胞
NCI-H1355細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1618細(xì)胞、COLO-1細(xì)胞、T 24細(xì)胞
NT2-D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lewis Lung細(xì)胞、SK-MES細(xì)胞、A253細(xì)胞
H-889細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1930細(xì)胞、NS-I/1細(xì)胞、SCL-1細(xì)胞
Central Adrenergic TH-expressing a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MPC-11細(xì)胞、H-128細(xì)胞、LAPC4細(xì)胞
H2196細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LA-N-6(OAN)細(xì)胞、MC/CAR細(xì)胞、IGR-OV1細(xì)胞
NP69SV40T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC3T3E1細(xì)胞、HOEC細(xì)胞、MGHU1細(xì)胞
CA46細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-69細(xì)胞、C22 (Clara)細(xì)胞、Kasumi-6細(xì)胞
SK-N-BE-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ID8/MOSEC細(xì)胞、BpRc1細(xì)胞、SK-CO-1細(xì)胞
TCCPAN2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HLEC細(xì)胞、QGP-1細(xì)胞、OP9細(xì)胞
L540細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MES-SA/Dx5細(xì)胞、P31 FUJ細(xì)胞、RS(4;11)細(xì)胞
DH-82細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC-03-27細(xì)胞、CMT167細(xì)胞、BC-009細(xì)胞
MILE SVEN 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AN3 CA細(xì)胞、Ha Fe細(xì)胞、GM04154細(xì)胞
HANK1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCA-38細(xì)胞、H-1781細(xì)胞、NCI-H322細(xì)胞
H2009細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF7細(xì)胞、OC-316細(xì)胞、HEK293-H細(xì)胞
U14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IFRS1細(xì)胞、DR2R 1610細(xì)胞、H-1838細(xì)胞
AU-565細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LCLC-103H細(xì)胞、Clone 166細(xì)胞、Panc04.03細(xì)胞
COLO-738細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Roswell Park Memorial Institute 1846細(xì)胞、M3 Clone M-3細(xì)胞、GM05862細(xì)胞
HCC-44 Adherent人肺癌細(xì)胞系
V79-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MM96L細(xì)胞、Capan1細(xì)胞、HEY-A8細(xì)胞
Onda 11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-BE(2)C細(xì)胞、GM02219D細(xì)胞、COLO206細(xì)胞
Ball 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KM-H2細(xì)胞、HMEC1細(xì)胞、GM03569B細(xì)胞
CHL/IU細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-747細(xì)胞、DoTc2細(xì)胞、MOLP8細(xì)胞
SKRC-42細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1618細(xì)胞、Ra No. 1細(xì)胞、NK-92MI細(xì)胞
OVCAR8/ADR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CTLA4 Ig-24細(xì)胞、RBL-2H3細(xì)胞、LN229細(xì)胞
SK.MEL.2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Strain KB細(xì)胞、NIH-3T3-L1細(xì)胞、95-D細(xì)胞
NRCC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Fu97細(xì)胞、8505C細(xì)胞、COLO320HSR細(xì)胞
Kasumi-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI-3B細(xì)胞、HS578細(xì)胞、OVCA 420細(xì)胞
SGC 7901細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-2932細(xì)胞、VK2細(xì)胞、Hs-729-T細(xì)胞
SK RC 52細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCC-10細(xì)胞、HeLa/DDP細(xì)胞、Jurkat Clone E6-1細(xì)胞
MHCCLM3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC0095細(xì)胞、CT26.CL25細(xì)胞、L363細(xì)胞
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