"NW38 Adherent人黑色素瘤細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
貼壁細(xì)胞傳代:去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基,T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次;棄PBS,再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細(xì)胞,顯微鏡下觀察,待細(xì)胞變圓,細(xì)胞間隙明顯,部分細(xì)胞剛開始脫離瓶壁,加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化,將細(xì)胞小心吹打下來,1000rpm/min室溫離心5min;棄上清,細(xì)胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸,按要求分瓶(視細(xì)胞密度而定1:2-1:3,1:3-1:6,1:6-1:8),每T25瓶補(bǔ)足培養(yǎng)基至5-6ml,37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細(xì)胞傳代:一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中,稀釋細(xì)胞濃度即可,若培養(yǎng)液太多時(shí),將細(xì)胞懸液移入離心管中,1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清,細(xì)胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸,按要求分瓶(視細(xì)胞密度而定1:4-1:8),每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml,37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細(xì)胞趨于成團(tuán)生長,此時(shí)細(xì)胞生長狀態(tài)良好,當(dāng)補(bǔ)液時(shí),需避免反復(fù)吹打。
細(xì)胞生長:貼壁
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
NW38 Adherent人黑色素瘤細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)基本操作:①進(jìn)無菌室前要徹底洗手,按規(guī)定穿隔離衣。開始操作前要用75%酒精棉球擦手、擦瓶口和燒灼瓶口。②操作者動作要輕,安裝吸管帽、打開或封閉瓶口等操作應(yīng)在火焰近處并經(jīng)過燒灼進(jìn)行。但要注意,金屬器械不能在火焰中長時(shí)間燒灼,以防退火;燒過的器械要冷卻后才能使用;已吸過培養(yǎng)液的吸管不能再用火焰燒灼,因殘留在吸管內(nèi)的培養(yǎng)液成分如蛋白質(zhì)等燒焦后會產(chǎn)生有害物質(zhì),吸管再用時(shí)會將其帶到培養(yǎng)液中;膠塞、橡皮乳頭及塑料的細(xì)胞培養(yǎng)用品過火焰是也不能時(shí)間太長,以免燒焦產(chǎn)生有毒氣體,危害培養(yǎng)細(xì)胞,同時(shí)塑料細(xì)胞培養(yǎng)用品也會產(chǎn)生變形影響使用。③使用培養(yǎng)液前不宜過早開瓶,開瓶后的培養(yǎng)液應(yīng)保持斜位,避免直立,以防止下落細(xì)菌的污染。不再使用的培養(yǎng)液應(yīng)立即封閉瓶口,培養(yǎng)的細(xì)胞在處理之前勿過早暴露在空氣中。④操作時(shí)盡量不要談話,咳嗽以防止來自唾沫和呼出的氣流所造成的污染。⑤吸取培養(yǎng)液、細(xì)胞懸液時(shí),應(yīng)專管專用,一旦發(fā)現(xiàn)吸管口接觸了手和其他污染物品應(yīng)棄去,以防止污染擴(kuò)大或造成培養(yǎng)物之間的交叉污染。⑥操作完畢后應(yīng)整理好工作臺面,用消毒水浸泡的紗布擦拭臺面;防止細(xì)胞交叉污染:所有從別處轉(zhuǎn)來的或是自己所建的細(xì)胞系都要早期留有的充足的凍存儲備,一旦懷疑發(fā)生交叉污染,可做細(xì)胞遺傳學(xué)方面的鑒定,如發(fā)現(xiàn)原有的細(xì)胞遺傳物發(fā)生改變,可以復(fù)蘇早期凍存的細(xì)胞使用。重要細(xì)胞系的傳代工作應(yīng)由兩人獨(dú)立進(jìn)行;無菌室的徹底消毒①新潔爾滅全面徹底擦洗無菌室。使用前應(yīng)稀釋即配即用。新潔爾滅和酒精相比,的優(yōu)點(diǎn)是便宜,而且可以稀釋50倍用,而同樣量的酒精價(jià)格可能是新潔爾滅的幾十倍。②甲醛熏蒸法:甲醛是一種廣譜滅菌劑菌,其水溶液和氣體對各種細(xì)菌、芽孢及真菌等微生物均有殺滅作用。甲醛價(jià)廉,熏蒸消毒時(shí)不損壞衣服、家具、皮革、橡膠等。市售的甲醛水溶液中一般含37-40%的甲醛。
C2-C12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AQ-Mel細(xì)胞、WEHI3細(xì)胞、KYSE-450細(xì)胞
IOSE80UBC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBL1細(xì)胞、SW 962細(xì)胞、NCIH2141細(xì)胞
PL12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:16HBE140細(xì)胞、PA-TU-8988S細(xì)胞、HIBEpiC細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
CFPAC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH524細(xì)胞、HEL9217細(xì)胞、DMS-153細(xì)胞
MDAMB415細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:293F細(xì)胞、SCL-I細(xì)胞、MDA436細(xì)胞
BNL.CL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TFK-1細(xì)胞、MA-104細(xì)胞、NCIH244細(xì)胞
細(xì)胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細(xì)胞說明書部分
NW38 Adherent人黑色素瘤細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書
細(xì)胞培養(yǎng)常見問題及解決方案:1)培養(yǎng)瓶有破裂,培養(yǎng)液有漏液:細(xì)胞極大可能會污染,所以我們會及時(shí)安排幫老師解決;2)細(xì)胞漂?。号囵B(yǎng)瓶不開封,瓶口酒精擦拭后平躺放置在培養(yǎng)箱。次日觀察,如細(xì)胞大部分又貼回瓶底,表明細(xì)胞活力正常,剩余漂浮的細(xì)胞可以離心去掉,留10ml培養(yǎng)液培養(yǎng)觀察,細(xì)胞生長至匯合度80%,進(jìn)行消化傳代;如細(xì)胞還是不貼壁,將細(xì)胞離心收集轉(zhuǎn)到新培養(yǎng)瓶,原培養(yǎng)瓶加部分培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng),中間注意觀察,我們的技術(shù)人員會一直跟蹤指導(dǎo),直到問題解決;3)對于生長緩慢的貼壁細(xì)胞:可采用適當(dāng)?shù)奶岣吲囵B(yǎng)基中血清濃度,或隔日換液的方法來保證細(xì)胞的狀態(tài)和生長速度;4)對于生長不均的貼壁細(xì)胞:在培養(yǎng)過程中若出現(xiàn)細(xì)胞分布明顯不均時(shí)(即某一區(qū)域細(xì)胞已重疊生長,而旁邊則為一塊空白),此時(shí)可將細(xì)胞進(jìn)行消化,重新打散,貼壁,加入新培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。
293-EBNA1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NS-1-Ag4-1細(xì)胞、RAW264.7細(xì)胞、Blotchy fibroblast-11細(xì)胞
NCIH128細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC3T3, E1 subgroup-4 clone細(xì)胞、EBTr (NBL-4)細(xì)胞、G361mel細(xì)胞
OVCAR-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE10細(xì)胞、SW1417細(xì)胞、LN-382細(xì)胞
TALL-104細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mino細(xì)胞、LTEP-sm 1細(xì)胞、HEK-293-EBNA細(xì)胞
XuanWei Lung Cancer-05細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM 2132細(xì)胞、MFE 280細(xì)胞、R D細(xì)胞
HCC-202細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RT4細(xì)胞、NB1-RGB細(xì)胞、ND7/23細(xì)胞
MOLM-14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C-643細(xì)胞、OCI-Ly07細(xì)胞、PANC0203細(xì)胞
DU_145細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ETCC-007細(xì)胞、FT-293細(xì)胞、RCC 7860細(xì)胞
HCT116細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rat podocyte細(xì)胞、MKN 45細(xì)胞、SK-N-BE(2)C細(xì)胞
RBL2H3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:b.End3細(xì)胞、NCTC 929細(xì)胞、NCI-SNU-449細(xì)胞
G-292, clone A141B1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 766.T細(xì)胞、SCC-1395細(xì)胞、MT4細(xì)胞
Tu-212細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-475細(xì)胞、NCI-H526細(xì)胞、V79-4細(xì)胞
SUPB15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SN12C-PM6細(xì)胞、HRPEpiC細(xì)胞、A 2058細(xì)胞
NW38 Adherent人黑色素瘤細(xì)胞系
Human Foreskin Fibroblast細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:STC-1細(xì)胞、LoMeT-ccRcc細(xì)胞、H-1882細(xì)胞
HSC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAMB435S細(xì)胞、AC29細(xì)胞、D407 RPE細(xì)胞
CA-OV-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HIT T15細(xì)胞、VK2 (E6/E7)細(xì)胞、L6565細(xì)胞
PC-12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-13細(xì)胞、P3X63NS1細(xì)胞、KM933細(xì)胞
IHHA-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:G402細(xì)胞、BEL 7405細(xì)胞、TE-32細(xì)胞
KTC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VMM39細(xì)胞、3T3 Swiss Albino細(xì)胞、HCC-94細(xì)胞
L cell細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C38細(xì)胞、CHO-K1細(xì)胞、Hep-G2細(xì)胞
COV-434細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT-1376細(xì)胞、PNT-1A細(xì)胞、B16BL6細(xì)胞
Swiss3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T6-Swiss albino細(xì)胞、NCI-BL6細(xì)胞、NCIH661細(xì)胞
TK 10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC-116細(xì)胞、AG06814-N細(xì)胞、CAL851細(xì)胞
J-774細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IMR 90細(xì)胞、A9細(xì)胞、Rat-1細(xì)胞
MDA PCa 2b細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO357細(xì)胞、NCI-H78細(xì)胞、HCT/FU細(xì)胞
BC-009細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF-7細(xì)胞、L-540細(xì)胞、Pt-K1細(xì)胞
DSL6A/C1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC-4細(xì)胞、SW 900細(xì)胞、LK-2細(xì)胞
HCC38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2171細(xì)胞、Hs 766.T細(xì)胞、MGC803細(xì)胞
HOEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT(H9)細(xì)胞、GDM1細(xì)胞、EA. hy 926細(xì)胞
FOXNY細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16/F1細(xì)胞、P815細(xì)胞、251 MG細(xì)胞
D-407細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTR-8細(xì)胞、138 MG細(xì)胞、SNU1040細(xì)胞
WILL-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Baby Hamster Kidney from litter No. 21細(xì)胞、BMF細(xì)胞、NCIH2172細(xì)胞
L- cell細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMR 106細(xì)胞、32D CL3細(xì)胞、SK MEL-28細(xì)胞
TE3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT 1376細(xì)胞、NCI-H1650細(xì)胞、GL-261細(xì)胞
NCIH2009細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FD-LSC-1細(xì)胞、CCD1095Sk細(xì)胞、CT26.WT細(xì)胞
LLC-PK(1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Murine Leydig Tumor Cell line-1細(xì)胞、mRTEC細(xì)胞、HLMVEC細(xì)胞
U2-OS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:bEnd3細(xì)胞、SK-RC-52細(xì)胞、OAW-42細(xì)胞
159 PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T2細(xì)胞、H526細(xì)胞、HCC1937細(xì)胞
BE2_C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SJRH30細(xì)胞、HN4細(xì)胞、AE1201細(xì)胞
T. T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Experimental Mammary Tumour-6細(xì)胞、FDC-P1細(xì)胞、HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]細(xì)胞
MDA-MB-157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A 172細(xì)胞、KGN細(xì)胞、LOUNH91細(xì)胞
NCIH929細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-251MG細(xì)胞、HuCCT-1細(xì)胞、MARC145細(xì)胞
LU165細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WIL2-S細(xì)胞、hMSC-BM細(xì)胞、HCT 116細(xì)胞
PL11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BHK細(xì)胞、Madin Darby Canine Kidney細(xì)胞、PF-382細(xì)胞
X63-Ag 8.6.5.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MX1細(xì)胞、FRH-0201細(xì)胞、H-1581細(xì)胞
H1105細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHP 126細(xì)胞、SW579細(xì)胞、D-324MED細(xì)胞
JROECL21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OsA-CL細(xì)胞、HCMEC(BL12-H)細(xì)胞、EBC-1/original細(xì)胞
NCIH2052細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:G361mel細(xì)胞、A10細(xì)胞、Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS細(xì)胞
801-D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IPEC1細(xì)胞、Panc02細(xì)胞、PANC0813細(xì)胞
KHYG-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Y3細(xì)胞、GM00346細(xì)胞、BALB 3T3 clone A31細(xì)胞
HEK/EBNA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:K 562細(xì)胞、HT3細(xì)胞、NCI-H1693細(xì)胞
H211細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UCLA-SO-M21細(xì)胞、HCa/16A3-F細(xì)胞、HGE細(xì)胞
Hs 819.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MPVECs細(xì)胞、NU-GC-3細(xì)胞、M3 Clone M-3細(xì)胞
RINm-5F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Capan-2細(xì)胞、NCIH1781細(xì)胞、hs 68細(xì)胞
CV-1 in Origin Simian-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1993細(xì)胞、PG-4 (S+L-)細(xì)胞、TF-1a細(xì)胞
NW38 Adherent人黑色素瘤細(xì)胞系
FAO-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS 174 T細(xì)胞、CORL23細(xì)胞、NCI-H2330細(xì)胞
GM 637細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TALL 1細(xì)胞、MV-1-Lu細(xì)胞、HCT15細(xì)胞
LI7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BxPC-3細(xì)胞、3T3 J2細(xì)胞、T173細(xì)胞
KU19-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LTEPa2細(xì)胞、GalK1細(xì)胞、PLB-985細(xì)胞
MDA-175細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tn-5細(xì)胞、KY180細(xì)胞、M4e細(xì)胞
Calu-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE-140細(xì)胞、BCAP37細(xì)胞、NCI-BL2141細(xì)胞
U266S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC3T3-E1細(xì)胞、NCI-H2198細(xì)胞、SNU-449細(xì)胞
MCF7ADR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-5細(xì)胞、A549ATCC細(xì)胞、BrCL12細(xì)胞
NIH3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MGH-U1細(xì)胞、266 Bl細(xì)胞、TE-4細(xì)胞
Pa18C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS-766T細(xì)胞、H1954細(xì)胞、Hs688(A)T細(xì)胞
CORL51細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1299細(xì)胞、BJ1細(xì)胞、KMBC細(xì)胞
OVCAR-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE10細(xì)胞、H1836細(xì)胞、Tb1Lu細(xì)胞
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